摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-24页 |
1 草甘膦 | 第11-12页 |
·草甘膦的特性 | 第11页 |
·草甘麟的应用 | 第11-12页 |
·草甘膦作用机理 | 第12页 |
2 草甘膦抗性基因 | 第12-14页 |
3 草甘膦抗性植物 | 第14-17页 |
·草甘膦抗性杂草 | 第14-16页 |
·草甘膦抗性作物 | 第16-17页 |
4 EPSP酶与草甘膦抗性 | 第17-22页 |
·EPSP酶分类及定位 | 第17页 |
·EPSPS合成酶的结构与活性区 | 第17-20页 |
·EPSP酶与草甘膦抗性的关系 | 第20-22页 |
5 草甘膦的降解 | 第22-23页 |
·草甘膦代谢产物 | 第22页 |
·草甘膦降解基因 | 第22-23页 |
6 本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-45页 |
1 实验材料 | 第24-29页 |
·样品 | 第24-25页 |
·菌株与载体 | 第25-27页 |
·引物 | 第27-28页 |
·试剂和酶 | 第28页 |
·培养基 | 第28-29页 |
·仪器设备 | 第29页 |
2 实验方法 | 第29-45页 |
·样品的处理 | 第29-30页 |
·抗性菌株的筛选 | 第30-31页 |
·抗性细菌的筛选 | 第30页 |
·抗性真菌的筛选 | 第30-31页 |
·抗性菌株的鉴定 | 第31-37页 |
·形态观察 | 第31页 |
·分子生物学方法鉴定 | 第31-37页 |
·EPSPS基因克隆与序列分析 | 第37-38页 |
·EPSPS基因克隆 | 第37-38页 |
·aroA基因序列分析 | 第38页 |
·EPSPS基因功能验证 | 第38-45页 |
·插入片段的制备 | 第38页 |
·重组菌株的构建 | 第38-39页 |
·蛋白表达 | 第39-41页 |
·aroA_(S001)基因对草甘膦的抗性水平 | 第41-42页 |
·构建转入水稻的载体 | 第42-45页 |
第三章 结果与分析 | 第45-67页 |
1 抗性菌株的筛选 | 第45-46页 |
2 抗性菌株的鉴定 | 第46-67页 |
·形态观察 | 第46-47页 |
·分子生物学方法鉴定 | 第47-57页 |
·16S rDNA扩增与序列分析 | 第47-53页 |
·ITS序列分析 | 第53-57页 |
·EPSPS基因克隆与序列分析 | 第57-61页 |
·EPSPS基因功能验证 | 第61-67页 |
·重组质粒pProA-aroA_(S001)的构建及蛋白表达 | 第61-63页 |
·肺炎克雷伯氏菌kpS001 aroA基因草甘膦抗性分析 | 第63-64页 |
·构建水稻转基因载体 | 第64-67页 |
第四章 结论与讨论 | 第67-71页 |
1 抗性菌株的筛选 | 第67-68页 |
2 抗性菌株的鉴定 | 第68-69页 |
3 肺炎克雷伯氏菌aroAS001基因序列分析 | 第69-70页 |
4 展望 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-80页 |
致谢 | 第80-81页 |