| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 主要符号表 | 第19-20页 |
| 1 绪论 | 第20-31页 |
| 1.1 研究背景与意义 | 第20-21页 |
| 1.2 国内外相关工作研究进展 | 第21-29页 |
| 1.2.1 骨质疏松基因的研究进展 | 第21-28页 |
| 1.2.2 神经系统与骨密度 | 第28-29页 |
| 1.3 本文主要研究思路 | 第29-31页 |
| 2 骨保护素遗传g.27563G>A多态性与中国女性骨矿物质密度的关系 | 第31-41页 |
| 2.1 材料和方法 | 第31-36页 |
| 2.1.1 实验对象 | 第31页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第31-36页 |
| 2.2 实验结果 | 第36-39页 |
| 2.2.1 骨保护素(OPG)遗传多态性基因型 | 第37页 |
| 2.2.2 等位基因和基因型的频率 | 第37-38页 |
| 2.2.3 OPG基因多态性和BMD关联性分析 | 第38-39页 |
| 2.3 讨论 | 第39-40页 |
| 2.4 本章小结 | 第40-41页 |
| 3 OPG基因突变对蛋白表达和生物活性的影响 | 第41-53页 |
| 3.1 仪器、材料与试剂 | 第41-42页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第41-42页 |
| 3.1.2 实验材料 | 第42页 |
| 3.1.3 试剂 | 第42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-46页 |
| 3.2.1 突变型质粒的构建 | 第42页 |
| 3.2.2 细胞转染 | 第42-43页 |
| 3.2.3 RT-PCR | 第43-44页 |
| 3.2.4 Western blotting | 第44-45页 |
| 3.2.5 OPG的活性研究 | 第45-46页 |
| 3.2.6 数据统计 | 第46页 |
| 3.3 实验结果 | 第46-51页 |
| 3.3.1 基因突变对OPG mRNA和蛋白表达的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.2 OPG基因突变对细胞活力的影响 | 第47-48页 |
| 3.3.3 OPG基因突变对破骨细胞分化的影响 | 第48-49页 |
| 3.3.4 OPG基因突变对破骨细胞骨吸收能力的影响 | 第49-50页 |
| 3.3.5 OPG基因突变对破骨细胞活化过程中相关基因表达水平的影响 | 第50-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-52页 |
| 3.5 本章小结 | 第52-53页 |
| 4 OPG基因突变影响破骨细胞分化成熟的信号转导机制研究 | 第53-63页 |
| 4.1 仪器、材料与试剂 | 第53-54页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第53-54页 |
| 4.1.2 实验材料 | 第54页 |
| 4.2 实验方法 | 第54-56页 |
| 4.2.1 RAW264.7细胞培养及分组 | 第54-55页 |
| 4.2.2 Western blot法检测MAPK信号通路中关键信号蛋白的变化 | 第55-56页 |
| 4.2.3 测定破骨细胞分化中Ca~(2+)含量 | 第56页 |
| 4.2.4 数据统计 | 第56页 |
| 4.3 实验结果 | 第56-61页 |
| 4.3.1 OPG作用不同时间对MAPK信号通路的影响 | 第56-58页 |
| 4.3.2 OPG基因突变对p38和JNK信号通路的影响 | 第58-59页 |
| 4.3.3 OPG基因突变对破骨细胞分化过程中Ca~(2+)的影响 | 第59-60页 |
| 4.3.4 OPG对破骨细胞分化过程中CaMK Ⅱ磷酸化水平的影响 | 第60-61页 |
| 4.4 讨论 | 第61-62页 |
| 4.5 本章小结 | 第62-63页 |
| 5 骨质疏松性骨折与血清神经生长因子水平的相关性 | 第63-72页 |
| 5.1 材料和方法 | 第63-65页 |
| 5.1.1 实验对象 | 第63页 |
| 5.1.2 实验仪器及试剂 | 第63-65页 |
| 5.2 实验方法 | 第65-66页 |
| 5.2.1 采集静脉血 | 第65页 |
| 5.2.2 双抗体夹心法ELISA法检测血清NGF | 第65-66页 |
| 5.2.3 数据统计 | 第66页 |
| 5.3 实验结果 | 第66-69页 |
| 5.3.1 骨密度值 | 第66-67页 |
| 5.3.2 双抗体夹心法ELISA法检测血清NGF结果 | 第67-69页 |
| 5.4 讨论 | 第69-71页 |
| 5.5 本章小结 | 第71-72页 |
| 6 神经生长因子对骨折愈合过程中骨形态发生蛋白的影响 | 第72-80页 |
| 6.1 材料与方法 | 第72-74页 |
| 6.1.1 实验对象 | 第72页 |
| 6.1.2 主要试剂 | 第72-73页 |
| 6.1.3 主要仪器 | 第73页 |
| 6.1.4 实验方法 | 第73-74页 |
| 6.1.5 统计学处理 | 第74页 |
| 6.2 实验结果 | 第74-76页 |
| 6.2.1 大体观察 | 第74-75页 |
| 6.2.2 Western免疫印记分析 | 第75-76页 |
| 6.3 讨论 | 第76-79页 |
| 6.4 本章小结 | 第79-80页 |
| 7 神经生长因子可促进骨折愈合过程中血管内皮生长因子表达 | 第80-88页 |
| 7.1 材料及方法 | 第81-82页 |
| 7.1.1 主要试剂 | 第81页 |
| 7.1.2 主要仪器 | 第81-82页 |
| 7.1.3 实验方法 | 第82页 |
| 7.2 实验结果 | 第82-85页 |
| 7.2.1 肉眼观察 | 第82-83页 |
| 7.2.2 Western免疫印记分析 | 第83-85页 |
| 7.3 讨论 | 第85-87页 |
| 7.4 本章小结 | 第87-88页 |
| 8 结论与展望 | 第88-89页 |
| 8.1 结论 | 第88页 |
| 8.2 创新点 | 第88页 |
| 8.3 展望 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-100页 |
| 攻读博士学位期间科研项目及科研成果 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 作者简介 | 第103页 |
