| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 1 绪论 | 第11-23页 |
| ·葱蝇乙酰胆碱酯酶的研究目的与意义 | 第11页 |
| ·葱蝇及其研究现状 | 第11-13页 |
| ·葱蝇的生物学特征 | 第11-12页 |
| ·葱蝇的分子研究现状 | 第12-13页 |
| ·乙酰胆碱酯酶的研究进展 | 第13-18页 |
| ·乙酰胆碱酯酶的来源 | 第13页 |
| ·乙酰胆碱酯酶的分离纯化研究 | 第13-14页 |
| ·乙酰胆碱酯酶的分子形式和三维结构 | 第14-15页 |
| ·乙酰胆碱酯酶的基因结构和基因克隆 | 第15-17页 |
| ·乙酰胆碱酯酶在农残检测和医学方面的应用 | 第17-18页 |
| ·乙酰胆碱酯酶的固定化研究 | 第18页 |
| ·乙酰胆碱酯酶的生化特性研究 | 第18-23页 |
| ·乙酰胆碱酯酶动力学参数 | 第18-20页 |
| ·乙酰胆碱酯酶在抗药中的作用 | 第20-21页 |
| ·有机磷农药的毒理作用 | 第21-23页 |
| 2 葱蝇乙酰胆碱酯酶的分离纯化 | 第23-34页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·实验虫源 | 第23页 |
| ·实验试剂 | 第23-24页 |
| ·实验仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-27页 |
| ·粗酶的提取 | 第24页 |
| ·TritonX-100 的最适浓度测定 | 第24页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第24-25页 |
| ·透析 | 第25页 |
| ·酶活力测定 | 第25-26页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第26页 |
| ·亲和层析 | 第26-27页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第27页 |
| ·结果与分析 | 第27-31页 |
| ·蛋白浓度标准曲线 | 第27-28页 |
| ·提取缓冲液中 TritonX-100 的最适浓度 | 第28-29页 |
| ·硫酸铵沉淀 | 第29页 |
| ·酶的亲和层析纯化 | 第29-30页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-34页 |
| 3 葱蝇乙酰胆碱酯酶生化性质研究 | 第34-44页 |
| ·实验材料与方法 | 第34-35页 |
| ·供试酶源 | 第34页 |
| ·供试药剂 | 第34页 |
| ·仪器 | 第34-35页 |
| ·粗酶液的酶学性质研究 | 第35-36页 |
| ·粗酶液的制备 | 第35页 |
| ·pH 对粗酶液活力的影响 | 第35页 |
| ·温度对粗酶活力的影响 | 第35-36页 |
| ·毒扁豆碱对粗酶液的抑制中浓度的测定 | 第36页 |
| ·纯化 AChE 的酶学性质研究 | 第36-38页 |
| ·pH 对纯化 AChE 活力的影响 | 第36页 |
| ·温度对纯化 AChE 活力的影响 | 第36-37页 |
| ·底物浓度对纯化 AChE 活力影响及其 Km 测定 | 第37-38页 |
| ·毒扁豆碱对纯化 AChE 的 IC50的测定 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-43页 |
| ·粗酶液的最适pH 值 | 第38页 |
| ·粗酶液的最适温度 | 第38-39页 |
| ·扁豆碱对粗酶液的抑制中浓度 IC50的测定 | 第39-40页 |
| ·纯化 AChE 的最适反应pH 值 | 第40页 |
| ·纯化 AChE 的最适反应温度 | 第40-41页 |
| ·底物浓度(ATCh)对纯化 AChE 活力的影响 | 第41页 |
| ·纯化 AChE 反应动力学常数 Km 的测定 | 第41-42页 |
| ·扁豆碱对纯化 AChE 的抑制中浓度的测定 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| 4 葱蝇乙酰胆碱酯酶的毒理学特性研究 | 第44-48页 |
| ·实验材料 | 第44-45页 |
| ·供试昆虫及饲养条件 | 第44页 |
| ·实验试剂 | 第44页 |
| ·实验仪器 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45页 |
| ·酶源制备 | 第45页 |
| ·酶活力测定 | 第45页 |
| ·测定各群体AChE 对底物(ATCh)的Km 值 | 第45页 |
| ·双分子反应速率常数ki 值的测定 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-46页 |
| ·葱蝇敏感群体和抗性群体AChE 的Km 和Vmax 值比较 | 第45-46页 |
| ·葱蝇敏感群体和抗性群体AChE 的Ki 值比较 | 第46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 5 主要结论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 附录A： 攻读硕士学位期间发表论文及科研情况 | 第57-58页 |
| 附录B： 缩略词 | 第58-59页 |
| 附录C： 常规溶液的配制 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
