| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 文献综述 | 第11-27页 |
| 第一章 p53 研究进展 | 第11-20页 |
| ·p53 的结构与生物学功能 | 第11-18页 |
| ·p53 的结构 | 第11-13页 |
| ·p53 的翻译后修饰与调控 | 第13-15页 |
| ·p53 的生物学功能 | 第15-18页 |
| ·p53 与重编程 | 第18-20页 |
| 第二章 哺乳动物体细胞核移植研究进展 | 第20-27页 |
| ·体细胞核移植中的表观重编程 | 第21-25页 |
| ·早期形态学变化 | 第21页 |
| ·染色体蛋白的变化 | 第21-22页 |
| ·组蛋白修饰的变化 | 第22页 |
| ·DNA 甲基化的变化 | 第22-24页 |
| ·X 染色体失活 | 第24页 |
| ·转录活动的变化 | 第24-25页 |
| ·提高体细胞核移植重编程效率的措施 | 第25-27页 |
| ·供体细胞的类型与来源 | 第25-26页 |
| ·受体卵母细胞的处理 | 第26页 |
| ·供体细胞与克隆胚的表观修饰药物处理 | 第26-27页 |
| 实验研究 | 第27-57页 |
| 第三章 p53 稳定干扰细胞系的构建 | 第27-43页 |
| ·材料与方法 | 第27-34页 |
| ·实验材料 | 第27-28页 |
| ·仪器设备 | 第28页 |
| ·耗材、试剂与配方 | 第28页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞的原代培养 | 第28-29页 |
| ·瞬时转染、稳定转染与阳性克隆筛选 | 第29-31页 |
| ·阳性克隆载体整合情况的鉴定 | 第31-32页 |
| ·RNA 提取、反转录与实时荧光定量 PCR | 第32-33页 |
| ·Western blot | 第33-34页 |
| ·实验结果 | 第34-40页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞的原代培养 | 第34页 |
| ·最佳干扰片段的筛选 | 第34-35页 |
| ·稳定转染与阳性单克隆筛选 | 第35-36页 |
| ·p53 干扰稳定克隆的鉴定 | 第36-37页 |
| ·p53 干扰稳定克隆中 p53 相关基因的表达 | 第37-38页 |
| ·流式细胞术检测 p53 干扰后的细胞周期情况 | 第38-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第四章 供体细胞 p53 干扰对牛体细胞核移植早期胚胎发育的影响 | 第43-57页 |
| ·材料与方法 | 第43-48页 |
| ·实验材料 | 第43页 |
| ·仪器设备 | 第43-44页 |
| ·耗材、试剂与配方 | 第44页 |
| ·卵母细胞的采集与成熟 | 第44-45页 |
| ·体细胞核移植 | 第45页 |
| ·体外受精 | 第45-46页 |
| ·胚胎免疫荧光染色与凋亡染色 | 第46页 |
| ·胚胎总 RNA 的提取和反转录 | 第46-47页 |
| ·亚硫酸氢盐测序 | 第47-48页 |
| ·结果 | 第48-54页 |
| ·p53 干扰后体细胞核移植胚胎卵裂率和囊胚率的变化 | 第48-49页 |
| ·p53 干扰后 SCNT 囊胚细胞数目情况 | 第49-50页 |
| ·p53 干扰后 SCNT 囊胚凋亡情况 | 第50-51页 |
| ·p53 干扰后 SCNT 囊胚发育相关基因的表达 | 第51页 |
| ·BSP 分析囊胚发育相关基因及印记基因的甲基化状态 | 第51-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 全文结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简介 | 第69页 |
