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孤雌胚胎干细胞来源的组织工程皮肤种子细胞的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第一章 文献综述第11-18页
   ·ESCs的研究进展第11-13页
     ·ESCs和pESCs的研究发展第11-12页
     ·目前存在的问题第12-13页
   ·TES的研究和进展第13-15页
     ·TES的发展和分类第13-14页
     ·种子细胞的来源第14-15页
     ·目前存在的问题第15页
   ·本实验研究的目的、意义及实验内容第15-18页
     ·实验的目的和意义第15-16页
     ·实验内容第16-18页
第二章 pESCs和ESCs的扩增培养和特征检测第18-24页
   ·实验试剂第18页
   ·实验动物第18页
   ·实验仪器第18页
   ·实验器材第18-19页
   ·主要试剂配制第19页
     ·PBS的配制第19页
     ·4%多聚甲醛的配制第19页
     ·0.1%Triton X-100的配制第19页
     ·1%明胶的配制第19页
   ·实验方法第19-20页
     ·pESCs和ESCs的扩增培养第19页
     ·标志基因的检测第19-20页
     ·畸胎瘤的HE染色第20页
   ·实验结果第20-22页
     ·pESCs和ESCs的形态学观察第21页
     ·标志基因的检测第21页
     ·畸胎瘤的HE染色第21-22页
   ·实验小结与讨论第22-24页
第三章 pESCs和ESCs形成EBs及获得MSCs第24-32页
   ·实验试剂第24页
   ·实验仪器第24页
   ·实验器材第24-25页
   ·主要试剂配制第25页
     ·细胞扩增培养液第25页
     ·PBS的配制第25页
   ·实验方法第25-27页
     ·EBs的形成和检测第25页
     ·EBs的贴壁培养和MSCs的获得第25-27页
     ·结果统计分析第27页
   ·实验结果第27-30页
     ·EBs的免疫荧光染色结果第27-28页
     ·EBs的贴壁培养和检测第28-30页
   ·实验小结与讨论第30-32页
第四章 MSCs多系分化能力的检测第32-38页
   ·实验试剂第32页
   ·实验仪器第32页
   ·实验器材第32页
   ·主要试剂配制第32-33页
     ·细胞扩增培养液第32-33页
     ·PBS的配制第33页
   ·实验方法第33-34页
     ·MSCs向成骨、软骨和脂肪方向的诱导第33页
     ·MSCs多系分化能力的检测第33-34页
     ·流式细胞仪检测细胞表面抗原第34页
   ·实验结果第34-36页
     ·MSCs的观察第35页
     ·MSCs多系分化能力的检测第35页
     ·MSCs表面抗原的检测第35-36页
   ·实验小结与讨论第36-38页
第五章 MSCs向成纤维细胞的诱导第38-48页
   ·实验试剂第38页
   ·实验仪器第38页
   ·实验器材第38页
   ·主要试剂配制第38-39页
     ·细胞扩增培养液第38-39页
     ·诱导培养液的配制第39页
     ·PBS的配制第39页
   ·实验方法第39-41页
     ·MSCs向成纤维细胞的诱导第39页
     ·生长因子的实时定量PCR检测第39-40页
     ·生长因子的ELISA检测第40页
     ·波形蛋白和角蛋白的表达检测第40页
     ·细胞表面抗原的检测第40页
     ·结果统计分析第40-41页
   ·实验结果第41-46页
     ·诱导所获得细胞的形态学观察第41页
     ·生长因子的实时定量PCR检测第41-43页
     ·生长因子的ELISA检测第43-45页
     ·免疫荧光检测第45-46页
   ·实验小结和讨论第46-48页
第六章 TES的制备和移植实验第48-57页
   ·实验试剂第48页
   ·实验动物第48页
   ·实验仪器第48页
   ·实验器材第48-49页
   ·主要试剂准备和配制第49页
     ·10×DMEM培养液的配制第49页
     ·DMEM培养液的配制第49页
     ·PBS的配制第49页
     ·脱毛剂的配制第49页
     ·麻醉剂的配制第49页
     ·其他试剂的配制第49页
   ·实验方法第49-52页
     ·胶原蛋白的提取第49-50页
     ·不含细胞TES的制备第50页
     ·含细胞TES的制备第50页
     ·含细胞TES的培养和观察第50-51页
     ·TES的移植第51页
     ·取材及HE染色第51页
     ·结果统计分析第51-52页
   ·实验结果第52-55页
     ·TES的观察第52页
     ·移植实验第52-55页
   ·实验小结和讨论第55-57页
结论第57-59页
参考文献第59-66页
附录第66-68页
致谢第68页

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