| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语 | 第10-11页 |
| 第一部分：b型流感嗜血杆菌多糖结合疫苗制备工艺的研究 | 第11-54页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 1 材料 | 第13-15页 |
| ·菌株来源 | 第13页 |
| ·主要试剂 | 第13-14页 |
| ·主要器材与仪器 | 第14-15页 |
| ·主要试剂配方见附录2 | 第15页 |
| 2 方法 | 第15-33页 |
| ·菌种名称及来源 | 第15页 |
| ·细菌发酵 | 第15-16页 |
| ·菌株复苏 | 第15页 |
| ·菌种鉴定 | 第15-16页 |
| ·Hib菌种的发酵培养 | 第16页 |
| ·多糖制备工艺 | 第16-18页 |
| ·沉淀复合糖 | 第16-17页 |
| ·去核酸 | 第17页 |
| ·制备粗糖 | 第17页 |
| ·苯酚抽提去除蛋白 | 第17页 |
| ·超滤 | 第17页 |
| ·制备精糖 | 第17-18页 |
| ·Hib多糖的衍化 | 第18-21页 |
| ·衍化过程的Box-behnken实验设计 | 第18页 |
| ·Hib荚膜多糖衍生物的制备 | 第18-20页 |
| ·PRP多糖衍化率与结合率的关系探究 | 第20页 |
| ·Hib荚膜多糖-TT蛋白结合物的纯化 | 第20页 |
| ·衍化率与结合率关系的重复性实验验证 | 第20-21页 |
| ·Hib-TT结合过程的优化 | 第21-23页 |
| ·Hib多糖衍生物与TT结合实验的正交设计 | 第21页 |
| ·多糖衍生物的制备 | 第21页 |
| ·结合物原液的制备 | 第21-22页 |
| ·结合物的纯化 | 第22页 |
| ·最高结合率的重复性实验验证 | 第22-23页 |
| ·检测 | 第23-33页 |
| ·Hib多糖各项指标检测 | 第23-25页 |
| ·Hib多糖衍生物与结合物相关检测 | 第25-33页 |
| 3 结果 | 第33-51页 |
| ·Hib多糖质量鉴定 | 第33-35页 |
| ·镜检 | 第33页 |
| ·Hib多糖~1H-NMR谱 | 第33-34页 |
| ·Hib多糖相关指标检测 | 第34-35页 |
| ·Hib结合相关检测结果 | 第35-51页 |
| ·响应面分析法优化Hib多糖的衍化 | 第35-44页 |
| ·正交试验优化Hib与TT结合的实验结果 | 第44-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| 第二部分 b型流感嗜血杆菌结合疫苗的冻干及其多糖ELISA方法的定量检测 | 第54-75页 |
| 引言 | 第54-56页 |
| 1 材料 | 第56-57页 |
| ·主要材料 | 第56页 |
| ·主要试剂 | 第56-57页 |
| ·主要器材与仪器 | 第57页 |
| ·主要试剂配方见附录2 | 第57页 |
| 2 方法 | 第57-61页 |
| ·Hib冻干剂型的研究 | 第57-58页 |
| ·冻干保护剂的配制 | 第57页 |
| ·Hib结合物原液处理 | 第57-58页 |
| ·冻干原液的配制及分装 | 第58页 |
| ·冻干 | 第58页 |
| ·冻干剂型的再研究 | 第58页 |
| ·冻干剂型的重复性实验验证 | 第58页 |
| ·Hib多糖间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第58-60页 |
| ·包被多糖抗原及多糖抗血清浓度的确定 | 第58-59页 |
| ·标准曲线的建立及最低检测线的确定 | 第59页 |
| ·精确度的确定 | 第59页 |
| ·批间精密度的确定 | 第59页 |
| ·方法应用 | 第59-60页 |
| ·冻干剂型检测 | 第60-61页 |
| ·鉴别实验 | 第60页 |
| ·高分子含量检测 | 第60页 |
| ·多糖含量检测 | 第60页 |
| ·成形率计算 | 第60页 |
| ·内毒素含量检测 | 第60页 |
| ·分子量大小检测 | 第60-61页 |
| ·无菌试验检测 | 第61页 |
| ·效力实验 | 第61页 |
| 3 结果 | 第61-72页 |
| ·Hib冻干结合疫苗相关结果 | 第61-68页 |
| ·乳糖作为保护剂时相关指标检测 | 第61-62页 |
| ·海藻糖作为保护剂时相关指标检测 | 第62页 |
| ·右旋糖酐-40作为保护剂时相关指标检测 | 第62-63页 |
| ·甘露醇作为保护剂时相关指标检测 | 第63-64页 |
| ·两种保护剂共同作用下Hib冻干结合疫苗相关检测 | 第64页 |
| ·混合保护剂下重复性实验验证 | 第64-65页 |
| ·部分Hib冻干剂型外观 | 第65页 |
| ·冻干剂型分子量大小的测定 | 第65-66页 |
| ·免疫双扩检测 | 第66-67页 |
| ·无菌试验检测 | 第67页 |
| ·内毒素含量测定 | 第67页 |
| ·效力试验 | 第67-68页 |
| ·Hib多糖ELISA检测方法的建立 | 第68-72页 |
| ·最适PRP-Ty包被浓度和最适Hib抗血清稀释倍数 | 第68页 |
| ·标准曲线及最低检测线 | 第68-69页 |
| ·间接竞争ELISA法准确性和批内精密度检测 | 第69-70页 |
| ·批间精密度及其与传统化学法检测的比较 | 第70-71页 |
| ·间接竞争ELISA法的应用 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-75页 |
| 总结和展望 | 第75-76页 |
| 1 总结 | 第75页 |
| 2 展望 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-80页 |
| 综述 | 第80-89页 |
| 参考文献 | 第86-89页 |
| 附录2 溶液配制 | 第89-96页 |
| 攻读硕士学位期间以第一作者发表的文章 | 第96页 |
| 个人简历 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
