| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-29页 |
| ·结核分枝杆菌的主要抗原及结核病的诊断 | 第12-18页 |
| ·结核病简介 | 第12-13页 |
| ·结核杆菌的主要抗原 | 第13-17页 |
| ·酶联免疫斑点技术在结核病诊断中的应用 | 第17-18页 |
| ·毕赤酵母表达外源蛋白 | 第18-29页 |
| ·酵母表达系统的发展 | 第18-19页 |
| ·毕赤酵母的优缺点 | 第19-20页 |
| ·宿主菌株 | 第20-21页 |
| ·毕赤酵母表达载体 | 第21-24页 |
| ·外源蛋白在毕赤酵母中的表达 | 第24-28页 |
| ·毕赤酵母表达系统的应用与展望 | 第28-29页 |
| 第二章 结核分枝杆菌抗原蛋白ESAT6 在毕赤酵母中的克隆表达 | 第29-43页 |
| ·材料与方法 | 第29-36页 |
| ·材料 | 第29-31页 |
| ·方法 | 第31-36页 |
| ·结果 | 第36-41页 |
| ·PCR 得到esat6 基因 | 第36页 |
| ·pPic9k-esat6 重组质粒的构建 | 第36-39页 |
| ·pPic9k-esat6 质粒线性化 | 第39-40页 |
| ·高产菌株的筛选 | 第40页 |
| ·毕赤酵母表达ESAT6 蛋白 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 结核分枝杆菌ESAT6 抗原的重组二聚体rdESART6 在毕赤酵母中的克隆表达、纯化及其抗原性的鉴定 | 第43-64页 |
| ·材料与方法 | 第43-49页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-49页 |
| ·结果 | 第49-61页 |
| ·PCR 得到rdesat6 基因 | 第49-50页 |
| ·rdesat6 基因克隆到pET28a 载体 | 第50-52页 |
| ·PCR 得到带His-Tag 的rdesat6 基因 | 第52-53页 |
| ·重组质粒pPic9k-rdesat6-his 的构建 | 第53-55页 |
| ·pPic9k-rdesat6-his 质粒线性化 | 第55-56页 |
| ·高产菌株的筛选 | 第56页 |
| ·毕赤酵母发酵表达rdESAT6 蛋白 | 第56-58页 |
| ·rdESAT6 蛋白纯化 | 第58-59页 |
| ·rdESAT6 蛋白去糖基化 | 第59-60页 |
| ·Elispot | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| 第四章 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 研究生期间科研成果 | 第75-76页 |
| 附录 | 第76-80页 |
| 附录一 符号与缩略语说明 | 第76-78页 |
| 附录二 Map of pPic9k | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
