摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
LIST OF ABBREVIATIONS | 第12-13页 |
第1章 综述 | 第13-21页 |
·组蛋白乙酰化的表观遗传基础 | 第13-15页 |
·染色体结构、组蛋白修饰与基因表达调控 | 第13-14页 |
·组蛋白乙酰化位点 | 第14-15页 |
·组蛋白去乙酰化酶研究现状 | 第15-18页 |
·组蛋白去乙酰化酶的分类 | 第15-16页 |
·组蛋白乙酰化与人类健康 | 第16-17页 |
·组蛋白去乙酰化酶基因在真菌基因调控和发育中的作用 | 第17-18页 |
·表观遗传修饰与新药发现 | 第18-21页 |
·沉默基因与表观遗传修饰 | 第18-19页 |
·表观遗传育种-开发微生物药物新手段 | 第19-21页 |
第2章 绪论 | 第21-23页 |
·本实验课题的提出 | 第21页 |
·本研究的内容目的及意义 | 第21-23页 |
·实验主要研究内容 | 第21-22页 |
·研究目的及意义 | 第22-23页 |
第3章 实验材料与方法 | 第23-31页 |
·实验材料 | 第23-26页 |
·菌株与载体 | 第23页 |
·试剂与培养基 | 第23-24页 |
·引物、酶与试剂盒 | 第24-25页 |
·主要使用仪器 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-31页 |
·基因组DNA和总RNA的提取 | 第26页 |
·紫外分光光度法检查总RNA含量 | 第26页 |
·RT-PCR | 第26-27页 |
·扩增Pci-RpdA和Pci-HdaA基因核心片段 | 第27-28页 |
·Pci-RpdA和Pci-HdaA基因3’端快速扩增(RACE技术) | 第28页 |
·扩增Pci-HdaA基因5’端序列(套式PCR) | 第28-29页 |
·Pci-RpdA和Pci-HdaA基因全长克隆 | 第29页 |
·测序 | 第29页 |
·生物信息学分析 | 第29页 |
·Pci-RpdA和Pci-HdaA的重组载体构建与诱导表达 | 第29-30页 |
·qRT-PCR检测Pci-RpdA和Pci-HdaA基因表达量 | 第30页 |
·工业菌株IMB002中Pci-RpdA和Pci-HdaA基因全长克隆 | 第30页 |
·序列对比 | 第30-31页 |
第4章 结果与分析 | 第31-55页 |
·Pci-RpdA和Pci-HdaA基因的克隆 | 第31-37页 |
·总基因组提取 | 第31页 |
·总RNA提取 | 第31-32页 |
·Pci-RpdA和Pci-HdaA核心片段的克隆 | 第32-33页 |
·Pci-RpdA和Pci-HdaA基因3’端cDNA序列克隆 | 第33-34页 |
·Pci-HdaA基因5’端片段扩增 | 第34-35页 |
·Pci-RpdA和Pci-HdaA基因的全长扩增及基因结构分析 | 第35-37页 |
·Pci-RpdA和Pci-HdaA的生物信息学解析 | 第37-43页 |
·Pci-RpdA和Pci-HdaA氨基酸序列分析 | 第37-40页 |
·Pci-RpdA和Pci-HdaA蛋白结构预测与分析 | 第40-42页 |
·Pci-RpdA和Pci-HdaA的同源性及进化树分析 | 第42-43页 |
·Pci-RpdA和Pci-HdaA的重组表达与纯化 | 第43-47页 |
·pET28a(+)-RpdA和pET28a(+)-HdaA载体构建与验证 | 第43-44页 |
·重组RpdA和重组HdaA的诱导表达初探 | 第44-45页 |
·重组RpdA的分离纯化 | 第45-47页 |
·Pci-RpdA和Pci-HdaA在桔青霉发酵过程中的转录特征分析 | 第47-50页 |
·桔青霉生长曲线的绘制 | 第47-48页 |
·Pci-RpdA和Pci-HdaA在菌株发酵过程中的qRT-PCR检测及分析 | 第48-50页 |
·工业菌株中Pci-RpdA和Pci-HdaA克隆及序列差异分析 | 第50-55页 |
·工业菌株中Pci-RpdA克隆及序列差异分析 | 第50-52页 |
·工业菌株中Pci-HdaA克隆及序列差异分析 | 第52-55页 |
第5章 讨论 | 第55-61页 |
·Pci-RpdA的特征讨论 | 第55-56页 |
·Pci-HdaA的特征讨论 | 第56页 |
·高产菌株序列差异的相关性讨论 | 第56-58页 |
·总结与创新点 | 第58-59页 |
·展望 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-65页 |
在读期间发表论文及所获奖励 | 第65-67页 |
致谢 | 第67-68页 |