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有机磷杀虫剂ScFv抗体库的构建与筛选

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
目录第8-10页
第一章 文献综述第10-28页
   ·有机磷农药的理化性质第10页
   ·有机磷农药的毒理作用第10-11页
   ·有机磷农药的残留与危害第11页
   ·农药残留传统检测方法第11-14页
     ·波谱法第11页
     ·色谱法第11-13页
     ·酶抑制法第13-14页
   ·新型免疫化学检测方法第14-21页
     ·免疫分析第14-15页
     ·免疫传感器第15页
     ·免疫亲和色谱第15-16页
     ·免疫标记第16-17页
     ·抗体技术进展第17-21页
   ·噬菌体展示技术第21-26页
     ·噬菌体展示技术基本原理第21-22页
     ·噬菌体展示系统类型第22-24页
     ·噬菌体展示载体的构建第24页
     ·噬菌体展示表达文库的筛选第24-25页
     ·噬菌体展示技术应用举例第25-26页
   ·问题的提出与研究内容第26-28页
     ·问题的提出第26-27页
     ·本文的研究内容第27-28页
第二章 ScFv 基因的构建第28-34页
 引言第28页
   ·材料与方法第28-31页
     ·试验材料第28页
     ·主要仪器第28页
     ·主要试剂第28页
     ·小鼠脾脏总 RNA 的提取第28-29页
     ·cDNA 第一链的合成及 V_L 和 V_H 的 PCR 扩增第29-30页
     ·V_L和 V_H基因产物的回收与定量第30页
     ·ScFv 基因的构建第30-31页
   ·结果与分析第31-32页
     ·脾脏总 RNA 提取结果第31页
     ·V_L和 V_H的 PCR 扩增第31-32页
     ·ScFv 基因的构建第32页
   ·讨论第32-34页
     ·脾脏总 RNA 的提取第32-33页
     ·ScFv 基因的组装与扩增第33-34页
第三章 ScFv 噬菌体抗体库的构建第34-43页
 引言第34页
   ·材料与方法第34-38页
     ·菌株与质粒第34页
     ·工具酶与抗体第34页
     ·ScFv 基因和 pCANTAB 5E 的双酶切与连接转化第34-35页
     ·E.coliTGI 感受态细胞的制备(氯化钙法)第35-36页
     ·连接产物的转化及鉴定第36页
     ·噬菌体抗体库的构建第36-37页
     ·单链抗体的筛选第37页
     ·可溶性抗体的获得第37-38页
   ·结果与分析第38-41页
     ·重组噬菌体质粒的 PCR 鉴定第38页
     ·噬菌体库容的确定第38-39页
     ·单链抗体特异性鉴定第39页
     ·ELISA 检测呈阳性重组质粒的测序第39-40页
     ·可溶性 ScFv 的检测第40-41页
   ·讨论第41-43页
     ·噬菌体展示技术库容的保证第41页
     ·噬菌体单链抗体和可溶性抗体的表达第41-42页
     ·噬菌体单链抗体和可溶性抗体的筛选第42-43页
第四章 结论第43-44页
参考文献第44-48页
附录第48-51页
缩略词第51-52页
致谢第52-53页
作者简介第53页

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