摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略语 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-16页 |
1 朱砂叶螨 | 第12页 |
2 朱砂叶螨抗药性研究概况 | 第12-13页 |
3. 钠通道基因与kdr抗性 | 第13-16页 |
·拟除虫菊酯与昆虫(螨)钠离子通道研究 | 第13页 |
·kdr研究进展 | 第13-14页 |
·与kdr抗性相关的钠通道基因突变 | 第14-16页 |
引言 | 第16-18页 |
第二章 朱砂叶螨的抗性水平测定 | 第18-24页 |
1 材料与方法 | 第18-19页 |
·供试朱砂叶螨 | 第18页 |
·主要供试药剂 | 第18页 |
·生物测定方法 | 第18-19页 |
2 结果与分析 | 第19-21页 |
·室内朱砂叶螨品系的生物测定 | 第19页 |
·朱砂叶螨不同地理种群的生物测定 | 第19-20页 |
·室内抗性朱砂叶螨品系对联苯菊酯、高效氟氯氰菊酯和阿维菌素的交互抗性 | 第20页 |
·增效剂对室内朱砂叶螨敏感和抗性品系的生物测定 | 第20-21页 |
3 讨论 | 第21-24页 |
第三章 朱砂叶螨实验种群生态学研究 | 第24-30页 |
1 材料与方法 | 第24-25页 |
·供试朱砂叶螨 | 第24页 |
·主要供试仪器 | 第24页 |
·实验设计 | 第24-25页 |
·实验条件设置 | 第24页 |
·饲养方式 | 第24页 |
·记录项目 | 第24页 |
·数据处理 | 第24-25页 |
2 结果与分析 | 第25-27页 |
·抗性和敏感品系各螨态及世代的发育历期 | 第25页 |
·朱砂叶螨年龄特征生殖力及存活曲线 | 第25-27页 |
·抗性和敏感品系的生命生殖力表 | 第27页 |
·抗性和敏感品系的相对适合度 | 第27页 |
3 讨论 | 第27-30页 |
第四章 朱砂叶螨钠通道基因的克隆与分析 | 第30-50页 |
第一节 钠通道基因的克隆与序列分析 | 第30-45页 |
1 材料与方法 | 第30-36页 |
·供试朱砂叶螨 | 第30页 |
·主要试剂和仪器 | 第30-31页 |
·试剂 | 第30页 |
·仪器 | 第30-31页 |
·常用储备液及培养基的配制 | 第31页 |
·朱砂叶螨总RNA的提取 | 第31-32页 |
·朱砂叶螨钠通道基因片段的扩增 | 第32-34页 |
·引物的设计 | 第32-33页 |
·朱砂叶螨钠通道基因cDNA片段的扩增 | 第33-34页 |
·目的片段的克隆和测序 | 第34-36页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第34页 |
·目的片段的回收 | 第34-35页 |
·目的片段与pMD-19T载体的体外连接 | 第35页 |
·质粒转化大肠杆菌 | 第35页 |
·蓝白斑筛选 | 第35页 |
·重组质粒的菌液PCR扩增鉴定 | 第35-36页 |
·测序 | 第36页 |
2 结果与分析 | 第36-44页 |
·朱砂叶螨总RNA的提取 | 第36页 |
·朱砂叶螨钠通道Ⅰ S1-IVS6区域的扩增 | 第36-40页 |
·朱砂叶螨钠通道基因序列分析 | 第40-44页 |
·钠通道基因序列的同源性分析及进化树 | 第40-41页 |
·朱砂叶螨钠通道基因序列中的选择性剪接变种 | 第41-44页 |
·突变位点的鉴定 | 第44页 |
3 讨论 | 第44-45页 |
第二节 朱砂叶螨不同地理种群kdr突变频率 | 第45-50页 |
1 材料与方法 | 第45-46页 |
·供试朱砂叶螨 | 第45页 |
·主要试剂和仪器 | 第45页 |
·常用储备液及培养基的配制 | 第45页 |
·朱砂叶螨总RNA的提取 | 第45-46页 |
·朱砂叶螨钠通道基因片段的扩增 | 第46页 |
·引物的设计 | 第46页 |
·朱砂叶螨钠通道基因cDNA片段的扩增 | 第46页 |
·目的基因基因片段的检测及测序 | 第46页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第46页 |
·测序 | 第46页 |
2. 结果与分析 | 第46-48页 |
3 讨论 | 第48-50页 |
第五章 朱砂叶螨钠通道基因mRNA的表达研究 | 第50-58页 |
1 材料与方法 | 第50-52页 |
·供试朱砂叶螨 | 第50页 |
·主要试剂及仪器 | 第50页 |
·引物设计及合成 | 第50-51页 |
·无DNA污染的cDNA的合成 | 第51页 |
·real-time PCR条件的优化 | 第51页 |
·熔解曲线分析 | 第51页 |
·标准曲线的建立 | 第51-52页 |
·朱砂叶螨不同品系钠通道基因mRNA定量检测 | 第52页 |
·数据分析 | 第52页 |
2 结果与分析 | 第52-55页 |
·朱砂叶螨无DNA污染的总RNA的抽提 | 第52-53页 |
·标准曲线制作 | 第53-54页 |
·朱砂叶螨不同品系表达量的测定 | 第54-55页 |
3 讨论 | 第55-58页 |
主要参考文献 | 第58-68页 |
附录 | 第68-70页 |
在读期间发表的论文 | 第70-72页 |
致谢 | 第72页 |