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基于脱细胞猪角膜基质的组织工程人角膜基质的体外重建及其动物移植研究

摘要第1-9页
Abstract第9-17页
第一章 文献综述第17-30页
 1 角膜与组织工程第17-20页
   ·角膜的结构与功能第17-18页
   ·组织工程的兴起与研究要素第18-20页
 2 组织工程角膜种子细胞的研究进展第20-23页
   ·人角膜基质细胞第20-22页
   ·人骨髓间充质干细胞第22页
   ·人脂肪源性干细胞第22-23页
   ·人皮肤成纤维细胞第23页
 2 组织工程角膜载体支架的研究进展第23-28页
   ·脱细胞猪角膜基质第24-25页
   ·胶原及其复合材料第25-26页
   ·丝素蛋白第26页
   ·壳聚糖第26-27页
   ·纤维蛋白第27页
   ·聚羟基乙酸第27-28页
 3 组织工程角膜基质体外重建的研究进展第28-29页
 4 本文的研究目的与意义第29-30页
   ·研究目的第29页
   ·研究意义第29-30页
第二章 非转染人角膜基质细胞系的体外培养与鉴定第30-43页
 1 材料用品第31-33页
   ·材料第31页
   ·主要仪器第31页
   ·药品与耗材第31-32页
   ·常用溶液配方第32-33页
 2 方法第33-36页
   ·人角膜基质细胞的复苏及体外扩增培养第33-34页
     ·人角膜基质细胞的复苏第33-34页
     ·人角膜基质细胞的体外培养第34页
   ·人角膜基质细胞生长特性第34页
   ·人角膜基质细胞染色体分析第34-35页
   ·人角膜基质细胞免疫细胞化学检测第35-36页
 3 结果第36-40页
   ·人角膜基质细胞的细胞形态观察第36页
   ·人角膜基质细胞的生长特性第36-37页
   ·人角膜基质细胞的染色体分析第37-38页
   ·人角膜基质细胞的免疫细胞化学检测第38-40页
     ·人角膜基质细胞标志蛋白的检测第38页
     ·人角膜基质细胞膜连接蛋白的检测第38-39页
     ·人角膜基质细胞膜功能蛋白的检测第39-40页
 4 讨论第40-42页
 5 本章小结第42-43页
第三章 脱细胞猪角膜基质载体支架的制备第43-54页
 1 材料用品第44-46页
   ·材料第44页
   ·主要仪器第44页
   ·药品与耗材第44-45页
   ·常用溶液配方第45-46页
 2 方法第46-48页
   ·脱细胞猪角膜基质载体支架的制备第46页
   ·石蜡切片第46-47页
   ·HE 染色第47页
   ·冰冻切片第47页
   ·DAPI 染色第47-48页
   ·透射电镜观察第48页
   ·透光率第48页
   ·孔隙率第48页
   ·统计学分析第48页
 3 结果第48-51页
   ·脱细胞效果第48-49页
   ·超微结构观察第49-50页
   ·透明度与透光率第50-51页
   ·孔隙率第51页
 4 讨论第51-53页
 5 本章小结第53-54页
第四章 脱细胞猪角膜基质载体支架的生物相容性研究第54-63页
 1 材料用品第54-57页
   ·材料第54页
   ·主要仪器第54-55页
   ·药品与耗材第55-56页
   ·常用溶液配方第56-57页
 2 方法第57-58页
   ·人角膜基质细胞的体外培养第57页
   ·细胞毒性评价(MTT)第57-58页
   ·注射接种第58页
   ·冰冻切片免疫细胞化学检测第58页
 3 结果第58-61页
   ·细胞活力检测第58-59页
   ·形态学观察第59-60页
   ·免疫细胞化学检测第60-61页
     ·人角膜基质细胞标志蛋白的检测第60页
     ·人角膜基质细胞膜连接蛋白的检测第60-61页
 4 讨论第61-62页
 5 本章小结第62-63页
第五章 组织工程人角膜基质的体外重建及鉴定第63-73页
 1 材料用品第63-66页
   ·材料第63页
   ·主要仪器第63-64页
   ·药品与耗材第64-65页
   ·常用溶液配方第65-66页
 2 方法第66-68页
   ·DiI 荧光标记人角膜基质细胞后注射接种细胞第66-67页
   ·石蜡切片第67页
   ·HE 染色第67页
   ·冰冻切片第67页
   ·DiI 荧光观察及免疫细胞化学检测第67页
   ·透射电镜观察第67-68页
 3 结果第68-70页
   ·组织工程人角膜基质的形态学观察第68页
   ·组织工程人角膜基质的 DiI 荧光检测第68-69页
   ·组织工程人角膜基质的超微结构的检测第69页
   ·组织工程人角膜基质的免疫细胞化学的检测第69-70页
 4 讨论第70-72页
 5 本章小结第72-73页
第六章 组织工程人角膜基质的新西兰兔及比格犬板层角膜移植研究第73-90页
 1 材料用品第73-77页
   ·材料第73-74页
   ·主要仪器第74页
   ·药品与耗材第74-75页
   ·常用溶液配方第75-77页
 2 方法第77-79页
   ·前板层角膜移植术第77页
   ·组织工程人角膜基质移植效果检测第77-79页
     ·裂隙灯显微镜观察与照相第78页
     ·DiI 标记荧光检测第78页
     ·免疫细胞化学检测第78页
     ·石蜡切片 HE 染色第78页
     ·透射电镜观察第78-79页
 3 结果第79-87页
   ·新西兰兔术后在体检测第79页
   ·新西兰兔移植眼角膜离体鉴定第79-84页
     ·角膜形态结构观察第80页
     ·DiI 标记荧光检测第80页
     ·角膜超微结构检测第80-81页
     ·角膜免疫细胞化学检测检测第81-84页
       ·人角膜基质细胞标志蛋白的检测第81-82页
       ·人角膜基质细胞膜连接蛋白的检测第82-83页
       ·人角膜基质细胞功能蛋白的检测第83-84页
   ·比格犬术后在体检测第84-87页
     ·比格犬术后角膜透明度检测第84-85页
     ·比格犬移植后角膜厚度检测第85-86页
     ·比格犬移植后眼压检测第86-87页
 4 讨论第87-89页
 5 本章小结第89-90页
全文总结第90-93页
参考文献第93-102页
致谢第102-103页
个人简历第103页
博士期间发表论文第103-104页

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