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应用重组ALV-J gp85干酪乳杆菌多克隆抗体检测J亚型禽白血病间接ELISA方法的建立

符号及缩略语第1-9页
中文摘要第9-11页
ABSTRACT第11-13页
1 引言第13-25页
   ·ALV-J病毒的介绍第14-21页
     ·ALV-J的病毒分子学第14-16页
     ·ALV-J的流行病学第16-17页
     ·ALV-J的免疫抑制性第17-18页
     ·ALV-J的致病机制及组织嗜性第18-19页
     ·ALV-J的症状和病理变化第19页
     ·ALV-J的诊断方法第19-20页
     ·gP85囊膜糖蛋白的生物学作用第20-21页
   ·黏膜免疫的发生基础第21-22页
   ·重组干酪乳杆菌的生物学特性第22-23页
   ·双抗夹心ELISA方法的研究第23-25页
     ·双抗夹心ELISA方法的实验原理第23-24页
     ·双抗夹心ELISA方法的特点第24页
     ·双抗夹心ELISA方法的在国内外的应用第24-25页
     ·酶标抗体的制备原理第25页
   ·研究的目的和意义第25页
2 材料与方法第25-34页
   ·菌株、抗体、实验动物及待测样品第25页
   ·主要仪器与材料第25-26页
   ·常用溶液与试剂第26页
   ·PMG36E-GP85/ L.CASEI.菌株的培养第26-27页
   ·待检病毒的培养第27页
   ·多克隆抗体的制备第27-28页
     ·口服免疫生产多克隆抗体第27页
     ·多克隆抗体的纯化第27-28页
   ·多克隆抗体的检测第28-30页
     ·间接ELISA对多克隆抗体效价的检测第28页
     ·琼脂扩散方法对多克隆抗体效价的检测第28-29页
     ·运用Western blot对多克隆抗体进行鉴定第29-30页
   ·酶标抗体的准备第30-31页
     ·酶标抗体的制备第30-31页
     ·酶标抗体效价的检测第31页
   ·双抗夹心ELISA方法的建立第31-32页
     ·单抗包被浓度以及酶标多抗稀释度的选择第31-32页
     ·抗体包被时间的优化第32页
     ·酶标二抗工作时间的优化第32页
     ·封闭液选择的优化第32页
     ·夹心ELISA方法临界值的判定第32页
   ·双抗夹心ELISA方法的性能评定第32-34页
     ·特异性试验第32-33页
     ·敏感性试验第33页
     ·重复性试验第33-34页
3 结果第34-40页
   ·多克隆抗体的检测结果第34-36页
     ·每周对小鼠血液中IgG水平变化的检测第34页
     ·多克隆抗体效价的检测第34-35页
     ·pMG36e-gp85蛋白与多克隆抗体的Western-blot第35页
     ·琼脂双扩散法测定多抗效价结果第35-36页
   ·酶标抗体效价的结果第36页
   ·单抗包被浓度以及酶标多抗稀释度的确定第36-37页
   ·双抗夹心ELISA各个反应条件的优化第37-38页
     ·抗体包被时间的优化第37页
     ·酶标二抗工作时间的优化第37-38页
     ·封闭液的选择结果第38页
   ·双抗夹心ELISA方法的性能评定第38-40页
     ·特异性试验检测结果第38-39页
     ·敏感性试验结果第39页
     ·重复性试验结果第39-40页
4 讨论第40-42页
   ·关于多克隆抗体的生产和酶标第40页
   ·关于双抗体夹心ELISA方法概述第40-41页
   ·注意事项第41-42页
     ·引起OD值偏低的原因分析第41页
     ·引起OD值偏高的原因分析第41-42页
5 结论第42-43页
参考文献第43-46页
致谢第46-47页
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录及著作第47页

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