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NK细胞的TLR/MyD88信号通路在刚地弓形虫感染早期IFN-γ产生过程中的作用研究

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-15页
前言第15-18页
第一部分 刚地弓形虫抗原组合IL-12对NK细胞的直接活化作用第18-71页
 材料与方法第18-50页
  1. 材料和试剂第18-26页
     ·主要材料第18-19页
     ·主要试剂及溶液配制第19-25页
     ·主要仪器第25-26页
  2. 方法第26-50页
   ·刚地弓形虫排泄分泌抗原(ESA)和可溶性虫体抗原(STAg)的制备第26-27页
   ·刚地弓形虫profilin和HSP70的克隆表达与纯化第27-33页
   ·刚地弓形虫糖基磷脂酰肌醇(GPIs)的提取第33页
   ·NK细胞的分选与培养第33-35页
   ·ELISA检测NK细胞培养上清中的细胞因子水平第35-36页
   ·流式细胞术(FCM)检测NK细胞表面分子第36-37页
   ·PCR、RT-PCR和Real-time RT-PCR检测第37-43页
   ·NK细胞杀伤功能试验第43-45页
   ·MyD88接头蛋白阻断试验和下游信号通路试验第45-46页
   ·刚地弓形虫profilin和HSP70多克隆抗体的制备和纯化第46-49页
   ·刚地弓形虫抗原中profilin和HSP70的Western blot鉴定第49页
   ·统计学分析第49-50页
 结果第50-71页
  1. 刚地弓形虫抗原和IL-12处理对NK细胞细胞因子分泌的影响第50-53页
  2. 刚地弓形虫抗原和IL-12处理对NK细胞活化分子表达的影响第53-55页
  3. 刚地弓形虫抗原组合IL-12处理对NK细胞杀伤功能的影响第55-56页
  4. NK细胞的TLR/MyD88信号在弓形虫抗原诱导其产生IFN-γ过程中的作用第56-60页
  5. MyD88接头蛋白下游信号通路试验第60-61页
  6. 刚地弓形虫抗原组份中诱导NK细胞分泌IFN-γ的效应分子鉴定第61-71页
第二部分 NK细胞的TLR/MyD88信号通路在机体抗弓形虫感染天然免疫应答中的作用研究第71-83页
 材料与方法第71-79页
  1. 材料和试剂第71-74页
     ·主要材料第71-72页
     ·主要试剂及溶液配制第72-74页
     ·主要仪器第74页
  2. 方法第74-79页
   ·NK细胞过继转移及弓形虫感染小鼠模型的建立第74-75页
   ·ELISA检测血清IFN-γ水平第75-76页
   ·免疫组化检测脾脏速殖子分布第76页
   ·Real-time PCR检测脾脏刚地弓形虫虫荷第76-78页
   ·统计学分析第78-79页
 结果第79-83页
  1. 不同NK细胞过继转移小鼠在刚地弓形虫感染后的血清IFN-γ分泌水平第79-80页
  2. 脾脏速殖子的分布情况第80-81页
  3. 脾脏刚地弓形虫虫荷定量第81页
  4. NK细胞的MyD88信号通路对刚地弓形虫感染小鼠存活的影响第81-83页
讨论第83-91页
小结第91-93页
参考文献第93-105页
文献综述第105-128页
 参考文献第117-128页
附录第128-130页
致谢第130页

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