| 论文创新点 | 第1-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 1. 引言 | 第15-34页 |
| ·肝癌 | 第15-20页 |
| ·分类与流行病学 | 第15-16页 |
| ·临床表现与病因 | 第16页 |
| ·诊断 | 第16-17页 |
| ·治疗 | 第17页 |
| ·化学药物治疗 | 第17-19页 |
| ·靶向药物治疗 | 第19-20页 |
| ·细胞凋亡 | 第20-23页 |
| ·定义 | 第20页 |
| ·分类与发生过程 | 第20-21页 |
| ·细胞凋亡与癌症 | 第21-22页 |
| ·细胞凋亡的检测技术 | 第22-23页 |
| ·细胞自噬 | 第23-30页 |
| ·定义与分类 | 第23-24页 |
| ·细胞自噬诱导因子 | 第24-25页 |
| ·细胞自噬的生理功能及相关疾病 | 第25-27页 |
| ·细胞自噬与肝癌 | 第27-28页 |
| ·靶向细胞自噬通路的肿瘤治疗策略 | 第28页 |
| ·细胞自噬相关基因及信号通路 | 第28-30页 |
| ·细胞自噬的检测技术 | 第30页 |
| ·紫草素 | 第30-32页 |
| ·抗肿瘤中药化合物 | 第30-31页 |
| ·中药化合物的优势 | 第31页 |
| ·紫草 | 第31-32页 |
| ·紫草素的抗肿瘤活性 | 第32页 |
| ·本研究出发点 | 第32-34页 |
| 2. 实验材料与方法 | 第34-53页 |
| ·实验材料 | 第34-39页 |
| ·细胞系和菌株 | 第34页 |
| ·实验动物 | 第34页 |
| ·药品与试剂 | 第34-35页 |
| ·抗体 | 第35-36页 |
| ·质粒 | 第36页 |
| ·主要实验仪器 | 第36-38页 |
| ·主要试剂的配制 | 第38页 |
| ·生物学软件 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-53页 |
| ·重组RNA干扰质粒的构建与鉴定 | 第39-42页 |
| ·细胞操作 | 第42-44页 |
| ·Western Blot蛋白免疫印迹实验 | 第44-47页 |
| ·细胞活力检测 | 第47页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第47页 |
| ·细胞自噬检测 | 第47-48页 |
| ·活性氧自由基(ROS)检测 | 第48-49页 |
| ·NF-κB活性检测 | 第49-50页 |
| ·动物实验方案 | 第50-52页 |
| ·统计学分析 | 第52-53页 |
| 3. 实验结果 | 第53-132页 |
| ·紫草素的化学结构 | 第53页 |
| ·紫草素诱导肝癌细胞凋亡 | 第53-60页 |
| ·紫草素对肝癌细胞的杀伤作用 | 第53-56页 |
| ·紫草素诱导肝癌细胞CASPASE依赖的细胞凋亡 | 第56-60页 |
| ·紫草素对细胞凋亡调控分子的影响 | 第60页 |
| ·紫草素通过激活活性氧自由基ROS诱导细胞凋亡 | 第60-63页 |
| ·紫草素处理导致ROS积累 | 第60-61页 |
| ·ROS清除剂拯救紫草素诱导的肝癌细胞凋亡 | 第61-63页 |
| ·紫草素诱导的细胞凋亡与MAPK途径 | 第63-65页 |
| ·紫草素对细胞MAPK信号通路的影响 | 第63-64页 |
| ·紫草素不通过激活JNK诱导细胞凋亡 | 第64-65页 |
| ·紫草素通过激活Akt途径诱导细胞凋亡 | 第65-70页 |
| ·紫草素抑制Akt途径 | 第65-66页 |
| ·外源过表达Akt拯救紫草素诱导的细胞凋亡 | 第66-68页 |
| ·Akt抑制剂与紫草素协同诱导肝癌细胞凋亡 | 第68-70页 |
| ·紫草素通过抑制RIP途径诱导细胞凋亡 | 第70-76页 |
| ·紫草素抑制RIP途径 | 第70页 |
| ·外源过表达RIP拯救紫草素诱导的细胞凋亡 | 第70-72页 |
| ·RIP的沉默增强紫草素诱导的细胞凋亡 | 第72-73页 |
| ·RIP抑制剂与紫草素协同诱导肝癌细胞凋亡 | 第73-74页 |
| ·RIP抑制剂与紫草素联合处理影响ROS积累及其它信号通路 | 第74-76页 |
| ·紫草素通过抑制NF-κB途径诱导细胞凋亡 | 第76-81页 |
| ·紫草素抑制NF-κB途径 | 第77-78页 |
| ·激活NF-κB可拯救紫草素杀伤作用 | 第78-79页 |
| ·抑制NF-κB活性可增强紫草素杀伤作用 | 第79-81页 |
| ·紫草素诱导ROS积累是Akt、NF-κB及RIP通路的上游事件 | 第81-88页 |
| ·ROS清除剂拯救紫草素对Akt、RIP及NF-κB通路的抑制 | 第81-82页 |
| ·Akt、RIP过表达或RIP沉默不影响紫草素诱导的ROS积累 | 第82-84页 |
| ·ROS清除剂拯救Akt抑制剂与紫草素协同诱导的细胞死亡 | 第84页 |
| ·ROS清除剂拯救RIP抑制剂与紫草素协同诱导的细胞凋亡 | 第84-87页 |
| ·紫草素作用下RIP与Akt通路间的相互关系 | 第87-88页 |
| ·紫草素在动物体内诱导肝癌细胞凋亡 | 第88-95页 |
| ·紫草素抑制小鼠肝癌细胞系H22在动物体内生长 | 第88-91页 |
| ·紫草素抑制人肝癌细胞系Huh7移植瘤在动物体内的生长 | 第91-92页 |
| ·紫草素诱导动物体内Huh7移植瘤细胞凋亡 | 第92-93页 |
| ·紫草素对移植瘤内信号通路相关蛋白的作用 | 第93-94页 |
| ·紫草素激活移植瘤内的ROS水平 | 第94-95页 |
| ·紫草素诱导细胞凋亡的通路图 | 第95-96页 |
| ·紫草素诱导肝癌细胞自噬 | 第96-105页 |
| ·紫草素诱导细胞自噬的浓度、时间梯度及最佳条件 | 第96-99页 |
| ·GFP-LC3荧光点聚集与吖啶橙染色实验证明细胞自噬发生 | 第99-101页 |
| ·紫草素诱导自噬潮发生 | 第101-103页 |
| ·细胞自噬抑制剂3-MA抑制紫草素诱导的细胞自噬 | 第103-104页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察线粒体自噬 | 第104-105页 |
| ·紫草素通过激活活性氧自由基(ROS)诱导细胞自噬 | 第105-109页 |
| ·紫草素激活细胞内ROS水平 | 第105-106页 |
| ·ROS清除剂拯救紫草素诱导的细胞自噬 | 第106-109页 |
| ·紫草素诱导的细胞自噬与MAPK | 第109-114页 |
| ·紫草素不通过激活JNK诱导细胞自噬 | 第109-111页 |
| ·ERK的激活参与了紫草素诱导的细胞自噬 | 第111-114页 |
| ·RIP调节紫草素诱导的肝癌细胞自噬 | 第114-119页 |
| ·紫草素处理对RIP的影响 | 第114-115页 |
| ·RIP抑制剂增强紫草素诱导的细胞自噬 | 第115-117页 |
| ·过表达RIP抑制紫草素诱导的细胞自噬 | 第117-118页 |
| ·RIP抑制剂不抑制NF-κB与JNK的活性 | 第118-119页 |
| ·紫草素诱导的ROS积累是影响ERK及RIP通路的上游事件 | 第119-121页 |
| ·ROS清除剂抑制ERK的激活 | 第120页 |
| ·ERK抑制剂不影响ROS的积累 | 第120-121页 |
| ·NAC拯救Nec-1与紫草素协同诱导的细胞自噬 | 第121页 |
| ·紫草通过激活ATG7通路诱导肝癌细胞自噬 | 第121-123页 |
| ·细胞自噬相关基因表达 | 第121-122页 |
| ·ATG7的沉默抑制紫草素诱导的细胞自噬 | 第122-123页 |
| ·紫草素在动物体内诱导肝癌细胞自噬 | 第123-131页 |
| ·较低剂量紫草素抑制动物体内肿瘤生长 | 第123-124页 |
| ·紫草素能延长荷瘤小鼠存活时间 | 第124-125页 |
| ·紫草素在体内对动物毒性较低 | 第125-127页 |
| ·较低浓度紫草素处理不显著诱导动物体内肿瘤细胞凋亡 | 第127-128页 |
| ·较低浓度紫草素处理诱导动物体内肿瘤细胞自噬 | 第128-129页 |
| ·紫草素处理诱导动物体内肿瘤ROS水平上升 | 第129页 |
| ·紫草素处理诱导肿瘤内相关蛋白水平变化 | 第129-131页 |
| ·紫草素诱导细胞自噬的通路图 | 第131-132页 |
| 4. 讨论 | 第132-139页 |
| ·传统中药提取的化合物在肿瘤治疗中的优势与不足 | 第132-133页 |
| ·紫草素诱导的细胞凋亡与细胞自噬之间的复杂关系 | 第133页 |
| ·活性氧自由基是重要的程序性死亡启动因子 | 第133-134页 |
| ·Akt通路在细胞程序性死亡中的角色 | 第134-135页 |
| ·RIP与细胞命运决定 | 第135-136页 |
| ·紫草素临床治疗肝癌的前景 | 第136-137页 |
| ·多通路、多靶点、多死亡方式的肿瘤化疗新思路 | 第137-139页 |
| 参考文献 | 第139-151页 |
| 缩略词 | 第151-153页 |
| 博士研究生期间已发表或待发表的科研论文 | 第153-154页 |
| 致谢 | 第154页 |
