| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 1. 文献综述 | 第10-24页 |
| ·引言 | 第10-11页 |
| ·抗氧化系统 | 第11-15页 |
| ·活性氧(ROS)与细胞氧化损伤 | 第11-12页 |
| ·活性氧的产生和清除 | 第12-15页 |
| ·光呼吸及光合作用 | 第15-20页 |
| ·光呼吸代谢途径 | 第15-16页 |
| ·光呼吸的生理意义 | 第16-17页 |
| ·光呼吸与光合作用的关系 | 第17-19页 |
| ·光呼吸的调控 | 第19-20页 |
| ·CAT与光呼吸 | 第20页 |
| ·过氧化氢酶在提高植物生理功能方面的作用 | 第20-21页 |
| ·过氧化氢酶基因在农业上的应用前景 | 第21-22页 |
| ·本实验研究的目的及意义 | 第22-24页 |
| 2. 材料与方法 | 第24-41页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·植物材料和培养基 | 第24页 |
| ·菌种、表达载体及试剂 | 第24-25页 |
| ·本研究所用引物 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-33页 |
| ·表达载体的构建 | 第25-31页 |
| ·TRIZOL法提取水稻定长叶片的总RNA | 第25-26页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第26-27页 |
| ·回收目的片段 | 第27-28页 |
| ·回收的目的片段DNA与T载体的连接 | 第28页 |
| ·大肠杆菌(E.coli)DH5α感受态细胞的制备及转化 | 第28-29页 |
| ·质粒的提取 | 第29页 |
| ·过表达载体pTCK303/CATg和干扰载体pTCK303/CATi的构建 | 第29-31页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化及过表达植株再生 | 第31-32页 |
| ·农杆菌EHA105感受态的制备及转化 | 第31页 |
| ·根瘤农杆菌介导的转化方法 | 第31-32页 |
| ·抗性植株培养 | 第32页 |
| ·转基因水稻的GUS组织化学活性检测 | 第32页 |
| ·水稻T_0代转基因植株总DNA的PCR检测 | 第32-33页 |
| ·实验处理 | 第33-41页 |
| ·不同气体配比处理 | 第33-34页 |
| ·光合速率和光呼吸速率测定 | 第34页 |
| ·CAT Western blotting分析 | 第34-35页 |
| ·水稻蛋白提取 | 第34页 |
| ·蛋白质浓度测定及SDS-PAGE | 第34-35页 |
| ·转膜 | 第35页 |
| ·免疫印迹 | 第35页 |
| ·化学发光反应 | 第35页 |
| ·实时荧光定量PCR测定 | 第35-36页 |
| ·水稻定长叶片的总RNA | 第35-36页 |
| ·RNA纯度检测 | 第36页 |
| ·反转录获得cDNA的第一链 | 第36页 |
| ·RT-PCR检测水稻CAT基因的mRNA表达 | 第36页 |
| ·荧光定量PCR检测目的基因的表达水平 | 第36页 |
| ·酶活测定 | 第36-38页 |
| ·超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 | 第37页 |
| ·过氧化氢酶(CAT)活性测定 | 第37页 |
| ·抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性测定 | 第37-38页 |
| ·过氧化物酶(POD)活性测定 | 第38页 |
| ·愈创木酚过氧化物酶(Guaiacol peroxidase)活性测定 | 第38页 |
| ·谷胱甘肽还原酶(GR)活性测定 | 第38页 |
| ·谷胱甘肽转硫酶(GST)活性测定 | 第38页 |
| ·抗氧化物质的测定 | 第38-40页 |
| ·丙二醛(MDA)含量的测定 | 第39页 |
| ·过氧化氢(H_2O_2)含量的测定 | 第39页 |
| ·抗坏血酸(ASA)含量的测定 | 第39-40页 |
| ·谷胱甘肽含量的测定 | 第40页 |
| ·ROS组织化学检测 | 第40-41页 |
| ·H_2O_2组织化学检测 | 第40页 |
| ·O_2~(·-)组织化学检测 | 第40-41页 |
| 3. 结果与分析 | 第41-53页 |
| ·过氧化氢酶基因干扰和过表达载体的鉴定 | 第41-42页 |
| ·水稻愈伤的培养 | 第42-43页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化及植株再生 | 第42-43页 |
| ·转基因水稻GUS活性的组织化学检测 | 第43-44页 |
| ·ROS的变化 | 第44页 |
| ·H_2O_2及O_2~(·-)的变化 | 第44页 |
| ·转基因水稻PCR检测 | 第44-45页 |
| ·不同气体处理对植株表形的影响 | 第45-46页 |
| ·不同气体处理对转基因水稻叶片光合速率和光呼吸速率的影响 | 第46页 |
| ·不同气体配比对转基因水稻CATA蛋白表达分析 | 第46-47页 |
| ·不同气体配比处理对不同转基因水稻CAT基因定量PCR分析 | 第47页 |
| ·不同气体处理对转基因水稻叶片抗氧化酶活性及抗氧化物质含量的影响 | 第47-53页 |
| ·CAT活性分析 | 第47-48页 |
| ·SOD活性分析 | 第48页 |
| ·其它抗氧化酶(GR、POD、GPX、APX、GST)活性的变化 | 第48-50页 |
| ·丙二醛(MDA)及H_2O_2含量 | 第50-51页 |
| ·抗坏血酸含量 | 第51-52页 |
| ·谷胱甘肽(GSH)含量 | 第52-53页 |
| 4. 小结与讨论 | 第53-56页 |
| ·不同气体处理对光合和光呼吸系统的影响 | 第53-54页 |
| ·光呼吸与抗氧化系统 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 附录 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
