| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 缩略词表 | 第14-16页 |
| 前言 | 第16-20页 |
| 第一部分 不同时期婴幼儿血管瘤组织差异 microRNA 的芯片检测和筛选 | 第20-57页 |
| 第一节 婴幼儿血管瘤标本的获得及处理 | 第20-26页 |
| 一， 实验材料 | 第20-21页 |
| （一） 主要试剂及试剂盒 | 第20-21页 |
| （二） 试剂配置 | 第21页 |
| （三） 实验仪器及设备 | 第21页 |
| 二， 实验方法 | 第21-23页 |
| （一） 标本的获取与保存 | 第21-22页 |
| （二） 石蜡切片的制备及 HE 染色 | 第22-23页 |
| （三） 石蜡切片免疫荧光染色 | 第23页 |
| 三， 实验结果与分析 | 第23-26页 |
| （一） 获取的婴幼儿血管瘤标本 | 第23页 |
| （二） 增生期和消退期婴幼儿血管瘤的 HE 染色和荧光染色确诊 | 第23-26页 |
| 第二节 婴幼儿血管瘤组织的 microRNA 芯片检测 | 第26-38页 |
| 一， 实验材料 | 第26-27页 |
| （一） 检测标本 | 第26页 |
| （二） 主要试剂及试剂盒 | 第26页 |
| （三） 实验仪器及设备 | 第26-27页 |
| 二， 实验方法 | 第27-31页 |
| （一） 总 RNA 提取和质检 | 第27-29页 |
| （二） Poly(A) Tailing | 第29页 |
| （三） FlashTag Biotin HSR Ligation | 第29-30页 |
| （四） 芯片杂交 | 第30页 |
| （五） 芯片洗涤和扫描 | 第30-31页 |
| 三， 实验结果与分析 | 第31-38页 |
| （一） 差异 microRNA 筛选数据 | 第31-32页 |
| （二） 差异 microRNA 聚类图 | 第32-33页 |
| （三） 靶基因的预测与基因功能分析 | 第33-36页 |
| （四） MicroRNA 与基因的调控网络 MicroRNA-Gene-Network | 第36-38页 |
| 第三节 不同时期婴幼儿血管瘤组织目标差异 microRNA 的实时定量PCR(RealTime-PCR)验证 | 第38-56页 |
| 一， 实验材料 | 第38-40页 |
| （一） 实验标本 | 第38页 |
| （二） 主要试剂与试剂盒 | 第38页 |
| （三） 试剂配制 | 第38-39页 |
| （四） 主要仪器设备 | 第39-40页 |
| 二， 实验方法 | 第40-43页 |
| （一） RNA 提取 | 第40-41页 |
| （三） Realtime-PCR 反应 | 第41-42页 |
| （四） 数据分析与统计学方法 | 第42-43页 |
| 三， 实验结果 | 第43-48页 |
| （一） 质控结果 | 第43-48页 |
| 四， 讨论 | 第48-56页 |
| 小结 | 第56-57页 |
| 第二部分 婴幼儿血管瘤血管内皮细胞的分离培养与鉴定 | 第57-71页 |
| 一， 实验材料 | 第57-58页 |
| （一） 主要试剂及试剂盒 | 第57-58页 |
| （二） 实验仪器及设备 | 第58页 |
| 二， 实验方法 | 第58-60页 |
| （一） 标本获取进行细胞磁珠分选 | 第58-59页 |
| （二） 细胞鉴定 | 第59-60页 |
| （三） 统计学方法 | 第60页 |
| 三， 实验结果与分析 | 第60-66页 |
| （一） 磁珠分选获得的培养细胞 | 第60-63页 |
| （二） 细胞鉴定 | 第63-66页 |
| 四， 讨论 | 第66-70页 |
| 小结 | 第70-71页 |
| 第三部分 miR-206，miR-29a 及 miR-455 在婴幼儿血管瘤血管内皮细胞中的作用 | 第71-83页 |
| 一， 实验材料 | 第71-72页 |
| （一） 主要试剂及试剂盒 | 第71页 |
| （二） 实验仪器及设备 | 第71-72页 |
| 二， 实验方法 | 第72-74页 |
| （一） miRNA 转染实验 | 第72页 |
| （二） 细胞增殖实验 | 第72-73页 |
| （三） 凋亡检测 | 第73页 |
| （四） 侵袭实验 | 第73-74页 |
| （五） 统计学方法 | 第74页 |
| 三， 实验结果与分析 | 第74-79页 |
| （一） miRNA 转染实验 | 第74-75页 |
| （二） 细胞增殖实验 | 第75页 |
| （三） 凋亡实验 | 第75-78页 |
| （四） 侵袭实验 | 第78-79页 |
| 四， 结论和讨论 | 第79-82页 |
| 小结 | 第82-83页 |
| 全文总结 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-90页 |
| 综述 | 第90-101页 |
| 参考文献 | 第96-101页 |
| 附录 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
