| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略语的中英文对照 | 第12-13页 |
| 第一篇 文献综述 | 第13-29页 |
| 第一章 组蛋白甲基转移酶EZH2和H3K27甲基化修饰的研究综述 | 第13-21页 |
| 1 组蛋白的共价修饰及其功能作用 | 第13-14页 |
| 2 哺乳动物合子中的表观遗传修饰 | 第14-15页 |
| 3 PCG蛋白复合体的组成及功能作用 | 第15-16页 |
| 4 PRC1和PRC2复合物的组成 | 第16-17页 |
| 5 PRC2的亚单位及其功能作用 | 第17-18页 |
| 6 EZH2与X染色体失活有关 | 第18-19页 |
| 7 EZH2和H3甲基化在发育中的作用 | 第19-21页 |
| 第二章 组蛋白甲基转移酶GLP和H3K9甲基化修饰的研究综述 | 第21-29页 |
| 1 G9A和GLP两个组蛋白甲基转移酶 | 第21-23页 |
| 2 H3K9甲基化及其功能作用 | 第23-24页 |
| 3 GLP的功能 | 第24-25页 |
| 4 G9A/GLP与PRC2的相互作用 | 第25-26页 |
| 5 研究目的和意义 | 第26-29页 |
| 第二篇 试验部分 | 第29-91页 |
| 第一章 EZH2在小鼠早期胚胎发育中的作用及参与催化H3K27甲基化 | 第29-65页 |
| 1 材料与方法 | 第29-40页 |
| 1.1 试验动物 | 第29页 |
| 1.2 GV期卵的获取 | 第29-30页 |
| 1.3 体外受精(IVF)及胚胎培养 | 第30-31页 |
| 1.4 胚胎处理试剂的添加 | 第31页 |
| 1.5 常规免疫荧光染色 | 第31-32页 |
| 1.6 免疫荧光相对定量分析 | 第32-33页 |
| 1.7 小鼠卵巢cDNA模板的合成 | 第33-34页 |
| 1.8 小鼠卵子及胚胎cDNA的合成 | 第34-35页 |
| 1.9 目的基因qPCR的检测 | 第35-36页 |
| 1.10 Ezh2 siRNA的显微注射 | 第36-38页 |
| 1.11 早期胚胎TUNEL检测及分析 | 第38页 |
| 1.12 Western blot分析 | 第38-40页 |
| 1.13 数据分析 | 第40页 |
| 2 试验结果 | 第40-61页 |
| 2.1 EZH2在小鼠卵子及早期胚胎中的定位 | 第40-41页 |
| 2.2 CHX处理对小鼠合子中EZH2的影响 | 第41-44页 |
| 2.3 CHX处理后对小鼠合子中H3K27me1/2/3的修饰的影响 | 第44-47页 |
| 2.4 注射Ezh2 siRNA后,胚胎中Ezh2的表达水平 | 第47-49页 |
| 2.5 Ezh2 siRNA注射对小鼠胚胎发育时程的影响 | 第49-51页 |
| 2.6 原核期胞质注射Ezh2 siRNA后小鼠囊胚细胞凋亡率增加 | 第51-53页 |
| 2.7 原核期胞质注射Ezh2 siRNA后小鼠囊胚OCT4的表达水平降低 | 第53-54页 |
| 2.8 原核期胞质注射Ezh2 siRNA小鼠囊胚期多潜能基因及胚胎分化相关的基因表达发生变化 | 第54-56页 |
| 2.9 原核期胞质注射Ezh2 siRNA小鼠早期胚胎中H3K27me1,H3K27me2,H3K27me3修饰的变化 | 第56-61页 |
| 3 讨论 | 第61-65页 |
| 第二章 GLP在小鼠早期胚胎发育中的作用及催化H3K9甲基化修饰 | 第65-91页 |
| 1 材料与方法 | 第65-75页 |
| 1.1 实验动物 | 第65页 |
| 1.2 GV期卵的获取 | 第65-66页 |
| 1.3 体外受精(IVF)及胚胎培养 | 第66-67页 |
| 1.4 常规免疫荧光染色 | 第67-68页 |
| 1.5 免疫荧光相对定量分析 | 第68页 |
| 1.6 小鼠卵巢cDNA模板的合成 | 第68-69页 |
| 1.7 小鼠卵子及胚胎cDNA的合成 | 第69-70页 |
| 1.8 目的基因qPCR的检测 | 第70-71页 |
| 1.9 Glp siRNA的显微注射 | 第71-73页 |
| 1.10 早期胚胎TUNEL检测及分析 | 第73-74页 |
| 1.11 Active Caspase的检测 | 第74页 |
| 1.12 Western blot分析 | 第74-75页 |
| 1.13 ES细胞的培养 | 第75页 |
| 2 试验结果 | 第75-88页 |
| 2.1 GLP在小鼠卵子及早期胚胎中的表达和定位 | 第75-77页 |
| 2.2 Glp siRNA敲低效率的验证 | 第77-79页 |
| 2.3 注射Glp siRNA后对胚胎发育的影响 | 第79-81页 |
| 2.4 注射Glp siRNA后对胚胎多能性的影响 | 第81-82页 |
| 2.5 注射Glp siRNA后胚胎细胞凋亡增加 | 第82-85页 |
| 2.6 敲低Glp后对囊胚内细胞团多能性的影响 | 第85-86页 |
| 2.7 注射Glp siRNA后对胚胎中H3K9me2修饰的影响 | 第86-88页 |
| 3 讨论 | 第88-91页 |
| 参考文献 | 第91-103页 |
| 全文结论 | 第103-105页 |
| 全文创新 | 第105-107页 |
| 附录 | 第107-115页 |
| 致谢 | 第115-117页 |
| 攻读博士期间发表的论文 | 第117页 |
