| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| ·水稻条纹病毒简介 | 第12-13页 |
| ·核仁及其在病毒侵染中的作用 | 第13-19页 |
| ·核仁组分及功能 | 第13-15页 |
| ·核仁素 | 第13-14页 |
| ·核纤维蛋白 | 第14-15页 |
| ·核仁磷酸化蛋白B23 | 第15页 |
| ·核仁在不同病毒侵染过程中的作用 | 第15-18页 |
| ·DNA病毒 | 第15-16页 |
| ·逆转录病毒 | 第16页 |
| ·在细胞质内复制的病毒 | 第16-18页 |
| ·总结与展望 | 第18-19页 |
| ·本研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 Pip2-2与RSV的互作鉴定及亚细胞定位 | 第20-43页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌株与载体 | 第20页 |
| ·试剂 | 第20-21页 |
| ·仪器设备 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-33页 |
| ·Trizol法提取植物叶片总RNA | 第21-22页 |
| ·反转录 | 第22-23页 |
| ·目的基因扩增 | 第23-24页 |
| ·扩增产物电泳回收 | 第24页 |
| ·目的片段纯化回收 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的构建 | 第25-29页 |
| ·目的片段与T载体连接 | 第25页 |
| ·大肠杆菌感受态制备 | 第25-26页 |
| ·热击法转化大肠杆菌及阳性菌落筛选 | 第26-27页 |
| ·质粒提取 | 第27-28页 |
| ·序列测定和分析 | 第28页 |
| ·双酶切后的目的片段与双元表达载体连接及转化 | 第28-29页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·重组质粒电击转化农杆菌 | 第29-30页 |
| ·电击法转化农杆菌 | 第29-30页 |
| ·电击杯的清洗流程 | 第30页 |
| ·农杆菌转化子阳性检测 | 第30页 |
| ·农杆菌浸润本氏烟叶片及荧光共聚焦显微镜观察 | 第30-32页 |
| ·收集菌体并调OD值 | 第31页 |
| ·本氏烟苗的准备 | 第31页 |
| ·本氏烟叶片共聚焦显微观察 | 第31-32页 |
| ·酵母双杂交技术 | 第32-33页 |
| ·酵母感受态细胞制备(LiAc法) | 第32页 |
| ·质粒转化酵母感受态 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-43页 |
| ·Pip2-2基因序列分析及克隆 | 第33-34页 |
| ·酵母双杂交验证Pip2-2与RSV病毒蛋白的互作 | 第34-35页 |
| ·双分子荧光互补技术验证互作 | 第35-38页 |
| ·Pip2-2在细胞内的定位研究 | 第38-40页 |
| ·Pip2-2在健康本氏烟叶片细胞内的定位 | 第38-39页 |
| ·Pip2-2在感染RSV本氏烟叶片细胞内的定位 | 第39-40页 |
| ·Pip2-2核定位信号研究 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41-43页 |
| 第三章 Pip2-2对RSV侵染的影响 | 第43-54页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·植物材料 | 第43页 |
| ·菌株与载体 | 第43页 |
| ·试剂 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-48页 |
| ·实时定量PCR技术 | 第44-45页 |
| ·本氏烟接种RSV方法 | 第45页 |
| ·水稻成熟胚愈伤组织的诱导与培养 | 第45-46页 |
| ·转基因操作台的处理 | 第46-47页 |
| ·转基因植株DNA的提取 | 第47页 |
| ·水稻接毒RSV方法 | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-54页 |
| ·RSV侵染诱导水稻Pip2-2基因的表达量差异 | 第48-49页 |
| ·利用病毒载体超表达Pip2-2对RSV侵染的影响 | 第49-51页 |
| ·超表达Pip2-2的水稻植株表现对RSV侵染的影响 | 第51-52页 |
| ·Pip2-2表达下调对水稻分化及生长的影响 | 第52-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 第四章 结论与下一步工作计划 | 第54-55页 |
| ·结论 | 第54页 |
| ·下一步工作计划 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
