建立从外周血获得外源基因非整合的诱导性多潜能干细胞的方法
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 | 第12-24页 |
| 胚胎干细胞及其应用 | 第12-13页 |
| iPSCs的出现及其应用 | 第13-14页 |
| 外源基因非整合的iPSCs | 第14-17页 |
| NOA的概况 | 第17页 |
| NOA的发病原因 | 第17-18页 |
| AZF区缺失引起的NOA | 第18-20页 |
| NOA的治疗手段的开发 | 第20-24页 |
| 第二章 | 第24-45页 |
| 实验所用仪器 | 第24-25页 |
| 实验所用材料 | 第25页 |
| 实验所用试剂 | 第25-26页 |
| 实验所用抗体 | 第26页 |
| 基础培养基 | 第26-27页 |
| 培养基添加剂 | 第27页 |
| 实验所用引物 | 第27-31页 |
| 实验所用试剂盒 | 第31页 |
| 实验所用常规耗材 | 第31页 |
| 试剂配置方法 | 第31-35页 |
| 实验方法 | 第35-45页 |
| 一. Western blot | 第35-36页 |
| 二. 基因组DNA抽提 | 第36-37页 |
| 三. 质粒提取 | 第37页 |
| 四. 核型分析 | 第37-38页 |
| 五. ESC及iPSCs的培养,传代,冻存与复苏 | 第38-39页 |
| 六. 外源基因非整合iPSCs的诱导 | 第39-41页 |
| 七. 免疫荧光 | 第41-42页 |
| 八. EB形成与分化 | 第42页 |
| 九. 畸胎瘤形成与切片染色 | 第42-45页 |
| 第三章 | 第45-61页 |
| iPSCs诱导的过程及诱导结果 | 第45-49页 |
| iPSCs的来源鉴定 | 第49-50页 |
| 核型鉴定与载体残余检测 | 第50-52页 |
| iPSCs与ESC细胞的特征的相似性 | 第52-56页 |
| 分化能力检测 | 第56-59页 |
| 遗传缺陷的鉴定 | 第59-61页 |
| 第四章 | 第61-66页 |
| 总结 | 第61页 |
| 讨论 | 第61-66页 |
| 诱导过程及诱导效率 | 第61-62页 |
| 较高的建系成功率 | 第62-63页 |
| 样本来源 | 第63-64页 |
| 非整合策略的优势 | 第64-65页 |
| 材料选择 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
