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小鼠种质安全保存方法和体系的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
1 引言第10-19页
   ·冷冻保存原理第10-11页
   ·冷冻损伤第11-12页
   ·小鼠精子冷冻保存第12-14页
   ·小鼠胚胎冷冻第14-15页
   ·小鼠卵母细胞冷冻保存第15-17页
   ·小鼠胚胎与配子冷冻的应用第17-18页
   ·本刊研究的意义第18-19页
2 一种新颖的小鼠保种体系第19-29页
   ·前言第19页
   ·实验材料第19-22页
     ·实验动物第19-20页
     ·主要试剂第20-21页
     ·主要仪器第21-22页
   ·实验设计第22-23页
   ·实验方法第23-25页
     ·公鼠单侧睾丸摘除手术第23页
     ·R18S3精子冷冻液配制方法第23页
     ·精液的收集与冷冻保存第23页
     ·单侧睾丸摘除小鼠的自然交配第23-24页
     ·冷冻精子的复苏第24页
     ·冻融精子的体外受精第24页
     ·小鼠的超排处理及卵子的收集第24页
     ·冻融精子的卵胞质内注射第24-25页
     ·胚胎移植第25页
   ·结果第25-27页
     ·单侧睾丸摘除公鼠的自然交配第25-26页
     ·ICR和GFP小鼠冷冻精子的体外受精第26-27页
     ·GFP小鼠冻融精子的显微受精第27页
   ·讨论第27-29页
3 ICSI及孤雌激活小鼠多卵子的冷冻第29-42页
   ·前言第29-30页
   ·实验材料第30-31页
     ·实验动物第30页
     ·主要试剂及仪器第30-31页
   ·实验方法第31-35页
     ·ICSI用针及拣卵针的制作第31页
     ·附睾尾精子的收集和冷冻第31-32页
     ·小鼠的超排处理及卵子的收集第32页
     ·冷冻精子的复苏第32页
     ·ICSI第32-33页
     ·卵子的孤雌激活第33-34页
     ·卵母细胞的慢速程序化冷冻第34页
     ·冷冻卵母细胞的快速解冻第34页
     ·免疫组化及激光共聚焦显微观察第34-35页
   ·数据统计第35页
   ·结果第35-40页
     ·ICSI并培养不同时间和孤雌激活不同时间后冷冻复苏存活率第35-36页
     ·冷冻ICSI及孤雌激活卵子复苏5hrs后的倍型第36-37页
     ·双原核卵母细胞的囊胚发育率第37页
     ·孤雌激活后冷冻复苏卵母细胞的倍型及发育率第37页
     ·ICSI卵子冷冻复苏后纺锤体和核的变化第37-40页
   ·讨论第40-42页
结论第42-43页
参考文献第43-49页
附录A第49-51页
附录B第51-53页
攻读学位期间发表的学术论文第53-54页
致谢第54-55页

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