| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-29页 |
| ·红花黄酮类成分研究进展 | 第13-17页 |
| ·红花黄色素类查耳酮成分 | 第13-15页 |
| ·红花黄酮和黄酮醇类成分 | 第15-17页 |
| ·药用植物黄酮类化合物代谢合成途径及相关功能基因的研究进展 | 第17-25页 |
| ·黄酮类化合物代谢合成途径 | 第17-20页 |
| ·药用植物黄酮类化合物代谢合成途径中的相关功能基因 | 第20-25页 |
| ·查尔酮合成酶基因 | 第20-21页 |
| ·查尔酮异构酶基因 | 第21-22页 |
| ·异黄酮合成酶基因 | 第22页 |
| ·黄烷酮3羟化酶基因 | 第22-23页 |
| ·黄酮醇合成酶基因 | 第23-24页 |
| ·二氢黄酮醇还原酶基因 | 第24-25页 |
| ·红花黄酮类化合物合成途径研究进展 | 第25-28页 |
| ·小结 | 第28-29页 |
| 第二章 红花查尔酮合成酶基因的克隆、生物信息学分析及表达 | 第29-56页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第29-33页 |
| ·红花材料 | 第29-31页 |
| ·试剂 | 第31-32页 |
| ·仪器 | 第32页 |
| ·实验材料的制备 | 第32-33页 |
| ·50×TAE缓冲液的制备 | 第32-33页 |
| ·2%琼脂糖凝胶的制备 | 第33页 |
| ·红花总RNA提取和逆转录实验 | 第33-36页 |
| ·红花总RNA提取方法的筛选 | 第33-35页 |
| ·植物总RNA提取试剂盒法 | 第33-34页 |
| ·传统Trizol法 | 第34页 |
| ·改良Trizol法 | 第34页 |
| ·红花总RNA完整性检测 | 第34-35页 |
| ·红花逆转录反应 | 第35-36页 |
| ·逆转录反应 | 第35页 |
| ·红花总RNA的聚合酶链反应检测 | 第35-36页 |
| ·红花chs的克隆和生物信息学分析 | 第36-45页 |
| ·红花总RNA样品的提取和cDNA第一链的合成 | 第36页 |
| ·chs引物设计 | 第36-37页 |
| ·chs的PCR扩增 | 第37页 |
| ·PCR产物的凝胶电泳检测 | 第37-38页 |
| ·PCR产物回收 | 第38页 |
| ·PCR产物测序 | 第38-39页 |
| ·生物信息学分析 | 第39-45页 |
| ·红花chs的表达 | 第45-53页 |
| ·红花总RNA样品的提取和cDNA第一链的合成 | 第45-46页 |
| ·红花花期chs实时定量PCR反应 | 第46-49页 |
| ·扩增曲线 | 第46-47页 |
| ·溶解曲线 | 第47页 |
| ·标准曲线 | 第47-48页 |
| ·花期chs的Cq值 | 第48-49页 |
| ·红花花期25s实时定量PCR反应 | 第49-52页 |
| ·扩增曲线 | 第49-50页 |
| ·溶解曲线 | 第50页 |
| ·标准曲线 | 第50-51页 |
| ·花期25s的Cq值 | 第51-52页 |
| ·红花花期chs的相对表达量 | 第52-53页 |
| ·小结 | 第53-56页 |
| ·RNA提取 | 第53-54页 |
| ·红花chs的克隆和生物信息学分析 | 第54-55页 |
| ·红花chs的表达 | 第55-56页 |
| 第三章 红花羟基红花黄色素A的积累规律研究 | 第56-64页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第56页 |
| ·红花材料 | 第56页 |
| ·试剂 | 第56页 |
| ·仪器 | 第56页 |
| ·对照品溶液的制备 | 第56-57页 |
| ·供试品溶液的制备 | 第57-59页 |
| ·提取溶剂的考察 | 第57页 |
| ·提取溶剂用量的考察 | 第57页 |
| ·提取方法的考察 | 第57-58页 |
| ·提取温度的考察 | 第58页 |
| ·提取时间的考察 | 第58-59页 |
| ·提取次数的考察 | 第59页 |
| ·供试品溶液的制备 | 第59页 |
| ·色谱条件 | 第59页 |
| ·方法学考察 | 第59-61页 |
| ·标准曲线的制备 | 第59-60页 |
| ·精密度考察 | 第60页 |
| ·稳定性试验 | 第60-61页 |
| ·加样回收试验 | 第61页 |
| ·羟基红花黄色素A含量测定结果 | 第61-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 第四章 红花HPLC指纹图谱研究 | 第64-85页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第64页 |
| ·红花材料 | 第64页 |
| ·试剂 | 第64页 |
| ·仪器 | 第64页 |
| ·对照品溶液的制备 | 第64页 |
| ·供试品溶液的制备 | 第64-65页 |
| ·色谱条件 | 第65-68页 |
| ·测定波长的选择 | 第65-66页 |
| ·流动相的选择 | 第66页 |
| ·等度考察 | 第66-67页 |
| ·梯度考察 | 第67-68页 |
| ·色谱条件的确认 | 第68页 |
| ·方法学考察 | 第68-72页 |
| ·专属性考察 | 第68-69页 |
| ·精密度考察 | 第69-70页 |
| ·稳定性考察 | 第70-71页 |
| ·重复性考察 | 第71-72页 |
| ·红花指纹图谱分析 | 第72-75页 |
| ·红花HPLC指纹图谱的采集 | 第72页 |
| ·红花指纹图谱分析 | 第72-75页 |
| ·LC-MS分析 | 第75-79页 |
| ·色谱、质谱条件 | 第76页 |
| ·LC-MS分析结果 | 第76-79页 |
| ·羟基红花黄色素A的鉴定 | 第77-78页 |
| ·脱水红花黄色素B的鉴定 | 第78-79页 |
| ·红花黄色素类成分积累规律 | 第79-82页 |
| ·红花chs的表达与红花黄色素类成分的关联性分析 | 第82-83页 |
| ·小结 | 第83-85页 |
| ·红花HPLC指纹图谱的建立 | 第83页 |
| ·LC-MS分析 | 第83-84页 |
| ·红花黄色素类成分分析 | 第84页 |
| ·红花chs相对表达量与红花黄色素类成分积累量的关联性分析 | 第84-85页 |
| 第五章 总结与展望 | 第85-89页 |
| ·红花查尔酮合成酶基因的克隆、生物信息学分析及表达 | 第85-86页 |
| ·红花花冠RNA提取方法筛选 | 第85页 |
| ·红花chs的克隆 | 第85-86页 |
| ·红花chs的生物信息学分析 | 第86页 |
| ·红花chs的表达 | 第86页 |
| ·红花羟基红花黄色素A的积累规律研究 | 第86-87页 |
| ·红花HPLC指纹图谱的研究 | 第87-88页 |
| ·红花HPLC指纹图谱的建立 | 第87页 |
| ·LC-MS分析 | 第87页 |
| ·红花黄色素类成分积累规律 | 第87-88页 |
| ·红花chs相对表达量与红花黄色素类成分积累量的关联性分析 | 第88页 |
| ·思考与展望 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果 | 第94-95页 |
