摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
引言 | 第9-10页 |
1 文献综述 | 第10-27页 |
1.1 几丁质脱乙酰基酶的基本特性 | 第10-20页 |
1.1.1 几丁质脱乙酰基酶 | 第10-12页 |
1.1.2 几丁质脱乙酰基酶的基因和结构 | 第12-13页 |
1.1.3 几丁质脱乙酰基酶的催化机制 | 第13-15页 |
1.1.4 金属离子对几丁质脱乙酰基酶的影响 | 第15-16页 |
1.1.5 底物特异性 | 第16页 |
1.1.6 几丁质脱乙酰基酶的生物学功能 | 第16-19页 |
1.1.7 几丁质脱乙酰基酶的应用 | 第19-20页 |
1.2 昆虫几丁质脱乙酰基酶的研究进展 | 第20-26页 |
1.2.1 昆虫几丁质脱乙酰基酶 | 第20-22页 |
1.2.2 昆虫几丁质脱乙酰基酶的分类 | 第22-23页 |
1.2.3 昆虫几丁质脱乙酰基酶的理化性质 | 第23-24页 |
1.2.4 昆虫几丁质脱乙酰基酶的功能 | 第24-26页 |
1.3 本论文的选题依据和研究内容 | 第26-27页 |
1.3.1 选题依据 | 第26页 |
1.3.2 研究内容 | 第26-27页 |
2 家蚕和亚洲玉米螟几丁质脱乙酰基酶1基因的克隆和序列分析 | 第27-37页 |
2.1 引言 | 第27页 |
2.2 实验材料与方法 | 第27-30页 |
2.2.1 供试昆虫 | 第27页 |
2.2.2 试剂和试剂盒 | 第27页 |
2.2.3 总RNA提取及cDNA合成 | 第27-28页 |
2.2.4 PCR反应获取基因全长序列 | 第28-29页 |
2.2.5 保守氨基酸残基的分析 | 第29页 |
2.2.6 结构分析 | 第29-30页 |
2.3 实验结果 | 第30-36页 |
2.3.1 家蚕和亚洲玉米螟蛹总RNA的提取 | 第30页 |
2.3.2 BmCDA1和OfCDA1基因 | 第30-31页 |
2.3.3 BmCDA1和OfCDA1的性质预测 | 第31-32页 |
2.3.4 BmCDA1和OfCDA1的保守氨基酸残基分析 | 第32-34页 |
2.3.5 BmCDA1和OfCDA1的进化分析 | 第34-35页 |
2.3.6 BmCDA1和OfCDA1的结构分析 | 第35-36页 |
2.4 分析讨论 | 第36页 |
2.5 小结 | 第36-37页 |
3 家蚕几丁质脱乙酰基酶1基因的表达分析 | 第37-41页 |
3.1 引言 | 第37页 |
3.2 实验材料与方法 | 第37-38页 |
3.2.1 供试昆虫 | 第37页 |
3.2.2 试剂和试剂盒 | 第37页 |
3.2.3 BmCDA1组织表达特性检测 | 第37-38页 |
3.2.4 BmCDA1发育表达特性检测 | 第38页 |
3.2.5 注射蜕皮激素(20E)后BmCDA1的转录水平分析 | 第38页 |
3.3 实验结果 | 第38-40页 |
3.3.1 BmCDA1在不同组织中的表达模式 | 第38-39页 |
3.3.2 BmCDA1在不同生长发育时期的表达模式 | 第39页 |
3.3.3 注射蜕皮激素(20E)后BmCDA1的表达分析 | 第39-40页 |
3.4 分析讨论 | 第40页 |
3.5 小结 | 第40-41页 |
4 几丁质脱乙酰基酶的重组表达及分离纯化 | 第41-53页 |
4.1 引言 | 第41页 |
4.2 实验材料与方法 | 第41-44页 |
4.2.1 BmCDA1的体外重组表达与分离纯化 | 第41-43页 |
4.2.2 OfCDA1体外重组表达与分离纯化 | 第43-44页 |
4.2.3 ClCDA体外重组表达与分离纯化 | 第44页 |
4.3 实验结果 | 第44-52页 |
4.3.1 BmCDA1的体外重组表达 | 第44-48页 |
4.3.2 OfCDA1体外重组表达与分离纯化 | 第48-50页 |
4.3.3 ClCDA体外重组表达与分离纯化 | 第50-52页 |
4.4 分析讨论 | 第52页 |
4.5 小结 | 第52-53页 |
5 家蚕几丁质脱乙酰基酶1的性质表征 | 第53-62页 |
5.1 引言 | 第53页 |
5.2 实验材料与方法 | 第53-57页 |
5.2.1 蛋白浓度的测定 | 第53页 |
5.2.2 BmCDA1催化活性测定 | 第53-56页 |
5.2.3 BmCDA1几丁质结合活性测定 | 第56-57页 |
5.3 实验结果 | 第57-61页 |
5.3.1 BmCDA1催化活性测定 | 第57-60页 |
5.3.2 BmCDA1几丁质结合活性测定 | 第60-61页 |
5.4 分析讨论 | 第61页 |
5.5 小结 | 第61-62页 |
结论 | 第62-63页 |
展望 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
附录A BmCDA1的DNA序列与编码的氨基酸序列 | 第71-73页 |
附录B OfCDA1的DNA序列与编码的氨基酸序列 | 第73-75页 |
附录C ClCDA的DNA序列与编码的氨基酸序列 | 第75-76页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-78页 |