| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-17页 |
| 缩略词表 | 第17-19页 |
| 前言 | 第19-23页 |
| 第一部分 mTOR通路信号分子在多囊肾组织中的表达 | 第23-41页 |
| 材料与方法 | 第23-33页 |
| 材料 | 第23-27页 |
| （一）组织标本 | 第23-24页 |
| （二）主要试剂 | 第24页 |
| （三）抗体 | 第24-25页 |
| （四）配制试剂 | 第25-26页 |
| （五）主要仪器 | 第26-27页 |
| 方法 | 第27-33页 |
| （一）实验动物的繁育及基因鉴定 | 第27-30页 |
| （二）组织标本处理 | 第30页 |
| （三）肾组织中mTOR通路蛋白WesternBlotting分析 | 第30-33页 |
| 结果 | 第33-39页 |
| 一、Han:SPRD大鼠的基因鉴定及肾组织病理特征 | 第33-36页 |
| （一）Han:SPRD大鼠的基因鉴定 | 第33页 |
| （二）Han:SPRD大鼠的肾功能指标 | 第33-35页 |
| （三）Han:SPRD大鼠的病理特征 | 第35-36页 |
| 二、mTOR通路分子ADPKD动物模型Han:SPRD大鼠肾组织中的表达和分布 | 第36-39页 |
| （一）mTOR通路分子在不同周龄Han:SPRD大鼠肾组织中表达 | 第36-37页 |
| （二）mTOR通路分子在ADPKD患者及正常对照肾组织中的表达水平 | 第37-39页 |
| 讨论 | 第39-41页 |
| 第二部分 罗格列酮联合雷帕霉素治疗Han:SPRD大鼠的实验研究 | 第41-67页 |
| 材料与方法 | 第41-50页 |
| 材料 | 第41-43页 |
| （一）实验动物 | 第41页 |
| （二）实验药物 | 第41页 |
| （三）主要试剂 | 第41-42页 |
| （四）主要抗体 | 第42页 |
| （五）主要仪器 | 第42-43页 |
| 实验方法 | 第43-50页 |
| （一）动物实验方案 | 第43-44页 |
| （二）生理、生化指标监测 | 第44页 |
| （三）组织学分析 | 第44-45页 |
| （四）免疫组织化学（SABC法） | 第45页 |
| （五）WesternBlot检测各处理组及对照组mTor、Akt、ERK、p70S6K及其相应磷酸化蛋白的表达水平 | 第45-49页 |
| （六）统计学处理 | 第49-50页 |
| 结果 | 第50-64页 |
| 一、生理生化指标及组织学分析 | 第50-57页 |
| 二、免疫组织化学 | 第57-60页 |
| （一）使用免疫组化方法检测核增殖抗原PCNA | 第57-59页 |
| （二）使用免疫组化方法检测多囊肾组织p p70S6K表达 | 第59-60页 |
| 三、Westernblotting分析 | 第60-64页 |
| 讨论 | 第64-67页 |
| 第三部分 联合使用雷帕霉素及罗格列酮对囊肿衬里上皮细胞增殖、凋亡、细胞周期及mTOR通路的作用研究 | 第67-87页 |
| 材料与方法 | 第67-75页 |
| 材料 | 第67-71页 |
| （一）实验细胞株 | 第67页 |
| （二）主要试剂 | 第67-68页 |
| （三）抗体 | 第68-69页 |
| （四）配制试剂（主要参照第二版分子实验克隆指南） | 第69-70页 |
| （五）主要仪器 | 第70-71页 |
| 实验方法 | 第71-75页 |
| （一）细胞培养 | 第71页 |
| （二）MTT法检测细胞增殖 | 第71-72页 |
| （三）流式细胞术检测细胞凋亡 | 第72页 |
| （四）流式细胞术检测细胞周期 | 第72-73页 |
| （五）免疫印迹（Westernblotting） | 第73-75页 |
| （六）统计学处理 | 第75页 |
| 结果 | 第75-85页 |
| 一、雷帕霉素及罗格列酮对WT9 12细胞增殖的抑制作用 | 第75-77页 |
| 二、雷帕霉素及罗格列酮联合使用对囊肿衬里上皮细胞WT9 12周期的影响 | 第77-78页 |
| 三、雷帕霉素及罗格列酮联合使用对囊肿衬里上皮细胞WT9 12凋亡的影响 | 第78-79页 |
| 四、联合用药对mTOR信号转导通路影响的Westernblotting分析 | 第79-85页 |
| 讨论 | 第85-87页 |
| 全文总结 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-97页 |
| 文献综述 | 第97-110页 |
| 参考文献 | 第103-110页 |
| 在读期间完成和发表的文章和参加科研工作 | 第110页 |
| 参加学术会议会议情况 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111页 |
