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2型猪链球菌β-半乳糖苷酶功能的初步研究

摘要第1-9页
Abstract第9-13页
前言第13-16页
第一章 β-半乳糖苷酶编码基因的生物信息学分析第16-21页
   ·材料与方法第16-17页
   ·结果第17-20页
     ·BgaC编码基因的一般特性第17-18页
     ·BgaC的同源性检索及多序列比对第18页
     ·BgaC的跨膜区和信号肽预测第18-19页
     ·BgaC蛋白三级结构模式分析第19-20页
   ·讨论第20-21页
第二章 S.suis 2 BgaC蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备第21-29页
   ·材料与方法第21-25页
   ·结果第25-28页
     ·重组表达载体pET28a::bgaC的鉴定第25-26页
     ·BgaC重组蛋白的表达及纯化第26-27页
     ·BgaC重组蛋白的结构分析第27页
     ·BgaC重组蛋白的鼠多抗血清抗体滴度检测第27-28页
     ·Western blot分析第28页
   ·讨论第28-29页
第三章 BgaC蛋白的生物学功能分析第29-42页
   ·材料与方法第29-33页
   ·结果第33-41页
     ·重组BgaC蛋白的酶活性测定第33-37页
     ·酶学动力学的分析第37页
     ·BgaC特异性水解分析第37-38页
     ·免疫电镜分析第38-39页
     ·流式细胞术分析第39-41页
   ·讨论第41-42页
第四章 β-半乳糖苷酶bgaC基因敲除突变株的构建第42-52页
   ·材料和方法第43-48页
   ·结果第48-51页
     ·重组敲除质粒pUC::bgaC的鉴定第48-49页
     ·bgaC编码基因敲除突变株的筛选第49-50页
     ·bgaC基因敲除突变株AbgaC的组合PCR鉴定第50页
     ·bgaC基因敲除突变株AbgaC反转录PCR鉴定第50-51页
   ·讨论第51-52页
第五章 bgaC基因敲除突变株的生物学特性研究第52-64页
   ·材料与方法第52-56页
   ·结果第56-62页
     ·敲除株的壮观霉素抗性基因稳定性观察第56页
     ·菌落形态和溶血活性的比较第56-57页
     ·显微形态结构的比较第57-58页
     ·生长曲线的绘制第58页
     ·△bgaC突变株对上皮细胞的粘附能力以及对巨噬细胞的抗吞噬能力第58-60页
     ·突变株△bgaC和野生株05ZYH33的基因调节差异第60-61页
     ·小鼠致病实验第61-62页
   ·讨论第62-64页
全文总结第64-65页
参考文献第65-74页
综述第74-95页
 参考文献第88-95页
攻读学位期间发表的论文第95-96页
致谢第96页

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