| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第1章 ECM1促进上皮卵巢癌细胞的增殖、转移和侵袭 | 第9-38页 |
| ·引言 | 第9-10页 |
| ·材料与方法 | 第10-27页 |
| ·试验材料 | 第10-13页 |
| ·细胞株 | 第10页 |
| ·实验试剂及耗材 | 第10-12页 |
| ·仪器设备 | 第12-13页 |
| ·溶液和试剂配方 | 第13-17页 |
| ·细胞培养相关 | 第13-14页 |
| ·蛋白裂解所用试剂和配方 | 第14-15页 |
| ·Western blot所用试剂和配方 | 第15-16页 |
| ·DNA凝胶电泳所需试剂和配方 | 第16-17页 |
| ·考马斯亮蓝染色实验所需试剂 | 第17页 |
| ·常用药物配备 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-27页 |
| ·细胞传代 | 第18页 |
| ·铺种细胞 | 第18页 |
| ·冻存细胞 | 第18页 |
| ·复苏细胞 | 第18-19页 |
| ·质量转染及细胞系的构建 | 第19-21页 |
| ·Western Blot实验 | 第21-24页 |
| ·考马斯亮蓝染色 | 第24页 |
| ·平板克隆实验 | 第24-25页 |
| ·软琼脂克隆形成实验 | 第25页 |
| ·划痕实验 | 第25-26页 |
| ·Transwell实验（migration and invasion assay） | 第26页 |
| ·裸鼠皮下荷瘤实验 | 第26-27页 |
| ·裸鼠腹腔转移灶实验 | 第27页 |
| ·数据统计及分析 | 第27页 |
| ·实验结果 | 第27-36页 |
| ·ECM1干扰表达和过表达细胞系的构建与鉴定 | 第27-29页 |
| ·ECM1引起卵巢癌细胞形态的改变 | 第29页 |
| ·ECM1促进卵巢癌细胞的增殖 | 第29-31页 |
| ·ECM1促进卵巢癌细胞的转移和侵袭 | 第31-34页 |
| ·ECM1促进裸鼠皮下瘤的生长和腹腔转移结节的形成 | 第34-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第2章 EMT对卵巢癌肿瘤转移的作用研究及其与ECM1的关系 | 第38-46页 |
| ·引言 | 第38-39页 |
| ·材料与方法 | 第39-41页 |
| ·试验材料 | 第39-40页 |
| ·细胞株 | 第39页 |
| ·实验试剂及耗材 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-41页 |
| ·细胞培养，细胞传代，细胞冻存 | 第40页 |
| ·Western blot实验方法 | 第40页 |
| ·细胞三维培养 | 第40-41页 |
| ·实验结果 | 第41-45页 |
| ·ECM1促进上皮卵巢癌转移的机制研究 | 第41-42页 |
| ·干扰ECM1的表达能够降低卵巢癌细胞三维成球率 | 第42-44页 |
| ·ECM1的表达与Notch信号的激活相关 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第3章 ECM1与整合素αXβ2互作及其激活slug, snail，促进EMT发生 | 第46-61页 |
| ·引言 | 第46-47页 |
| ·材料与方法 | 第47-51页 |
| ·试验材料 | 第47-48页 |
| ·细胞株 | 第47页 |
| ·实验试剂及耗材 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-51页 |
| ·细胞培养，细胞传代，细胞冻存 | 第48页 |
| ·Western blot实验方法 | 第48页 |
| ·免疫荧光 | 第48-49页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第49-50页 |
| ·细胞增殖实验 (MTT Assay) | 第50页 |
| ·整合素引物设计序列 | 第50-51页 |
| ·实验结果 | 第51-59页 |
| ·整合素ITGαX和ITGβ2 的干扰表达和过表达细胞系的构建 | 第51-53页 |
| ·干扰整合素ITGαX和ITGβ2 的表达能够抑制卵巢癌细胞的增殖 | 第53-54页 |
| ·干扰整合素ITGαX和ITGβ2 的表达能够抑制卵巢癌细胞的转移和侵袭 | 第54-56页 |
| ·ECM1能够与ITGαX和ITGβ2 相互作用促进卵巢癌细胞发生EMT | 第56-58页 |
| ·ECM1的表达水平与整合素ITGαX和ITGβ2 的表达水平正相关 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 第4章 NF-kB p65与ECM1启动子的结合及其促进ECM1转录的方式 | 第61-69页 |
| ·引言 | 第61-62页 |
| ·材料与方法 | 第62-65页 |
| ·试验材料 | 第62页 |
| ·细胞株 | 第62页 |
| ·实验试剂及耗材 | 第62页 |
| ·实验方法 | 第62-65页 |
| ·细胞培养，细胞传代，细胞冻存 | 第62-63页 |
| ·质粒瞬时转染 | 第63页 |
| ·萤光素酶双报告基因检测 | 第63-64页 |
| ·ECM1启动子序列 | 第64-65页 |
| ·ECM1启动子引物设计序列 | 第65页 |
| ·实验结果 | 第65-67页 |
| ·预实验提示ECM1启动子片段构建成功 | 第65-67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
