摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-13页 |
前言 | 第13-16页 |
第一章 β-半乳糖苷酶编码基因的生物信息学分析 | 第16-21页 |
·材料与方法 | 第16-17页 |
·结果 | 第17-20页 |
·BgaC编码基因的一般特性 | 第17-18页 |
·BgaC的同源性检索及多序列比对 | 第18页 |
·BgaC的跨膜区和信号肽预测 | 第18-19页 |
·BgaC蛋白三级结构模式分析 | 第19-20页 |
·讨论 | 第20-21页 |
第二章 S.suis 2 BgaC蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备 | 第21-29页 |
·材料与方法 | 第21-25页 |
·结果 | 第25-28页 |
·重组表达载体pET28a::bgaC的鉴定 | 第25-26页 |
·BgaC重组蛋白的表达及纯化 | 第26-27页 |
·BgaC重组蛋白的结构分析 | 第27页 |
·BgaC重组蛋白的鼠多抗血清抗体滴度检测 | 第27-28页 |
·Western blot分析 | 第28页 |
·讨论 | 第28-29页 |
第三章 BgaC蛋白的生物学功能分析 | 第29-42页 |
·材料与方法 | 第29-33页 |
·结果 | 第33-41页 |
·重组BgaC蛋白的酶活性测定 | 第33-37页 |
·酶学动力学的分析 | 第37页 |
·BgaC特异性水解分析 | 第37-38页 |
·免疫电镜分析 | 第38-39页 |
·流式细胞术分析 | 第39-41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
第四章 β-半乳糖苷酶bgaC基因敲除突变株的构建 | 第42-52页 |
·材料和方法 | 第43-48页 |
·结果 | 第48-51页 |
·重组敲除质粒pUC::bgaC的鉴定 | 第48-49页 |
·bgaC编码基因敲除突变株的筛选 | 第49-50页 |
·bgaC基因敲除突变株AbgaC的组合PCR鉴定 | 第50页 |
·bgaC基因敲除突变株AbgaC反转录PCR鉴定 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51-52页 |
第五章 bgaC基因敲除突变株的生物学特性研究 | 第52-64页 |
·材料与方法 | 第52-56页 |
·结果 | 第56-62页 |
·敲除株的壮观霉素抗性基因稳定性观察 | 第56页 |
·菌落形态和溶血活性的比较 | 第56-57页 |
·显微形态结构的比较 | 第57-58页 |
·生长曲线的绘制 | 第58页 |
·△bgaC突变株对上皮细胞的粘附能力以及对巨噬细胞的抗吞噬能力 | 第58-60页 |
·突变株△bgaC和野生株05ZYH33的基因调节差异 | 第60-61页 |
·小鼠致病实验 | 第61-62页 |
·讨论 | 第62-64页 |
全文总结 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-74页 |
综述 | 第74-95页 |
参考文献 | 第88-95页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第95-96页 |
致谢 | 第96页 |