| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 综述 | 第10-21页 |
| ·研究背景 | 第10-11页 |
| ·CaCCs | 第11-14页 |
| ·CaCCs的发现 | 第11-12页 |
| ·CaCCs生理机制与功能概述 | 第12页 |
| ·CaCCs的电生理特征 | 第12-14页 |
| ·TMEM16A | 第14-19页 |
| ·TMEM16A的发现过程 | 第14-16页 |
| ·TMEM16A的激活机制 | 第16-17页 |
| ·TMEM16A抑制剂的研究 | 第17页 |
| ·TMEM16A四级结构的研究 | 第17页 |
| ·TMEM16A的可变剪接及对功能的影响 | 第17-18页 |
| ·TMEM16A的组织定位及与疾病的关系 | 第18-19页 |
| ·研究目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-41页 |
| ·实验材料与实验仪器 | 第21-26页 |
| ·菌株、质粒和细胞 | 第21页 |
| ·实验试剂 | 第21页 |
| ·主要实验试剂的配制方法 | 第21-25页 |
| ·实验仪器 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-41页 |
| ·SW620细胞的培养 | 第26-27页 |
| ·细胞总RNA的提取和cDNA的合成 | 第27-29页 |
| ·pGEX-2T/hTMEM16A-sp基因的克隆和重组质粒的构建 | 第29-33页 |
| ·GST-hTMEM16A特异性肽段融合蛋白的表达与纯化 | 第33-34页 |
| ·表达产物的Western blotting分析 | 第34页 |
| ·GST-hTMEM16A特异性肽段融合蛋白多克隆抗体制备与纯化 | 第34-36页 |
| ·细胞免疫荧光实验 | 第36页 |
| ·hTMEM16A基因的克隆和pMD18-T-hTMEM16A克隆载体的构建 | 第36-39页 |
| ·重组表达载体pcDNA3.1/hTMEM16A构建 | 第39-41页 |
| 第三章 结果与分析 | 第41-51页 |
| ·细胞SW620总RNA的提取 | 第41-42页 |
| ·hTMEM16A-SP的PCR扩增 | 第42-43页 |
| ·pGEX-2T/hTMEM16A-sp表达载体的构建及鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组蛋白的诱导表达、纯化和Western blotting检测 | 第44-46页 |
| ·重组GST-hTMEM16A-特异性肽段多克隆抗体的纯化和效价的检测 | 第46-47页 |
| ·细胞免疫荧光检测抗体的特异性 | 第47-48页 |
| ·目的基因hTMEM16A的PCR扩增 | 第48-49页 |
| ·克隆载体pMD18-T-hTMEM16A的构建和双酶切鉴定 | 第49页 |
| ·真核表达载体pcDNA3.1/hTMEM16A的构建、双酶切鉴定和PCR鉴定 | 第49-51页 |
| 第四章 论文总结 | 第51-54页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·总结 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
