| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 文献综述 | 第12-30页 |
| 第一章 影响机体抵抗分支杆菌感染的遗传因素 | 第12-19页 |
| 1.1 天然免疫力相关巨噬细胞蛋白 1 | 第13-14页 |
| 1.2 细胞内病原抗性基因 1 | 第14页 |
| 1.3 γ-干扰素受体及信号通路 | 第14-15页 |
| 1.4 维生素D及其受体 | 第15-16页 |
| 1.5 人类白细胞抗原 | 第16-17页 |
| 1.6 巨噬细胞移动抑制因子 | 第17页 |
| 1.7 全基因组关联研究 | 第17-18页 |
| 1.8 展望 | 第18-19页 |
| 第二章 Nramp1 研究进展 | 第19-30页 |
| 2.1 Nramp基因家族 | 第19-21页 |
| 2.2 Nramp1 基因抗结核研究 | 第21-24页 |
| 2.2.1 机体免疫力与结核分支杆菌的相互作用 | 第21-22页 |
| 2.2.2 Nramp1 基因多态性研究 | 第22-23页 |
| 2.2.3 缺氧诱导因子 1α 与Nramp1 | 第23-24页 |
| 2.3 Nramp1 基因转录调控 | 第24-28页 |
| 2.3.1 Nramp1 近端启动子 | 第24-25页 |
| 2.3.2 组蛋白修饰模式 | 第25-26页 |
| 2.3.3 Nramp1 表达调控元件 | 第26-28页 |
| 2.4 本研究的内容及意义 | 第28-30页 |
| 试验研究 | 第30-97页 |
| 第三章 Nramp1 细胞特异性表达载体构建及启动子活性分析 | 第30-53页 |
| 3.1 材料 | 第30-33页 |
| 3.1.1 实验动物和组织细胞 | 第30页 |
| 3.1.2 菌株和质粒 | 第30-31页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第31页 |
| 3.1.4 测试化验加工 | 第31页 |
| 3.1.5 引物设计 | 第31-33页 |
| 3.2 方法 | 第33-42页 |
| 3.2.1 筛选报告基因序列扩增及功能检测 | 第33-35页 |
| 3.2.2 载体pLoxP-2A-A的构建 | 第35-36页 |
| 3.2.3 荷斯坦奶牛Nramp1 基因启动子区扩增及活性检测 | 第36-38页 |
| 3.2.4 Nramp1 细胞特异性表达载体pLoxP-2A-N载体构建及其功能验证 | 第38-42页 |
| 3.3 结果 | 第42-49页 |
| 3.3.1 筛选报告基因序列扩增及功能检测 | 第42-44页 |
| 3.3.2 载体pLoxP-2A-A的构建 | 第44-45页 |
| 3.3.3 荷斯坦奶牛Nramp1 基因启动子区扩增及活性检测 | 第45-46页 |
| 3.3.4 Nramp1 细胞特异性表达载体pLoxP-2A-N构建及其功能验证 | 第46-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-52页 |
| 3.5 结论 | 第52-53页 |
| 第四章 转牛Nramp1 基因成纤维细胞株筛选及鉴定 | 第53-69页 |
| 4.1 材料 | 第53-55页 |
| 4.1.1 实验动物和组织细胞 | 第53页 |
| 4.1.2 菌株和质粒 | 第53页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第53-54页 |
| 4.1.4 引物设计 | 第54-55页 |
| 4.2 方法 | 第55-62页 |
| 4.2.1 新生荷斯坦奶牛成纤维细胞的分离培养 | 第55-56页 |
| 4.2.2 转Nramp1 基因成纤维细胞筛选 | 第56-58页 |
| 4.2.3 转Nramp1 基因成纤维细胞株鉴定 | 第58-62页 |
| 4.3 结果 | 第62-67页 |
| 4.3.1 新生荷斯坦奶牛成纤维细胞的分离培养 | 第62页 |
| 4.3.2 转Nramp1 基因成纤维细胞筛选 | 第62-65页 |
| 4.3.3 转Nramp1 基因成纤维细胞鉴定 | 第65-67页 |
| 4.4 讨论 | 第67-68页 |
| 4.5 小结 | 第68-69页 |
| 第五章 转Nramp1 基因牛的生产与鉴定 | 第69-97页 |
| 5.1 材料 | 第69-71页 |
| 5.1.1 实验动物和组织细胞 | 第69页 |
| 5.1.2 菌株和质粒 | 第69页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第69-70页 |
| 5.1.4 引物设计 | 第70-71页 |
| 5.2 方法 | 第71-80页 |
| 5.2.1 SCNT胚胎体外培养条件优化 | 第71-74页 |
| 5.2.2 转Nramp1 基因重构胚的培养 | 第74-75页 |
| 5.2.3 转Nramp1 基因牛生产及鉴定 | 第75-80页 |
| 5.3 结果 | 第80-91页 |
| 5.3.1 培养液添加Vit-C对牛SCNT胚胎发育的影响 | 第80-85页 |
| 5.3.2 转Nramp1 基因克隆胚的制备 | 第85-86页 |
| 5.3.3 转Nramp1 基因克隆牛的生产 | 第86-91页 |
| 5.4 讨论 | 第91-96页 |
| 5.5 小结 | 第96-97页 |
| 结论 | 第97-98页 |
| 创新之处与进一步研究的课题 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-115页 |
| 附录 | 第115-118页 |
| 缩略 词 | 第118-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
| 作者简介 | 第121-122页 |
