| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-21页 |
| ·脂肪酶概述 | 第11-15页 |
| ·脂肪酶的来源 | 第11-14页 |
| ·影响脂肪酶生产的因素 | 第14-15页 |
| ·脂肪酶的应用 | 第15-17页 |
| ·在食品、奶制品工业的应用 | 第15-16页 |
| ·在生物医药领域的应用 | 第16-17页 |
| ·生物修复 | 第17页 |
| ·生物柴油的概述 | 第17-19页 |
| ·生物柴油在我国的发展前景 | 第17-18页 |
| ·生物柴油的优点 | 第18-19页 |
| ·脂肪酶制备生物柴油的机理 | 第19页 |
| ·本课题的研究意义、内容及创新点 | 第19-21页 |
| ·研究意义 | 第19-20页 |
| ·研究内容 | 第20页 |
| ·创新点 | 第20-21页 |
| 第2章 脂肪酶生产菌的筛选及鉴定 | 第21-32页 |
| ·实验材料与仪器 | 第21-23页 |
| ·样品的采集 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·主要实验仪器 | 第22页 |
| ·培养基及溶液 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-26页 |
| ·脂肪酶生产菌的筛选 | 第23页 |
| ·脂肪酶活性检测 | 第23-25页 |
| ·脂肪酶生产菌的鉴定 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-30页 |
| ·脂肪酶生产菌的筛选 | 第26-27页 |
| ·脂肪酶生产菌的鉴定 | 第27-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 第3章 高效脂肪酶生产菌生长特性及产酶优化 | 第32-39页 |
| ·实验材料与仪器 | 第32-33页 |
| ·主要实验仪器 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·培养基及溶液 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-34页 |
| ·脂肪酶活性测定 | 第33页 |
| ·脂肪酶生产菌的生长特性及产酶优化 | 第33-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-38页 |
| ·培养时间对菌株LHY-1 生长特性及产酶活力的影响 | 第34-35页 |
| ·碳源和氮源对菌株LHY-1 生长特性及产酶活力的影响 | 第35页 |
| ·培养温度对菌株LHY-1 生长特性及产酶活力的影响 | 第35-36页 |
| ·不同初始pH对菌株LHY-1 生长特性及产酶活力的影响 | 第36-37页 |
| ·不同盐度对菌株LHY-1 生长特性及产酶活力的影响 | 第37页 |
| ·不同装液量对菌株LHY-1 生长特性及产酶活力的影响 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 第4章 脂肪酶大肠杆菌中的克隆、表达、分离纯化及酶学性质 | 第39-52页 |
| ·实验材料与仪器 | 第39-40页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要溶液配制 | 第39-40页 |
| ·沙雷氏菌脂肪酶原核表达质粒的构建及鉴定 | 第40-44页 |
| ·引物设计及合成 | 第40页 |
| ·脂肪酶基因的PCR扩增及pUCM-T/lipA克隆质粒的构建 | 第40-41页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第41-42页 |
| ·表达质粒的转化 | 第42页 |
| ·质粒DNA提取及鉴定 | 第42-43页 |
| ·原核表达质粒的构建 | 第43-44页 |
| ·脂肪酶基因lipA在大肠杆菌BL21（DE3）中的表达 | 第44-45页 |
| ·重组菌在大肠杆菌BL21（DE3）中的表达 | 第44页 |
| ·重组脂肪酶的纯化 | 第44-45页 |
| ·脂肪酶的酶学性质 | 第45-46页 |
| ·温度对脂肪酶活力和稳定性的影响 | 第45页 |
| ·pH对脂肪酶稳定性的影响 | 第45页 |
| ·金属离子和酶抑制剂对脂肪酶活性的影响 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-50页 |
| ·pET-28a(+)/lipA表达质粒的构建、鉴定 | 第46-48页 |
| ·表达和纯化重组脂肪酶 | 第48页 |
| ·酶的最适反应温度和稳定性 | 第48-49页 |
| ·酶的pH稳定性 | 第49页 |
| ·金属离子和抑制剂对酶活性的影响 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 第5章 高效脂肪酶催化合成生物柴油的初步研究 | 第52-55页 |
| ·实验材料与仪器 | 第52页 |
| ·主要实验仪器 | 第52页 |
| ·主要试剂 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-53页 |
| ·制备生物柴油方法 | 第52-53页 |
| ·生物柴油分析 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第65页 |
