| 致谢 | 第1-4页 |
| 中文摘要 | 第4-8页 |
| 引言 | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1 甾醇生物合成抑制剂类杀菌剂抗药性概况 | 第10-11页 |
| 2 甾醇生物合成抑制剂的杀菌作用机理 | 第11-12页 |
| 3 病原真菌对SBIs类杀菌剂抗药性的遗传 | 第12-13页 |
| 4 植物病原真菌对SBIs杀菌剂的抗药性机制 | 第13-21页 |
| 4．1 ABC运输体基因在抗药性中的作用 | 第13-16页 |
| 4．1．1 酵母中的ABC运输体 | 第13-14页 |
| 4．1．2 丝状真菌ABC运输体 | 第14-15页 |
| 4．1．3 ABC运输体参与植物防卫反应产物的排出 | 第15-16页 |
| 4．2 CYP51基因在抗药性中的作用 | 第16-18页 |
| 4．2．1 真菌的CYP51基因研究概况 | 第16页 |
| 4．2．2 CYP51发生点突变导致酶与药剂的亲和性下降 | 第16-18页 |
| 4．2．3 CYP51基因表达水平的改变 | 第18页 |
| 4．3 其它可能的抗性机制 | 第18-21页 |
| 4．3．1 麦角甾醇合成过程中除14-α脱甲基酶外的其它酶靶标位点的修饰 | 第18-19页 |
| 4．3．2 菌体通过代谢解除DMIs杀菌剂的毒性 | 第19页 |
| 4．3．3 可诱导的抗药性机制 | 第19-21页 |
| 第二章 指状青霉对抑霉唑的抗性研究 | 第21-31页 |
| 2．1 实验材料 | 第21页 |
| 2．1．1 供试药剂 | 第21页 |
| 2．1．2 供试菌株 | 第21页 |
| 2．1．3 培养基 | 第21页 |
| 2．2 实验方法 | 第21-23页 |
| 2．2．1 病菌的分离与纯化 | 第21-22页 |
| 2．2．2 病菌对杀菌剂敏感性的离体测定 | 第22-23页 |
| 2．2．3 抗性菌株适合度测定 | 第23页 |
| 2．2．3．1 菌丝生长速率的测定 | 第23页 |
| 2．2．3．2 致病力的测定 | 第23页 |
| 2．2．3．3 产孢能力的测定 | 第23页 |
| 2．3 结果与分析 | 第23-29页 |
| 2．3．1 田间菌株的敏感性测定与抗性划分 | 第23-24页 |
| 2．3．2 抗性水平测定 | 第24-25页 |
| 2．3．3 交互抗性测定 | 第25-26页 |
| 2．3．4 抗性菌株适合度测定 | 第26-29页 |
| 2．3．4．1 抗性菌株与敏感菌株菌丝生长量的比较 | 第26-27页 |
| 2．3．4．2 抗性菌株与敏感菌株产孢能力的比较 | 第27-28页 |
| 2．3．4．3 抗性菌株与敏感菌株致病力的比较 | 第28-29页 |
| 2．4 讨论 | 第29-31页 |
| 2．4．1 病原真菌对DMIs杀菌剂的抗药性 | 第29页 |
| 2．4．2 抑霉唑抗性划分 | 第29-30页 |
| 2．4．3 抑霉唑抗性与适合度的关系 | 第30页 |
| 2．4．4 DMIs杀菌剂的交互抗性 | 第30-31页 |
| 第三章 CYP51基因克隆研究 | 第31-49页 |
| 3．1 实验材料 | 第31页 |
| 3．1．1 DNA来源 | 第31页 |
| 3．1．2 细菌菌株 | 第31页 |
| 3．1．3 抗菌素 | 第31页 |
| 3．1．4 主要分子生物学试剂 | 第31页 |
| 3．2 实验方法 | 第31-37页 |
| 3．2．1 柑桔绿霉菌基因组DNA的提取 | 第31-32页 |
| 3．2．2 引物的设计与合成 | 第32-33页 |
| 3．2．3 PCR扩增 | 第33页 |
| 3．2．4 电泳 | 第33页 |
| 3．2．5 PCR产物回收及纯化 | 第33-34页 |
| 3．2．6 PCR产物的连接 | 第34页 |
| 3．2．7 感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| 3．2．8 连接产物的转化 | 第35页 |
| 3．2．9 重组克隆的筛选与鉴定 | 第35-36页 |
| 3．2．10 重组质粒鉴定 | 第36页 |
| 3．2．11 序列测定和分析 | 第36-37页 |
| 3．2．11．1 重组质粒的提取和纯化 | 第36-37页 |
| 3．2．11．2 序列测定及分析 | 第37页 |
| 3．3 结果与分析 | 第37-47页 |
| 3．3．1 CYP51基因克隆 | 第37-38页 |
| 3．3．2 序列测定和基因结构分析 | 第38-39页 |
| 3．3．3 同源性比较 | 第39页 |
| 3．3．4 抑霉唑抗性和敏感菌株间CYP51基因序列比较 | 第39-47页 |
| 3．4 讨论 | 第47-49页 |
| 3．4．1 丝状真菌对SBI类杀菌剂抗性机制 | 第47页 |
| 3．4．2 插入的串联重复序列与抗性的关系 | 第47-48页 |
| 3．4．3 氨基酸取代与抗性的关系 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 英文摘要 | 第54-56页 |
| 附录A 本论文所用缩写词及中英文对照 | 第56-57页 |
| 附录B 常用培养基及主要试剂的配置 | 第57-58页 |
