| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-27页 |
| 1.1 角蛋白 | 第12-14页 |
| 1.1.1 角蛋白简介 | 第12页 |
| 1.1.2 角蛋白结构 | 第12-13页 |
| 1.1.3 角蛋白处理方法 | 第13-14页 |
| 1.2 降解角蛋白微生物 | 第14-16页 |
| 1.2.1 嗜角蛋白真菌 | 第14-15页 |
| 1.2.2 降解角蛋白细菌 | 第15-16页 |
| 1.2.3 降解角蛋白微生物获得方法 | 第16页 |
| 1.3 角蛋白酶 | 第16-19页 |
| 1.3.1 产生角蛋白酶最适条件 | 第16-17页 |
| 1.3.2 角蛋白酶获得方法 | 第17-18页 |
| 1.3.3 角蛋白酶基因 | 第18-19页 |
| 1.4 角蛋白酶的应用 | 第19-21页 |
| 1.4.1 在农业中的应用 | 第19页 |
| 1.4.2 在医药中的应用 | 第19-20页 |
| 1.4.2.1 角蛋白酶在外用药物中应用 | 第19-20页 |
| 1.4.2.2 角蛋白酶应用于清除皮肤鸡眼和胼胝 | 第20页 |
| 1.4.2.3 角蛋白酶应用于治疗青春痘 | 第20页 |
| 1.4.3 作为饲料的添加剂 | 第20页 |
| 1.4.4 作为去垢剂 | 第20-21页 |
| 1.4.5 皮革业的应用 | 第21页 |
| 1.5 基因组改组 | 第21-23页 |
| 1.5.1 遗传多样性的来源 | 第22-23页 |
| 1.5.2 突变 | 第23页 |
| 1.6 原生质体融合 | 第23-24页 |
| 1.7 基因组改组的应用 | 第24-26页 |
| 1.7.1 改进微生物产物产量 | 第24-25页 |
| 1.7.2 改进微生物对环境的适应性 | 第25页 |
| 1.7.3 提高对底物的吸收 | 第25-26页 |
| 1.8 本论文的研究的目的及意义 | 第26-27页 |
| 第二章 角蛋白降解菌的分离和筛选 | 第27-37页 |
| 2.1 材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 样品来源 | 第27页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第27页 |
| 2.1.3 试剂 | 第27页 |
| 2.1.4 培养基 | 第27页 |
| 2.1.5 仪器 | 第27-28页 |
| 2.2 方法 | 第28-30页 |
| 2.2.1 角蛋白降解菌的分离方法 | 第28页 |
| 2.2.2 分离菌株的16S rDNA序列测定和16S rDNA PCR-RFLP分析 | 第28-30页 |
| 2.2.2.1 分离菌株总DNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.2.2.2 16S rDNA的PCR扩增 | 第29页 |
| 2.2.2.3 菌株16S rDNA PCR-RFLP分析 | 第29-30页 |
| 2.2.2.4 菌株16S rDNA序列的测定和分析 | 第30页 |
| 2.2.3 菌株降解能力的检测和抑菌活性的检测 | 第30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-35页 |
| 2.3.1 角蛋白降解菌的分离纯化 | 第30页 |
| 2.3.2 菌株16S rDNA PCR-RFLP分析 | 第30-35页 |
| 2.3.2.1 菌株16S rDNA的PCR扩增 | 第30-31页 |
| 2.3.2.2 16S rDNA酶切图谱 | 第31-33页 |
| 2.3.2.3 16S rDNA酶切图谱组合 | 第33-34页 |
| 2.3.2.4 16S rDNA序列测定和分析 | 第34-35页 |
| 2.3.3 分离菌株角蛋白降解能力的检测和拮抗性检测 | 第35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 角蛋白降解菌ZJT01的鉴定及酶学性质的研究 | 第37-49页 |
| 3.1 材料 | 第37页 |
| 3.1.1 菌株 | 第37页 |
| 3.1.2 试剂 | 第37页 |
| 3.1.3 培养基 | 第37页 |
| 3.2 方法 | 第37-39页 |
| 3.2.1 菌种鉴定 | 第37-38页 |
| 3.2.1.1 菌落的形态观察和电镜观察 | 第37-38页 |
| 3.2.1.2 生理生化试验 | 第38页 |
| 3.2.1.3 16S rDNA序列分析与系统进化树的构建 | 第38页 |
| 3.2.1.4 菌株ZJT01的生长曲线的测定 | 第38页 |
| 3.2.2 酶学性质的研究 | 第38-39页 |
| 3.2.2.1 降解率的观察 | 第38页 |
| 3.2.2.2 发酵温度和时间对羽毛降解率的影响 | 第38页 |
| 3.2.2.3 角蛋白酶活的测定方法 | 第38-39页 |
| 3.2.2.4 pH对角蛋白酶活性的影响 | 第39页 |
| 3.2.2.5 温度对角蛋白酶活性的影响 | 第39页 |
| 3.2.2.6 金属离子和化学试剂对粗酶液活性的影响 | 第39页 |
| 3.3 结果与分析 | 第39-47页 |
| 3.3.1 形态特征 | 第39-40页 |
| 3.3.2 生理生化特征 | 第40-42页 |
| 3.3.3 菌株ZJT0116S rDNA的序列测定与分析及系统发育树的构建 | 第42页 |
| 3.3.4 菌株ZJT01生长曲线的测定结果 | 第42-43页 |
| 3.3.5 菌株ZJT01对羽毛降解率的观察 | 第43-44页 |
| 3.3.6 菌株ZJT01对羽毛降解的最适发酵温度 | 第44-45页 |
| 3.3.7 菌株ZJT01对羽毛降解的最适发酵时间 | 第45页 |
| 3.3.8 pH对角蛋白酶活性的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.9 温度对角蛋白酶活性的影响 | 第46页 |
| 3.3.10 金属离子和化学试剂对粗酶液活性的影响 | 第46-47页 |
| 3.4 讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 角蛋白降解菌ZJT01的基因组改组 | 第49-59页 |
| 4.1 材料 | 第49页 |
| 4.1.1 菌株 | 第49页 |
| 4.1.2 试剂 | 第49页 |
| 4.1.3 培养基 | 第49页 |
| 4.2 方法 | 第49-52页 |
| 4.2.1 菌悬液制备 | 第49-50页 |
| 4.2.2 菌株ZJT01的硫酸二乙酯（DES）诱变 | 第50页 |
| 4.2.3 菌株ZJT01的亚硝基胍（NTG）诱变 | 第50-51页 |
| 4.2.4 原生质体的制备 | 第51页 |
| 4.2.4.1 溶菌酶浓度对原生质体形成率的影响 | 第51页 |
| 4.2.4.2 酶解时间对原生质体形成率的影响 | 第51页 |
| 4.2.4.3 酶解温度对原生质体形成率的影响 | 第51页 |
| 4.2.5 基因组改组 | 第51-52页 |
| 4.2.6 遗传稳定性检测 | 第52页 |
| 4.3 结果与分析 | 第52-56页 |
| 4.3.1 最佳DES诱变条件 | 第52页 |
| 4.3.2 最佳NTG诱变条件 | 第52-53页 |
| 4.3.3 筛选诱变菌株 | 第53-54页 |
| 4.3.4 原生质体形成条件的确定 | 第54-55页 |
| 4.3.5 基因组改组 | 第55-56页 |
| 4.3.6 遗传稳定性 | 第56页 |
| 4.4 讨论 | 第56-59页 |
| 第五章 总结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 附录 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70页 |
