| PARTⅠ IL-37b基因修饰的骨髓间充质干细胞对DSS诱导的肠炎缓解作用的研究 | 第4-73页 |
| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语/符号说明 | 第8-15页 |
| 前言 | 第15-23页 |
| 研究现状、成果 | 第15-20页 |
| 研究目的、方法 | 第20-23页 |
| 一、IL-37在人溃疡性结肠炎(UC)病变组织中的表达 | 第23-29页 |
| 1.1 对象和方法 | 第23-26页 |
| 1.1.1 人UC标本的收集 | 第23页 |
| 1.1.2 UC病理组织学分级标准 | 第23页 |
| 1.1.3 活检组织总RNA提取 | 第23-24页 |
| 1.1.4 样本c DNA的制备 | 第24页 |
| 1.1.5 Real-time PCR | 第24-25页 |
| 1.1.6 免疫组化（SABC法） | 第25-26页 |
| 1.2 结果 | 第26-28页 |
| 1.2.1 IL-37 m RNA表达水平在人活动性溃疡性结肠炎组织中的表达水平显著高于正常组织 | 第26-27页 |
| 1.2.2 IL-37b蛋白表达水平与人活动性溃疡性结肠炎的病理分级呈正相关 | 第27-28页 |
| 1.3 讨论 | 第28页 |
| 1.4 小结 | 第28-29页 |
| 二、IL-37b腺病毒表达载体（Ad-IL37b）的构建 | 第29-35页 |
| 2.1 对象和方法 | 第29-32页 |
| 2.1.1 IL-37b腺病毒包装质粒的构建 | 第29-30页 |
| 2.1.2 腺病毒的包装 | 第30页 |
| 2.1.3 腺病毒的大量扩增和收集 | 第30-31页 |
| 2.1.4 病毒滴度检测 | 第31-32页 |
| 2.2 结果 | 第32-34页 |
| 2.2.1 IL-37b基因的c DNA序列成功连接入腺病毒包装质粒 | 第32-33页 |
| 2.2.2 腺病毒包装和扩增过程中出现的细胞病变斑 | 第33页 |
| 2.2.3 腺病的滴度测定结果 | 第33-34页 |
| 2.3 讨论 | 第34页 |
| 2.4 小结 | 第34-35页 |
| 三、小鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）的分离培养和鉴定 | 第35-43页 |
| 3.1 对象和方法 | 第35-38页 |
| 3.1.1 小鼠骨髓MSCs的分离 | 第35-36页 |
| 3.1.2 小鼠骨髓MSCs的传代培养与扩增 | 第36页 |
| 3.1.3 小鼠骨髓MSCs的冻存 | 第36页 |
| 3.1.4 小鼠骨髓MSCs的复苏 | 第36-37页 |
| 3.1.5 小鼠骨髓MSCs的免疫表型鉴定 | 第37页 |
| 3.1.6 小鼠骨髓MSCs的多系分化潜能鉴定 | 第37-38页 |
| 3.2 结果 | 第38-41页 |
| 3.2.1 小鼠骨髓MSCs的贴壁培养 | 第38-39页 |
| 3.2.2 小鼠骨髓MSCs的免疫表型 | 第39-40页 |
| 3.2.3 小鼠骨髓MSCs的成脂、成骨分化 | 第40-41页 |
| 3.3 讨论 | 第41-42页 |
| 3.4 小结 | 第42-43页 |
| 四、Ad-IL37b转染MSCs以及IL-37b基因在MSCs中的表达 | 第43-50页 |
| 4.1 对象和方法 | 第43-48页 |
| 4.1.1 腺病毒转染 | 第43页 |
| 4.1.2 细胞总RNA的提取及IL-37b m RNA表达水平的检测 | 第43页 |
| 4.1.3 细胞总蛋白的提取和定量 | 第43-44页 |
| 4.1.4 Western blot检测IL-37b的蛋白表达水平 | 第44-47页 |
| 4.1.5 流式细胞仪检测病毒转染效率 | 第47页 |
| 4.1.6 ELISA检测细胞培养上清中IL-37b蛋白浓度 | 第47-48页 |
| 4.1.7 本部分研究的流程图 | 第48页 |
| 4.2 结果 | 第48-49页 |
| 4.2.1 腺病毒Ad-IL37b感染MSCs的效率 | 第48-49页 |
| 4.2.2 IL-37b在MSC-IL37b中的表达 | 第49页 |
| 4.3 讨论 | 第49页 |
| 4.4 小结 | 第49-50页 |
| 五、MSC-IL37b对DSS诱导的实验性肠炎的缓解作用 | 第50-64页 |
| 5.1 对象和方法 | 第50-53页 |
| 5.1.1 小鼠DSS肠炎模型的构建 | 第50页 |
| 5.1.2 DSS小鼠肠炎模型干预效果评估 | 第50页 |
| 5.1.3 小鼠肠炎病理组织学评分标准 | 第50-51页 |
| 5.1.4 小鼠脾脏单个核细胞的提取 | 第51页 |
| 5.1.5 小鼠脾脏调节性T细胞的流式细胞仪分析 | 第51页 |
| 5.1.6 小鼠脾脏髓系来源的抑制性细胞的流式细胞仪分析 | 第51-52页 |
| 5.1.7 小鼠脾脏来源的CD4+和CD8+细胞内因子染色的流式细胞仪检测 | 第52页 |
| 5.1.8 统计学处理方法 | 第52-53页 |
| 5.2 结果 | 第53-59页 |
| 5.2.1 不同干预肠炎小鼠的体重变化情况 | 第53页 |
| 5.2.2 不同干预肠炎小鼠的生存率比较 | 第53-54页 |
| 5.2.3 不同干预肠炎小鼠的结肠长度比较 | 第54-55页 |
| 5.2.4 不同干预肠炎小鼠的结肠炎症组织学评分 | 第55-56页 |
| 5.2.5 不同干预肠炎小鼠脾脏CD4+ T细胞中Treg所占比例的比较 | 第56-57页 |
| 5.2.6 不同干预肠炎小鼠脾脏髓系来源的抑制性细胞含量的比较 | 第57-58页 |
| 5.2.7 不同干预肠炎小鼠脾脏T中细胞内因子表达情况比较 | 第58-59页 |
| 5.3 讨论 | 第59-63页 |
| 5.4 小结 | 第63-64页 |
| PARTⅠ全文结论 | 第64-65页 |
| PARTⅠ论文创新点 | 第65-66页 |
| PARTⅠ参考文献 | 第66-73页 |
| PART Ⅱ IL-37b基因转染对 4T1小鼠乳腺癌生长速度影响的研究 | 第73-91页 |
| 中文摘要 | 第73-74页 |
| Abstract | 第74-75页 |
| 前言 | 第75-76页 |
| 研究现状、成果 | 第75页 |
| 研究目的、方法 | 第75-76页 |
| 1.对象和方法 | 第76-80页 |
| 1.1 实验动物及实验细胞 | 第76页 |
| 1.2 4T1小鼠乳腺癌细胞的培养 | 第76页 |
| 1.3 4T1细胞系的冻存与复苏 | 第76页 |
| 1.4 小鼠淋巴结T细胞的分离 | 第76-77页 |
| 1.5 免疫磁珠分选法分离CD4+ T细胞和CD8+ T细胞 | 第77-78页 |
| 1.6 IL-37b重组蛋白对T细胞体外活化和增殖的影响 | 第78-79页 |
| 1.7 Ad-IL37b重组腺病毒转染 4T1小鼠乳腺癌细胞 | 第79页 |
| 1.8 IL-37b基因在 4T1-IL37b细胞内表达的检测 | 第79页 |
| 1.9 IL-37b基因转染对 4T1增殖能力的影响 | 第79页 |
| 1.10 丝裂霉素C处理 4T1-IL37b或 4T1-e GFP细胞 | 第79页 |
| 1.11 小鼠成瘤实验 | 第79-80页 |
| 1.12 统计学处理方法 | 第80页 |
| 2.结果 | 第80-84页 |
| 2.1 IL-37b基因在 4T1-IL37b细胞中的表达及对癌细胞增殖的影响 | 第80-81页 |
| 2.2 4T1、4T1-e GFP 和 4T1-IL37b 在 BALB/c 小鼠体内肿瘤生长速度的比较 | 第81-82页 |
| 2.3 丝裂霉素C处理的 4T1-IL37b细胞对 4T1肿瘤生长的影响 | 第82-83页 |
| 2.4 重组IL-37b蛋白对T细胞体外增殖的影响 | 第83页 |
| 2.5 4T1-IL37b在BALB/c裸鼠和NOD/SCID小鼠体内的肿瘤生长情况 | 第83-84页 |
| 3.讨论 | 第84-87页 |
| PARTⅡ全文结论 | 第87页 |
| PARTⅡ论文创新点 | 第87-88页 |
| PARTⅡ参考文献 | 第88-91页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第91-93页 |
| 附录 | 第93-98页 |
| 一、主要仪器 | 第93-94页 |
| 二、主要试剂 | 第94-96页 |
| 三、主要溶液配制 | 第96-98页 |
| 综述 | 第98-115页 |
| 综述参考文献 | 第109-115页 |
| 致谢 | 第115页 |
