| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第12-31页 |
| 1.1 肝炎病毒概况 | 第12-15页 |
| 1.1.1 乙型肝炎病毒(HBV) | 第12-13页 |
| 1.1.2 丙型肝炎病毒(HCV) | 第13-15页 |
| 1.2 核酸提取方法 | 第15-18页 |
| 1.2.1 液相核酸提取法 | 第15-16页 |
| 1.2.2 固相核酸提取法 | 第16-18页 |
| 1.3 病毒核酸检测方法 | 第18-22页 |
| 1.3.1 免疫学检测 | 第18-20页 |
| 1.3.2 核酸检测技术 | 第20-22页 |
| 1.4 本论文研究内容及意义 | 第22-24页 |
| 参考文献 | 第24-31页 |
| 第二章 基于磁性纳米颗粒的DNA和RNA同时提取方法的建立 | 第31-50页 |
| 2.1 引言 | 第31-33页 |
| 2.2 材料与方法 | 第33-35页 |
| 2.2.1 材料 | 第33页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第33-35页 |
| 2.2.3 主要仪器及设备 | 第35页 |
| 2.3 实验方法 | 第35-38页 |
| 2.3.1 细胞和细菌培养 | 第35-36页 |
| 2.3.2 核酸提取试剂配制 | 第36页 |
| 2.3.3 核酸提取 | 第36页 |
| 2.3.4 不同因素对核酸提取的影响 | 第36-37页 |
| 2.3.5 核酸浓度与纯度检测 | 第37页 |
| 2.3.6 RNA反转录 | 第37-38页 |
| 2.3.7 聚合酶链式反应 | 第38页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第38-46页 |
| 2.4.1 基于磁分离的细菌核酸提取 | 第38-41页 |
| 2.4.1.1 细菌核酸提取条件优化 | 第38-41页 |
| 2.4.1.2 细菌核酸的PCR和RT-PCR验证 | 第41页 |
| 2.4.2 基于磁分离的细胞核酸提取 | 第41-44页 |
| 2.4.2.1 细胞核酸提取条件优化 | 第41-43页 |
| 2.4.2.2 PCR和RT-PCR验证 | 第43-44页 |
| 2.4.3 病毒血清的核酸提取 | 第44-46页 |
| 2.4.3.1 GuHCl浓度的优化 | 第44-45页 |
| 2.4.3.2 裂解液pH的优化 | 第45页 |
| 2.4.3.3 PCR和RT-PCR扩增验证 | 第45-46页 |
| 2.5 本章小结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 第三章 基于磁性纳米颗粒、多重PCR及化学发光技术的病毒检测方法的建立 | 第50-64页 |
| 3.1 引言 | 第50-51页 |
| 3.2 材料与方法 | 第51-54页 |
| 3.2.1 主要实验材料 | 第51-52页 |
| 3.2.2 实验所用核酸序列 | 第52页 |
| 3.2.3 主要仪器及设备 | 第52-53页 |
| 3.2.4 实验方法 | 第53-54页 |
| 3.2.4.1 病毒核酸提取 | 第53页 |
| 3.2.4.2 一步法反转录多重扩增 | 第53页 |
| 3.2.4.3 MNPs表面羧基化及探针修饰 | 第53-54页 |
| 3.2.4.4 DNA杂交 | 第54页 |
| 3.2.4.5 化学发光检测 | 第54页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第54-60页 |
| 3.3.1 多重PCR条件优化及验证 | 第54-56页 |
| 3.3.2 HBV杂交条件优化 | 第56-57页 |
| 3.3.3 HCV杂交条件优化 | 第57-58页 |
| 3.3.4 HBV/HCV单重PCR扩增特异性及灵敏度探究 | 第58-59页 |
| 3.3.5 HBV/HCV多重PCR扩增特异性及灵敏度探究 | 第59-60页 |
| 3.4 本章小节 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 第四章 基于环介导等温扩增及化学发光技术禽流感病毒(H7N9)检测方法研究 | 第64-77页 |
| 4.1 引言 | 第64-65页 |
| 4.2 材料与方法 | 第65-68页 |
| 4.2.1 实验材料与仪器 | 第65-67页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第67-68页 |
| 4.2.2.1 H7N9病毒RNA序列合成 | 第67页 |
| 4.2.2.2 RT-LAMP扩增及琼脂糖凝胶电泳验证 | 第67页 |
| 4.2.2.3 HA和NA基因化学发光检测 | 第67-68页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第68-72页 |
| 4.3.1 RT-LAMP扩增温度优化 | 第68-69页 |
| 4.3.2 HA和NA基因化学发光检测 | 第69页 |
| 4.3.3 探针浓度对化学发光的影响 | 第69-70页 |
| 4.3.4 杂交温度对化学发光的影响 | 第70页 |
| 4.3.5 杂交时间对化学发光的影响 | 第70-71页 |
| 4.3.6 灵敏度检验 | 第71-72页 |
| 4.4 本章小结 | 第72页 |
| 参考文献 | 第72-77页 |
| 第五章 总结与展望 | 第77-80页 |
| 5.1 总结 | 第77-78页 |
| 5.2 展望 | 第78-80页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
