| 英文缩写词表 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-14页 |
| 一 实验材料 | 第14-17页 |
| (一) 细胞株 | 第14页 |
| (二) 实验药物 | 第14页 |
| (三) 主要试剂 | 第14页 |
| (四) 主要实验仪器 | 第14-15页 |
| (五) 主要溶液配制 | 第15-16页 |
| (六) 软件 | 第16-17页 |
| 二 实验方法 | 第17-28页 |
| (一) 细胞培养 | 第17页 |
| (二) 四唑盐比色(MTT法)检测GAA对人腺样囊性癌ACC-M细胞生长的影响 | 第17-18页 |
| 1、MTT原理 | 第17页 |
| 2、MTT实验步骤 | 第17-18页 |
| (三) 甲基化特异性PCR(MS-PCR)检测GAA对人腺样囊性癌ACC-M细胞相关抑癌基因甲基化水平的变化 | 第18-24页 |
| 1、MS-PCR的原理 | 第18-19页 |
| 2、细胞模型构建 | 第19页 |
| 3、基因组的提取 | 第19-21页 |
| 4、基因组定量 | 第21页 |
| 5、基因组的修饰、纯化回收及DNA的脱硫沉淀 | 第21-22页 |
| 6、引物设计 | 第22-23页 |
| 7、PCR扩增 | 第23-24页 |
| 8、电泳 | 第24页 |
| (四) 实时荧光定量RT-PCR法检测GAA处理后的人腺样囊性癌ACC-M细胞E-cadherin、p16基因mRNA表达的变化 | 第24-27页 |
| 1、实时荧光定量Real-time RT-PCR的原理 | 第24-25页 |
| 2、细胞模型构建 | 第25页 |
| 3、RNA提取 | 第25页 |
| 4、反转录反应第一链cDNA合成 | 第25-26页 |
| 5、引物设计 | 第26页 |
| 6、RT-PCR扩增 | 第26-27页 |
| (五) 数据统计学分析 | 第27-28页 |
| 三 实验结果 | 第28-40页 |
| (一) MTT检测GAA对腺样囊性癌ACC-M细胞生长的影响 | 第28-32页 |
| (二) MS-PCR检测GAA对人腺样囊性癌ACC-M细胞抑癌基因甲基化水平的影响结果 | 第32-36页 |
| 1、人腺样囊性癌ACC-M细胞甲基化基因的筛选结果 | 第32-33页 |
| 2、人腺样囊性癌ACC-M细胞经GAA处理前后E-cadherin、p16基因甲基化水平变化情况 | 第33-36页 |
| (三) 实时荧光定量RT-PCR检测GAA对人腺样囊性癌ACC-M细胞E-cadherin、p16基因mRNA表达水平的影响结果 | 第36-40页 |
| 1、E-cadherin基因mRNA表达水平变化 | 第37-38页 |
| 2、p16基因mRNA表达水平变化 | 第38-40页 |
| 四 讨论 | 第40-45页 |
| 五 问题与展望 | 第45-46页 |
| 六 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 文献综述：涎腺腺样囊性癌中相关抑癌基因的研究进展 | 第52-61页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 攻读学位期间发表的文章 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
