| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-16页 |
| 前言 | 第16-20页 |
| 第一章 实验材料 | 第20-22页 |
| ·实验动物与分组 | 第20页 |
| ·实验试剂 | 第20-21页 |
| ·主要实验耗材和设备 | 第21-22页 |
| 第二章 实验方法 | 第22-40页 |
| ·动物处理 | 第22页 |
| ·血DNA提取 | 第22-23页 |
| ·组织RNA提取 | 第23页 |
| ·DNA水解 | 第23-24页 |
| ·HPLC法 | 第24-25页 |
| ·HPLC原理 | 第24页 |
| ·HPLC检测步骤 | 第24-25页 |
| ·Real-time RT-PCR | 第25-27页 |
| ·SYBR Green I荧光染料技术原理 | 第25页 |
| ·Real-time RT-PCR反应 | 第25-27页 |
| ·Western Blot检测全血和组织中DNMT1、MBD2蛋白表达水平 | 第27-31页 |
| ·试剂配制 | 第27-29页 |
| ·提取组织总蛋白 | 第29页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第29-30页 |
| ·半干式转膜 | 第30页 |
| ·免疫印迹 | 第30-31页 |
| ·化学发光,显影及定影 | 第31页 |
| ·小鼠甲基化芯片分析 | 第31-32页 |
| ·具体方法 | 第31-32页 |
| ·MeDIP-qPCR验证目的基因 | 第32-34页 |
| ·MeDIP-qPCR基本原理 | 第32-33页 |
| ·基本步骤 | 第33-34页 |
| ·BSP检测Rad23b、Ddit3的甲基化水平 | 第34-38页 |
| ·BSP基本原理 | 第34-35页 |
| ·亚硫酸氢盐修饰 | 第35-36页 |
| ·PCR反应 | 第36页 |
| ·PCR产物纯化回收 | 第36-37页 |
| ·连接反应 | 第37页 |
| ·LB培养基配制 | 第37页 |
| ·转化 | 第37-38页 |
| ·挑选克隆 | 第38页 |
| ·测序 | 第38页 |
| ·统计学方法 | 第38-40页 |
| 第三章 实验结果 | 第40-52页 |
| ·全血基因组DNA甲基化水平 | 第40-42页 |
| ·HPLC检测全血基因组DNA甲基化水平 | 第40-41页 |
| ·DNMT和MBD2 mRNA在各组织中表达 | 第41-42页 |
| ·DNMT和MBD2蛋白在各组织中表达 | 第42页 |
| ·MeDIP-chip芯片结果及鉴定 | 第42-49页 |
| ·甲基化芯片结果 | 第42-44页 |
| ·MeDIP-qPCR验证8个目的基因的甲基化水平 | 第44-47页 |
| ·Rad23b和Ddit3在芯片中的位置和CpG岛预测 | 第47-49页 |
| ·Rad23b和Ddit3在各个组织中的甲基化状态和mRNA表达水平 | 第49-52页 |
| 第四章 讨论 | 第52-58页 |
| 结论与展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 缩略词表 | 第65-66页 |
| 综述 | 第66-74页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
