| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-26页 |
| ·植物抗逆研究进展 | 第15-20页 |
| ·植物所受逆境的种类 | 第15页 |
| ·植物抗逆的分子机制 | 第15-16页 |
| ·植物中与抗逆相关的转录因子 | 第16页 |
| ·MYB 类转录因子 | 第16-17页 |
| ·WRKY 类转录因子 | 第17-18页 |
| ·bZIP 类转录因子 | 第18页 |
| ·AP2/ERF 类转录因子 | 第18-19页 |
| ·NAC 类转录因子 | 第19-20页 |
| ·MBF1 的结构及功能 | 第20页 |
| ·MBF1 的结构 | 第20页 |
| ·MBF1 的功能 | 第20页 |
| ·启动子的研究进展 | 第20-23页 |
| ·启动子的概念 | 第20-21页 |
| ·组成型启动子 | 第21页 |
| ·诱导型启动子 | 第21-22页 |
| ·组织特异型启动子 | 第22页 |
| ·启动子顺式作用元件及反式作用因子鉴定分析方法 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第23-24页 |
| ·实验技术路线 | 第24-26页 |
| 第二章 陆地棉 GhMBF1c 基因的克隆及序列生物信息学分析 | 第26-37页 |
| ·材料与方法 | 第26页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·菌株及质粒 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-29页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·总 RNA 的提取及反转录 | 第26-27页 |
| ·GhMBF1c 基因的克隆 | 第27-28页 |
| ·GhMBF1c 基因及编码蛋白的生物信息学分析 | 第28-29页 |
| ·不同胁迫处理下基因表达谱的分析 | 第29页 |
| ·基因结构的分析 | 第29页 |
| ·实验结果与分析 | 第29-35页 |
| ·RNA 提取 | 第29-30页 |
| ·陆地棉 MBF1c 基因的分离 | 第30页 |
| ·GhMBF1c 基因及编码蛋白的生物信息学分析结果 | 第30-34页 |
| ·GhMBF1c 在胁迫处理下基因表达的分析 | 第34-35页 |
| ·基因组结构的分析 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 第三章 陆地棉 GhMBF1c 基因在大肠杆菌中的表达 | 第37-42页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·菌株与质粒 | 第37页 |
| ·常用试剂 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-39页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·GhMBF1c 在大肠杆菌中的诱导表达及 SDS-PAGE 分析 | 第38-39页 |
| ·实验结果与分析 | 第39-40页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第39-40页 |
| ·转化 E.coli BL21(DEC) | 第40页 |
| ·GhMBF1c 在 BL21 中的诱导表达及 SDS-PAGE 分析 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 陆地棉 GhMBF1c 在洋葱表皮中的瞬时表达 | 第42-45页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·实验质粒、菌株及材料 | 第42页 |
| ·生化试剂及试剂盒 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-43页 |
| ·载体的构建 | 第42页 |
| ·基因枪轰击洋葱表皮及 Confocal 下观察 | 第42-43页 |
| ·实验结果与分析 | 第43-44页 |
| ·GhMBF1c 融合表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·GhMBF1c 在洋葱表皮中的瞬时表达 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| 第五章 陆地棉 GhMBF1c 基因植物表达载体的构建及转化植物 | 第45-52页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·植物材料 | 第45页 |
| ·载体及菌株 | 第45页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第45页 |
| ·测序及引物合成 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-48页 |
| ·CaMv35S 启动子驱动的植物表达载体的构建及筛选 | 第45页 |
| ·农杆菌 GV3101 感受态的制备及转化 | 第45-46页 |
| ·蘸花法转化拟南芥 | 第46-47页 |
| ·拟南芥的初步筛选 | 第47页 |
| ·拟南芥的 PCR 鉴定 | 第47页 |
| ·农杆菌侵染法转化棉花步骤 | 第47-48页 |
| ·转基因棉花的分子鉴定 | 第48页 |
| ·RT-PCR 鉴定基因的表达情况 | 第48页 |
| ·实验结果与分析 | 第48-51页 |
| ·GhMBF1c 载体的构建验证及农杆菌转化 | 第48-49页 |
| ·拟南芥的种植及筛选 | 第49-50页 |
| ·转基因拟南芥的 PCR 鉴定 | 第50页 |
| ·农杆菌转化棉花 | 第50-51页 |
| ·RT-PCR | 第51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| 第六章 陆地棉 GhMBF1c 启动子的克隆及生物信息学分析 | 第52-59页 |
| ·实验材料 | 第52-53页 |
| ·菌株及载体 | 第52页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-55页 |
| ·启动子的克隆 | 第53-54页 |
| ·生物信息学分析 | 第54-55页 |
| ·实验结果与分析 | 第55-57页 |
| ·启动子的克隆 | 第55页 |
| ·启动子的生物信息信息学分析 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| 第七章 融合表达载体的构建及遗传转化 | 第59-65页 |
| ·实验材料 | 第59页 |
| ·菌株及载体 | 第59页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第59页 |
| ·实验方法 | 第59-61页 |
| ·载体的改造 | 第59页 |
| ·载体的构建及转化农杆菌 | 第59-60页 |
| ·拟南芥的转化及筛选 | 第60页 |
| ·棉花的转化 | 第60页 |
| ·GUS 组织化学染色 | 第60-61页 |
| ·热处理拟南芥 | 第61页 |
| ·结果与分析 | 第61-63页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第61-62页 |
| ·拟南芥的遗传转化及筛选 | 第62页 |
| ·棉花的遗传转化 | 第62页 |
| ·GUS 组织化学染色 | 第62-63页 |
| ·热处理下幼苗的 GUS 染色 | 第63页 |
| ·讨论与分析 | 第63-65页 |
| 第八章 陆地棉 MBF1c 启动子的缺失分析 | 第65-69页 |
| ·实验材料 | 第65页 |
| ·菌株及载体 | 第65页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第65页 |
| ·引物及测序 | 第65页 |
| ·实验方法 | 第65-66页 |
| ·启动子缺失片段的获得及表达载体的构建 | 第65页 |
| ·拟南芥转化 | 第65-66页 |
| ·拟南芥的转化及筛选 | 第66页 |
| ·拟南芥的分子检测 | 第66页 |
| ·GUS 组织化学染色 | 第66页 |
| ·实验结果与分析 | 第66-67页 |
| ·缺失载体构建 | 第66-67页 |
| ·拟南芥的转化及筛选 | 第67页 |
| ·讨论与分析 | 第67-69页 |
| 第九章 创新点、结论及展望 | 第69-71页 |
| ·创新点 | 第69页 |
| ·全文结论 | 第69页 |
| ·全文展望 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简历 | 第79页 |
