| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 绪论 | 第11-24页 |
| ·高等植物中GABA的代谢途径 | 第11-14页 |
| ·高等植物中的GABA | 第11-13页 |
| ·GABA的代谢途径 | 第13-14页 |
| ·高等植物GABA-T基因研究概况 | 第14-21页 |
| ·高等植物GABA-T基因家族 | 第14-15页 |
| ·高等植物中GABA-T基因的时空表达模式 | 第15-17页 |
| ·高等植物中GABA-T基因胁迫应答 | 第17-19页 |
| ·GABA途径的研究手段 | 第19-20页 |
| ·目前研究的难点及局限性 | 第20-21页 |
| ·高粱的遗传转化研究进展 | 第21-22页 |
| ·高梁再生体系的研究进展 | 第21-22页 |
| ·高粱的遗传转化方法 | 第22页 |
| ·本论文的研究目的和意义 | 第22-24页 |
| 2 高粱SbGABA-Ts基因的克隆及序列分析 | 第24-36页 |
| ·材料与方法 | 第24-30页 |
| ·供试材料 | 第24-25页 |
| ·高粱幼苗RNA提取及质量鉴定 | 第25-26页 |
| ·高粱幼苗cDNA的合成 | 第26-27页 |
| ·高粱SbGABA-Ts基因的分离及鉴定 | 第27-30页 |
| ·基因序列分析 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-35页 |
| ·RNA的质量检测 | 第30页 |
| ·高粱SbGABA-Ts基因编码区的RT-PCR克隆 | 第30-31页 |
| ·高粱SbGABA-Ts基因的序列信息 | 第31-33页 |
| ·高粱SbGABA-Ts与其他物种GABA-T对比分析 | 第33-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| 3 高粱SbGABA-Ts的亚细胞定位 | 第36-45页 |
| ·材料与方法 | 第36-40页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·亚细胞定位预测 | 第37页 |
| ·GFP融合表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·农杆菌的转化及鉴定 | 第38-39页 |
| ·烟草叶片瞬时转化 | 第39页 |
| ·激光共聚焦观察 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-43页 |
| ·高粱SbGABA-Ts亚细胞定位预测 | 第40页 |
| ·高粱SbGABA-Ts基因瞬时表达载体的构建 | 第40-42页 |
| ·高粱SbGABA-Ts的亚细胞定位 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 4 高粱SbGABA-Ts基因的原核表达 | 第45-58页 |
| ·材料与方法 | 第45-50页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第46页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第46-47页 |
| ·融合蛋白的提取 | 第47页 |
| ·融合蛋白的SDS-PAGE分析 | 第47页 |
| ·融合蛋白的Western Blot分析 | 第47-48页 |
| ·融合蛋白的亲和纯化 | 第48-49页 |
| ·融合蛋白的酶活测定 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-56页 |
| ·目的片段的克隆 | 第50-51页 |
| ·重组质粒pET28a(+)-GABA-Ts的构建 | 第51页 |
| ·重组蛋白pET28a(+)-GABA-Ts诱导表达条件 | 第51-54页 |
| ·重组蛋白pET28a(+)-GABA-△Ts的纯化 | 第54-55页 |
| ·重组蛋白pET28a(+)-GABA-△Ts的Western Blot检测 | 第55页 |
| ·重组蛋白pET28a(+)-GABA-△Ts的蛋白酶活性 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 5 高粱SbGABA-Ts基因的表达分析 | 第58-67页 |
| ·材料与方法 | 第58-60页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·植物材料培养及盐胁迫处理 | 第58-59页 |
| ·植物总RNA的提取与cDNA的合成 | 第59页 |
| ·实时定量PCR分析 | 第59-60页 |
| ·植物样品中GABA的提取及检测： | 第60页 |
| ·结果与分析 | 第60-65页 |
| ·高粱SbGABA-Ts基因全生育期表达模式分析 | 第60-62页 |
| ·盐胁迫下高粱SbGABA-Ts基因表达模式分析 | 第62-63页 |
| ·盐胁迫下高粱GABA积累量与SbGABA-Ts表达量的相关关系 | 第63-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| ·高粱SbGABA-Ts基因组织发育表达模式 | 第65-66页 |
| ·高粱SbGABA-Ts基因胁迫下表达模式 | 第66-67页 |
| 6 高粱SbGABA-Ts基因的遗传转化 | 第67-80页 |
| ·材料与方法 | 第67-72页 |
| ·材料 | 第67-68页 |
| ·高粱组培再生的基因型差异研究 | 第68-69页 |
| ·过表达载体pC3301-SbGABA-Ts的构建 | 第69-70页 |
| ·农杆菌介导的高粱幼胚的遗传转化 | 第70-71页 |
| ·T0代过表达转基因植株的检测 | 第71-72页 |
| ·结果与分析 | 第72-78页 |
| ·高粱组培再生的基因型差异研究 | 第72-75页 |
| ·高粱的遗传转化 | 第75-78页 |
| ·讨论 | 第78-80页 |
| 结论 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-90页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文及研究成果 | 第90页 |
