中文摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
第一章 前言 | 第9-15页 |
1.1 植物Na~+/H~+反向转运体的概况 | 第9-13页 |
1.1.1 Na~+/H~+反向转运体的生理功能 | 第9页 |
1.1.2 拟南芥Na~+/H~+反向转运体在细胞中的分布 | 第9-10页 |
1.1.3 AtNHX1 | 第10-11页 |
1.1.4 SOS系统 | 第11-13页 |
1.2 胡杨PeNHXs | 第13-14页 |
1.3 研究目的及意义 | 第14-15页 |
第二章 材料与方法 | 第15-28页 |
2.1 实验材料 | 第15页 |
2.2 试剂 | 第15-16页 |
2.3 实验器材 | 第16页 |
2.4 引物 | 第16页 |
2.5 基因克隆 | 第16-23页 |
2.5.1 PCR扩增 | 第16-17页 |
2.5.2 扩增产物回收 | 第17-18页 |
2.5.3 基因和载体酶切 | 第18页 |
2.5.4 载体与目的基因连接 | 第18-19页 |
2.5.5 大肠杆菌感受态制备及转化 | 第19-20页 |
2.5.6 阳性单克隆的检测 | 第20-21页 |
2.5.7 提取质粒 | 第21页 |
2.5.8 酶切验证 | 第21页 |
2.5.9 测序分析 | 第21-22页 |
2.5.10 农杆菌转化 | 第22-23页 |
2.6 Protocol烟草瞬时表达体系的建立 | 第23-24页 |
2.6.1 菌液配制与烟草注射 | 第23页 |
2.6.2 烟草叶片下表皮细胞在Confocal下的荧光观察 | 第23-24页 |
2.7 转基因植株的制备 | 第24-25页 |
2.7.1 携带目的载体的农杆菌侵染拟南芥,得到T1代植株 | 第24页 |
2.7.2 T1代转基因植株的筛选 | 第24-25页 |
2.7.3 转基因植株T2代筛选 | 第25页 |
2.7.4 转基因植株纯合体筛选 | 第25页 |
2.7.5 PeNHX3转基因植株荧光观察 | 第25页 |
2.8 NaCl、LiCl和Mannitol处理PeNHX3转基因植株 | 第25-28页 |
2.8.1 NaCl处理PeNHX3转基因植株 | 第25-27页 |
2.8.2 LiCl处理PeNHX3转基因植株 | 第27页 |
2.8.3 甘露醇处理PeNHX3转基因植株 | 第27-28页 |
第三章 实验结果 | 第28-47页 |
3.1 PeNHX3的基因克隆 | 第28-29页 |
3.2 PeNHX3的亚细胞定位分析 | 第29-30页 |
3.3 用PeNHX3基因转化拟南芥 | 第30-34页 |
3.3.1 筛选Atnhx1突变体纯合体 | 第30页 |
3.3.2 将PeNHX3基因转入Atsos1、Atnhx1突变体和拟南芥Co1-0 | 第30-33页 |
3.3.3 T3代转基因植株的纯合体筛选 | 第33-34页 |
3.4 PeNHX3转基因植株荧光表达观察 | 第34页 |
3.5 PeNHX3转基因植株的生长表型分析 | 第34-41页 |
3.5.1 PeNHX3转基因植株耐盐性分析 | 第34-38页 |
3.5.2 PeNHX3转基因植株耐渗透胁迫能力分析 | 第38-39页 |
3.5.3 PeNHX3转基因植株耐LiCl胁迫的分析 | 第39-41页 |
3.6 PeNHX3耐Li胁迫的机理分析 | 第41-47页 |
3.6.1 AtNHX1-PeNHX3-C399和AtNHX1-PeNHX3-C537的基因克隆 | 第41-44页 |
3.6.2 将AtNHX1-PeNHX3-C399和AtNHX1-PeNHX3-C537基因转入拟南芥Col-0和Atnhx1突变体 | 第44-47页 |
第四章 讨论 | 第47-49页 |
4.1 胡杨PeNHX3可以提高拟南芥的耐盐胁迫能力 | 第47页 |
4.2 胡杨PeNHX3提高拟南芥的耐渗透胁迫能力 | 第47-48页 |
4.3 胡杨PeNHX3可以提高拟南芥的耐Li~+胁迫能力 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
致谢 | 第53页 |