摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-18页 |
·ESCs的研究进展 | 第11-13页 |
·ESCs和pESCs的研究发展 | 第11-12页 |
·目前存在的问题 | 第12-13页 |
·TES的研究和进展 | 第13-15页 |
·TES的发展和分类 | 第13-14页 |
·种子细胞的来源 | 第14-15页 |
·目前存在的问题 | 第15页 |
·本实验研究的目的、意义及实验内容 | 第15-18页 |
·实验的目的和意义 | 第15-16页 |
·实验内容 | 第16-18页 |
第二章 pESCs和ESCs的扩增培养和特征检测 | 第18-24页 |
·实验试剂 | 第18页 |
·实验动物 | 第18页 |
·实验仪器 | 第18页 |
·实验器材 | 第18-19页 |
·主要试剂配制 | 第19页 |
·PBS的配制 | 第19页 |
·4%多聚甲醛的配制 | 第19页 |
·0.1%Triton X-100的配制 | 第19页 |
·1%明胶的配制 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-20页 |
·pESCs和ESCs的扩增培养 | 第19页 |
·标志基因的检测 | 第19-20页 |
·畸胎瘤的HE染色 | 第20页 |
·实验结果 | 第20-22页 |
·pESCs和ESCs的形态学观察 | 第21页 |
·标志基因的检测 | 第21页 |
·畸胎瘤的HE染色 | 第21-22页 |
·实验小结与讨论 | 第22-24页 |
第三章 pESCs和ESCs形成EBs及获得MSCs | 第24-32页 |
·实验试剂 | 第24页 |
·实验仪器 | 第24页 |
·实验器材 | 第24-25页 |
·主要试剂配制 | 第25页 |
·细胞扩增培养液 | 第25页 |
·PBS的配制 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-27页 |
·EBs的形成和检测 | 第25页 |
·EBs的贴壁培养和MSCs的获得 | 第25-27页 |
·结果统计分析 | 第27页 |
·实验结果 | 第27-30页 |
·EBs的免疫荧光染色结果 | 第27-28页 |
·EBs的贴壁培养和检测 | 第28-30页 |
·实验小结与讨论 | 第30-32页 |
第四章 MSCs多系分化能力的检测 | 第32-38页 |
·实验试剂 | 第32页 |
·实验仪器 | 第32页 |
·实验器材 | 第32页 |
·主要试剂配制 | 第32-33页 |
·细胞扩增培养液 | 第32-33页 |
·PBS的配制 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-34页 |
·MSCs向成骨、软骨和脂肪方向的诱导 | 第33页 |
·MSCs多系分化能力的检测 | 第33-34页 |
·流式细胞仪检测细胞表面抗原 | 第34页 |
·实验结果 | 第34-36页 |
·MSCs的观察 | 第35页 |
·MSCs多系分化能力的检测 | 第35页 |
·MSCs表面抗原的检测 | 第35-36页 |
·实验小结与讨论 | 第36-38页 |
第五章 MSCs向成纤维细胞的诱导 | 第38-48页 |
·实验试剂 | 第38页 |
·实验仪器 | 第38页 |
·实验器材 | 第38页 |
·主要试剂配制 | 第38-39页 |
·细胞扩增培养液 | 第38-39页 |
·诱导培养液的配制 | 第39页 |
·PBS的配制 | 第39页 |
·实验方法 | 第39-41页 |
·MSCs向成纤维细胞的诱导 | 第39页 |
·生长因子的实时定量PCR检测 | 第39-40页 |
·生长因子的ELISA检测 | 第40页 |
·波形蛋白和角蛋白的表达检测 | 第40页 |
·细胞表面抗原的检测 | 第40页 |
·结果统计分析 | 第40-41页 |
·实验结果 | 第41-46页 |
·诱导所获得细胞的形态学观察 | 第41页 |
·生长因子的实时定量PCR检测 | 第41-43页 |
·生长因子的ELISA检测 | 第43-45页 |
·免疫荧光检测 | 第45-46页 |
·实验小结和讨论 | 第46-48页 |
第六章 TES的制备和移植实验 | 第48-57页 |
·实验试剂 | 第48页 |
·实验动物 | 第48页 |
·实验仪器 | 第48页 |
·实验器材 | 第48-49页 |
·主要试剂准备和配制 | 第49页 |
·10×DMEM培养液的配制 | 第49页 |
·DMEM培养液的配制 | 第49页 |
·PBS的配制 | 第49页 |
·脱毛剂的配制 | 第49页 |
·麻醉剂的配制 | 第49页 |
·其他试剂的配制 | 第49页 |
·实验方法 | 第49-52页 |
·胶原蛋白的提取 | 第49-50页 |
·不含细胞TES的制备 | 第50页 |
·含细胞TES的制备 | 第50页 |
·含细胞TES的培养和观察 | 第50-51页 |
·TES的移植 | 第51页 |
·取材及HE染色 | 第51页 |
·结果统计分析 | 第51-52页 |
·实验结果 | 第52-55页 |
·TES的观察 | 第52页 |
·移植实验 | 第52-55页 |
·实验小结和讨论 | 第55-57页 |
结论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
附录 | 第66-68页 |
致谢 | 第68页 |