| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 第一章 OPN对OA软骨组织和细胞MMP-13表达的影响 | 第16-37页 |
| ·材料与方法 | 第16-24页 |
| ·主要仪器 | 第16-17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·实验标本来源 | 第17-18页 |
| ·Real-Time QPCR检测两组软骨标本OPN与MMP-13的mRNA表达 | 第18-20页 |
| ·细胞的分离、培养及鉴定 | 第20-22页 |
| ·OPN对OA软骨细胞MMP-13表达的影响 | 第22-24页 |
| ·统计学分析 | 第24页 |
| ·结果 | 第24-32页 |
| ·OPN、MMP-13在正常与OA软骨组织中的表达差异及相关性 | 第24-26页 |
| ·人膝OA软骨细胞分离、培养与鉴定 | 第26-28页 |
| ·OPN对OA软骨细胞MMP-13表达水平的影响 | 第28-32页 |
| ·讨论 | 第32-36页 |
| ·结论 | 第36-37页 |
| 第二章 OPN通过NF-κB调控MMP-13及Ⅱ型胶原的表达 | 第37-53页 |
| ·材料与方法 | 第37-40页 |
| ·主要仪器 | 第37-38页 |
| ·主要试剂 | 第38-39页 |
| ·OA软骨细胞培养 | 第39页 |
| ·OPN-siRNA制备与转染 | 第39-40页 |
| ·免疫突光技术检测NF-kB-P65的表达情况 | 第40页 |
| ·Western Blotting检测各组NF-κB p65、p-NF-κB p65、MMP-13、Ⅱ型胶原的蛋白水平 | 第40页 |
| ·统计学分析 | 第40页 |
| ·结果 | 第40-49页 |
| ·靶向抑制OPN的siRNA的沉默效率验证 | 第40-42页 |
| ·OPN通过NF-κB调控MMP13及COL21A的蛋白表达 | 第42-49页 |
| ·讨论 | 第49-52页 |
| ·结论 | 第52-53页 |
| 第三章 OPN对OA软骨细胞增殖的影响 | 第53-70页 |
| ·材料与试剂 | 第53-63页 |
| ·主要仪器 | 第53-54页 |
| ·主要试剂 | 第54-55页 |
| ·细胞株 | 第55页 |
| ·菌株 | 第55页 |
| ·病毒载体 | 第55页 |
| ·OPN-shRNA慢病毒骨架质粒构建 | 第55-59页 |
| ·OPN-shRNA慢病毒包装 | 第59-61页 |
| ·Real-time QPCR | 第61-62页 |
| ·Western Blotting | 第62页 |
| ·MTT检测 | 第62页 |
| ·Brdu检测方法 | 第62页 |
| ·统计学分析 | 第62-63页 |
| ·结果 | 第63-66页 |
| ·OPN-shRNA慢病毒构建、包装、转染及验证 | 第63-65页 |
| ·OPN对OA软骨细胞生长曲线的影响 | 第65-66页 |
| ·OPN对OA软骨细胞增殖的影响 | 第66页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| ·结论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 综述 | 第78-113页 |
| 参考文献 | 第99-113页 |
| 攻读学位期间的主要成果 | 第113-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
