论文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-16页 |
第一章 综述 | 第16-33页 |
1 γ-聚谷氨酸概述 | 第16-21页 |
·γ-聚谷氨酸的理化性质 | 第16页 |
·γ-聚谷氨酸的应用 | 第16-19页 |
·γ-聚谷氨酸的生产方法 | 第19-20页 |
·溶氧对γ-聚谷氨酸合成的影响 | 第20-21页 |
2 透明颤菌血红蛋白 | 第21-27页 |
·透明颤菌血红蛋白概述 | 第21页 |
·透明颤菌血红蛋白的结构特性 | 第21页 |
·透明颤菌血红蛋白的克隆表达及调控 | 第21-22页 |
·透明颤菌血红蛋白的应用 | 第22-27页 |
3 纳米氧气泡 | 第27-32页 |
·纳米气泡简介 | 第27页 |
·纳米气泡的发现 | 第27-28页 |
·纳米气泡的形成 | 第28-30页 |
·纳米气泡的性质 | 第30-31页 |
·纳米气泡的应用前景 | 第31-32页 |
4 本研究的目的和意义 | 第32-33页 |
第二章 透明颤菌血红蛋白在大肠杆菌中的克隆、表达及活性测定 | 第33-67页 |
第一节 PET28A(+)-HIS(+)-VGB的克隆、表达及活性测定 | 第33-53页 |
1 材料 | 第34-35页 |
·菌种与质粒 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34页 |
·培养基 | 第34-35页 |
·主要仪器和设备 | 第35页 |
·基因优化网址 | 第35页 |
·计算机分析软件 | 第35页 |
2 方法 | 第35-44页 |
·透明颤菌血红蛋白基因vgb密码子的优化 | 第35页 |
·重组质粒pET28a(+)-His(+)-vgb在大肠杆菌DH5α中的克隆 | 第35-40页 |
·融合血红蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第40-43页 |
·重组菌生长情况的检测 | 第43页 |
·融合血红蛋白活性检测 | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-53页 |
·透明颤菌血红蛋白基因vgb密码子的优化 | 第44-45页 |
·透明颤菌血红蛋白基因vgb的获得 | 第45-46页 |
·重组质粒pET28a(+)-His(+)-vgb在大肠杆菌DH5α中的克隆 | 第46-48页 |
·融合血红蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第48-50页 |
·融合血红蛋白的可溶性表达鉴定 | 第50-52页 |
·融合血红蛋白的表达对大肠杆菌生长的影响 | 第52页 |
·融合血红蛋白活性检测 | 第52-53页 |
第二节 PET28A(+)-HIS(-)-VGB的克隆、表达及活性测定 | 第53-67页 |
1 材料 | 第53-54页 |
·菌种和质粒 | 第53页 |
·试剂和药品 | 第53-54页 |
·主要仪器和设备 | 第54页 |
·分析软件 | 第54页 |
2 方法 | 第54-59页 |
·pET28a(+)-His(-)-vgb表达载体的构建 | 第54-58页 |
·血红蛋白的在大肠杆菌中的诱导表达 | 第58页 |
·血红蛋白的可溶性鉴定 | 第58页 |
·血红蛋白的表达对大肠杆菌活性的影响 | 第58页 |
·血红蛋白活性检测 | 第58页 |
·L-天冬酰胺酶活性的测定 | 第58-59页 |
3 结果与分析 | 第59-65页 |
·目的片段获得 | 第59-60页 |
·重组pET28a(+)-His(-)-vgb的构建过程 | 第60-62页 |
·血红蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第62页 |
·血红蛋白的可溶性表达鉴定 | 第62-63页 |
·血红蛋白的表达对大肠杆菌生长的影响 | 第63-64页 |
·血红蛋白活性测定 | 第64页 |
·L-天冬酰胺酶活性的测定 | 第64-65页 |
4 讨论 | 第65-67页 |
第三章 透明颤菌血红蛋白在枯草芽孢杆菌中的克隆、表达及活性测定 | 第67-98页 |
第一节 PHT_(43)-VGB的克隆、表达及活性测定 | 第67-77页 |
1 材料 | 第68页 |
·菌种与质粒 | 第68页 |
·主要试剂 | 第68页 |
·培养基 | 第68页 |
·主要仪器和设备 | 第68页 |
·计算机分析软件 | 第68页 |
2 方法 | 第68-72页 |
·重组质粒pHT_(43)-vgb在大肠杆菌DH5α中的克隆 | 第68-71页 |
·重组质粒pHT_(43)-vgb转化枯草芽孢杆菌DB403 | 第71页 |
·血红蛋白在枯草芽孢杆菌DB403中的诱导表达 | 第71-72页 |
·凝胶成像分析 | 第72页 |
·血红蛋白的活性检测 | 第72页 |
3 结果与分析 | 第72-77页 |
·重组质粒pHT_(43)-vgb在大肠杆菌DH5α中的克隆 | 第72-75页 |
·血红蛋白在枯草芽孢杆菌中的诱导表达 | 第75-76页 |
·血红蛋白活性检测 | 第76-77页 |
第二节 PLJ-VGB克隆、表达及活性测定 | 第77-85页 |
1 材料 | 第77-78页 |
·菌种与质粒 | 第77页 |
·主要试剂 | 第77页 |
·培养基 | 第77页 |
·主要仪器和设备 | 第77页 |
·计算机分析软件 | 第77-78页 |
2 方法 | 第78-81页 |
·重组质粒pLJ-vgb在大肠杆菌DH5α中的克隆 | 第78-79页 |
·重组质粒pLJ-vgb转化枯草芽孢杆菌DB403 | 第79-80页 |
·血红蛋白在枯草芽孢杆菌DB403中的诱导表达 | 第80页 |
·凝胶成像分析 | 第80页 |
·菌体生长情况的检测 | 第80页 |
·血红蛋白的活性检测 | 第80-81页 |
3 结果与分析 | 第81-85页 |
·重组质粒pLJ-vgb在大肠杆菌DH5α中的克隆 | 第81-83页 |
·血红蛋白在枯草芽孢杆菌DB403中的诱导表达 | 第83-84页 |
·血红蛋白的表达对枯草芽孢杆菌生长的影响 | 第84-85页 |
·血红蛋白活性检测 | 第85页 |
第三节 PLJ-P-VGB的克隆、表达及活性测定 | 第85-98页 |
1 材料 | 第85-86页 |
2 方法 | 第86-90页 |
·重组质粒pLJ-p-vgb在大肠杆菌DH5α中的克隆 | 第86-89页 |
·重组质粒pLJ-p-vgb转化枯草芽孢杆菌DB403 | 第89页 |
·血红蛋白在枯草芽孢杆菌DB403中诱导表达 | 第89页 |
·凝胶成像分析 | 第89页 |
·菌体生长情况的检测 | 第89页 |
·血红蛋白的活性检测 | 第89-90页 |
3 结果与分析 | 第90-96页 |
·P_(pUBH)-vgb的获得 | 第90-91页 |
·重组质粒pLJ-p-vgb在大肠杆菌DH5α中的克隆 | 第91-94页 |
·血红蛋白在枯草芽孢杆菌中的诱导表达 | 第94页 |
·血红蛋白的表达对枯草芽孢杆菌生长的影响 | 第94-95页 |
·血红蛋白活性检测 | 第95-96页 |
·枯草芽孢杆菌DL中自身质粒的检测 | 第96页 |
4 讨论 | 第96-98页 |
第四章 纳米气泡对枯草芽孢杆菌DL生长及发酵Г-聚谷氨酸的影响 | 第98-106页 |
1 材料 | 第98-99页 |
·菌种 | 第98页 |
·主要试剂 | 第98页 |
·培养基 | 第98页 |
·主要仪器和设备 | 第98-99页 |
2 方法 | 第99-100页 |
·枯草芽孢杆菌DL的活化 | 第99页 |
·枯草芽孢杆菌DL的摇瓶发酵 | 第99页 |
·枯草芽孢杆菌DL生物量的测定 | 第99页 |
·γ-聚谷氨酸产量的测定 | 第99-100页 |
·不同放置时间的纳米气泡水对枯草芽孢杆菌生物量的影响 | 第100页 |
3 结果与分析 | 第100-105页 |
·静置状态下纳米气泡对枯草芽孢杆菌DL生长的影响 | 第100-101页 |
·正常培养条件下纳米气泡对枯草芽孢杆菌DL生长的影响 | 第101-102页 |
·正常培养条件下纳米气泡对枯草芽孢杆菌发酵γ-聚谷氨酸的影响 | 第102页 |
·不同放置时间的纳米气泡对枯草芽孢杆菌DL生长的影响 | 第102-104页 |
·不同放置时间的纳米气泡对枯草芽孢杆菌DL产γ-聚谷氨酸的影响 | 第104-105页 |
4 讨论 | 第105-106页 |
附录 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-116页 |
致谢 | 第116页 |