中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-15页 |
前言 | 第15-18页 |
第一部分 刚地弓形虫抗原组合IL-12对NK细胞的直接活化作用 | 第18-71页 |
材料与方法 | 第18-50页 |
1. 材料和试剂 | 第18-26页 |
·主要材料 | 第18-19页 |
·主要试剂及溶液配制 | 第19-25页 |
·主要仪器 | 第25-26页 |
2. 方法 | 第26-50页 |
·刚地弓形虫排泄分泌抗原(ESA)和可溶性虫体抗原(STAg)的制备 | 第26-27页 |
·刚地弓形虫profilin和HSP70的克隆表达与纯化 | 第27-33页 |
·刚地弓形虫糖基磷脂酰肌醇(GPIs)的提取 | 第33页 |
·NK细胞的分选与培养 | 第33-35页 |
·ELISA检测NK细胞培养上清中的细胞因子水平 | 第35-36页 |
·流式细胞术(FCM)检测NK细胞表面分子 | 第36-37页 |
·PCR、RT-PCR和Real-time RT-PCR检测 | 第37-43页 |
·NK细胞杀伤功能试验 | 第43-45页 |
·MyD88接头蛋白阻断试验和下游信号通路试验 | 第45-46页 |
·刚地弓形虫profilin和HSP70多克隆抗体的制备和纯化 | 第46-49页 |
·刚地弓形虫抗原中profilin和HSP70的Western blot鉴定 | 第49页 |
·统计学分析 | 第49-50页 |
结果 | 第50-71页 |
1. 刚地弓形虫抗原和IL-12处理对NK细胞细胞因子分泌的影响 | 第50-53页 |
2. 刚地弓形虫抗原和IL-12处理对NK细胞活化分子表达的影响 | 第53-55页 |
3. 刚地弓形虫抗原组合IL-12处理对NK细胞杀伤功能的影响 | 第55-56页 |
4. NK细胞的TLR/MyD88信号在弓形虫抗原诱导其产生IFN-γ过程中的作用 | 第56-60页 |
5. MyD88接头蛋白下游信号通路试验 | 第60-61页 |
6. 刚地弓形虫抗原组份中诱导NK细胞分泌IFN-γ的效应分子鉴定 | 第61-71页 |
第二部分 NK细胞的TLR/MyD88信号通路在机体抗弓形虫感染天然免疫应答中的作用研究 | 第71-83页 |
材料与方法 | 第71-79页 |
1. 材料和试剂 | 第71-74页 |
·主要材料 | 第71-72页 |
·主要试剂及溶液配制 | 第72-74页 |
·主要仪器 | 第74页 |
2. 方法 | 第74-79页 |
·NK细胞过继转移及弓形虫感染小鼠模型的建立 | 第74-75页 |
·ELISA检测血清IFN-γ水平 | 第75-76页 |
·免疫组化检测脾脏速殖子分布 | 第76页 |
·Real-time PCR检测脾脏刚地弓形虫虫荷 | 第76-78页 |
·统计学分析 | 第78-79页 |
结果 | 第79-83页 |
1. 不同NK细胞过继转移小鼠在刚地弓形虫感染后的血清IFN-γ分泌水平 | 第79-80页 |
2. 脾脏速殖子的分布情况 | 第80-81页 |
3. 脾脏刚地弓形虫虫荷定量 | 第81页 |
4. NK细胞的MyD88信号通路对刚地弓形虫感染小鼠存活的影响 | 第81-83页 |
讨论 | 第83-91页 |
小结 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-105页 |
文献综述 | 第105-128页 |
参考文献 | 第117-128页 |
附录 | 第128-130页 |
致谢 | 第130页 |