| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一篇 文献综述 | 第13-51页 |
| 第一章 嗜水气单胞菌的生物学特性、流行病学及主要毒力因子研究进展 | 第13-33页 |
| 摘要 | 第13页 |
| 1 嗜水气单胞菌的生物学特性 | 第13-15页 |
| ·菌名与分类地位 | 第13-14页 |
| ·形态特征 | 第14页 |
| ·生理生化特征 | 第14-15页 |
| 2 嗜水气单胞菌的流行病学 | 第15-18页 |
| ·嗜水气单胞菌的分布及宿主范围 | 第15页 |
| ·嗜水气单胞菌的传播及感染方式 | 第15-16页 |
| ·嗜水气单包菌的血清型 | 第16-17页 |
| ·嗜水气单胞菌所致疾病的病理特征 | 第17-18页 |
| 3 嗜水气单胞菌的致病机理 | 第18-24页 |
| ·粘附因子 | 第18-19页 |
| ·胞外产物(Extracellular Products,ECP) | 第19-22页 |
| ·Ⅲ型分泌系统(type Ⅲ secretion system,TTSS) | 第22-24页 |
| ABSTRACT | 第24-25页 |
| 参考文献 | 第25-33页 |
| 第二章 细菌菌蜕研究进展 | 第33-51页 |
| 摘要 | 第33页 |
| 1 菌蜕形成的过程和机制 | 第33-34页 |
| 2 菌蜕的基本结构 | 第34页 |
| 3 菌蜕的制备 | 第34-36页 |
| 4 菌蜕的应用 | 第36-43页 |
| ·菌蜕疫苗 | 第36-38页 |
| ·抗原载体 | 第38-40页 |
| ·核酸载体 | 第40-41页 |
| ·药物载体 | 第41-42页 |
| ·免疫佐剂 | 第42-43页 |
| 5 展望 | 第43-44页 |
| ABSTRACT | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 第二篇 试验研究 | 第51-129页 |
| 第三章 嗜水气单胞菌疫苗候选菌株的验证 | 第51-63页 |
| 摘要 | 第51页 |
| 1 材料和方法 | 第51-54页 |
| ·菌株 | 第51页 |
| ·选择性培养基筛选 | 第51页 |
| ·生理生化鉴定 | 第51-52页 |
| ·16S rDNA序列分析 | 第52-53页 |
| ·gyrB序列分析 | 第53页 |
| ·16S rRNA和gyrB基因序列系统进化树构建 | 第53-54页 |
| ·对异育银鲫半数致死浓度(LD50)的测定 | 第54页 |
| 2 结果 | 第54-58页 |
| ·J-1株的形态特征 | 第54-55页 |
| ·生理生化鉴定 | 第55-56页 |
| ·16S rRNA和gyrB鉴定结果 | 第56-58页 |
| ·J-1对异育银卿的半数致死浓度测定 | 第58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| ABSTRACT | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-63页 |
| 第四章 基于pR/pL分别启动裂解基因E和核酸酶A基因共表达载体的构建 | 第63-83页 |
| 摘要 | 第63-64页 |
| 1 材料和方法 | 第64-70页 |
| ·菌株、质粒和培养基 | 第64-65页 |
| ·质粒pBV220-E的构建 | 第65-67页 |
| ·质粒pBV220-SNA的构建 | 第67页 |
| ·质粒pKF396M的构建 | 第67-68页 |
| ·质粒pKF396M-2的构建 | 第68页 |
| ·质粒pKF396M-3的构建 | 第68页 |
| ·质粒pKF396M-4的构建 | 第68-69页 |
| ·质粒pKF396M-5的构建 | 第69页 |
| ·质粒pKF396M-2-GFP和pKF396M-3-GFP的构建 | 第69页 |
| ·基因E和SNA基因的诱导表达 | 第69-70页 |
| ·GFP的诱导与观察 | 第70页 |
| ·细菌基因组和质粒的制备和检测 | 第70页 |
| 2 结果 | 第70-77页 |
| ·pBV220系列衍生质粒的构建 | 第70-71页 |
| ·pKF16c系列衍生质粒的构建 | 第71-73页 |
| ·金黄色葡萄球菌核酸酶在大肠杆菌内的表达 | 第73-74页 |
| ·ESD对基因表达的影响 | 第74-75页 |
| ·裂解基因E和金黄色葡萄球菌核酸酶的共表达 | 第75-77页 |
| 3 讨论 | 第77-79页 |
| ABSTRACT | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-83页 |
| 第五章 嗜水气单胞菌aroA无标记缺失突变株的构建及其特性 | 第83-105页 |
| 摘要 | 第83-84页 |
| 1 材料和方法 | 第84-91页 |
| ·质粒与菌株 | 第84页 |
| ·主要试剂与培养基 | 第84页 |
| ·主要仪器 | 第84页 |
| ·大肠杆菌DH5α和SM10λpir感受态细胞的制备 | 第84-85页 |
| ·aroA基因及其上下游序列的克隆 | 第85页 |
| ·pDS133载体的构建 | 第85-86页 |
| ·重组自杀性质粒pDS133-L-R(aroA-)的构建 | 第86-89页 |
| ·结合转移及缺失株的筛选鉴定 | 第89-91页 |
| ·J-1△aroA株的特性 | 第91页 |
| 2 结果 | 第91-99页 |
| ·aroA基因及其上下游序列的克隆 | 第91-93页 |
| ·pDS133鉴定 | 第93-94页 |
| ·pDS133-L-R的构建及鉴定 | 第94页 |
| ·缺失株的筛选和鉴定 | 第94-95页 |
| ·J-1△aroA株的生物学特性 | 第95-99页 |
| 3 讨论 | 第99-102页 |
| ·J-1 aroA非抗性缺失突变株的构建及筛选 | 第99-100页 |
| ·J-1 aroA非标记缺失突变株的特性 | 第100-102页 |
| ABSTRACT | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-105页 |
| 第六章 基于染色体裂解基因E介导的嗜水气单胞菌菌蜕疫苗的制备 | 第105-119页 |
| 摘要 | 第105-106页 |
| 1 材料和方法 | 第106-109页 |
| ·质粒与菌株 | 第106页 |
| ·主要试剂与培养基 | 第106页 |
| ·主要仪器 | 第106页 |
| ·重组自杀性质粒pDS133-L-LC-R的构建 | 第106页 |
| ·大肠杆菌SM10λpir(pDS133-L-LC-R)的溶菌动力学 | 第106-108页 |
| ·结合转移及突变株的筛选鉴定 | 第108页 |
| ·嗜水气单胞菌J-1-LC的溶菌动力学 | 第108页 |
| ·扫描电镜观察 | 第108-109页 |
| 2 结果 | 第109-114页 |
| ·pDS133-L-LC-R的构建及鉴定 | 第109页 |
| ·大肠杆菌SM10λpir(pDS133-L-LC-R)的溶菌动力学 | 第109-110页 |
| ·缺失株的筛选和鉴定 | 第110-111页 |
| ·嗜水气单胞菌J-1-LC的溶菌动力学 | 第111-112页 |
| ·扫描电镜观察 | 第112-114页 |
| 3 讨论 | 第114-116页 |
| ABSTRACT | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-119页 |
| 第七章 嗜水气单胞菌菌蜕疫苗对异育银鲫的免疫保护 | 第119-129页 |
| 摘要 | 第119-120页 |
| 1 材料和方法 | 第120-122页 |
| ·菌株 | 第120页 |
| ·试验鱼 | 第120页 |
| ·疫苗制备 | 第120页 |
| ·免疫及血样采集 | 第120-121页 |
| ·凝集抗体效价测定 | 第121页 |
| ·杀菌活性 | 第121页 |
| ·溶菌酶活力 | 第121页 |
| ·攻击保护试验 | 第121-122页 |
| ·统计分析 | 第122页 |
| 2 结果 | 第122-124页 |
| ·血清抗体凝集效价、杀菌活性和溶菌酶活力 | 第122-124页 |
| ·免疫与攻击试验 | 第124页 |
| 3 讨论 | 第124-126页 |
| ABSTRACT | 第126-127页 |
| 参考文献 | 第127-129页 |
| 全文总结 | 第129-131页 |
| 附录 | 第131-133页 |
| 1 菌株与载体 | 第131页 |
| 2 主要试剂与培养基 | 第131-132页 |
| 3 主要仪器 | 第132-133页 |
| 发表论文及待发表论文 | 第133-135页 |
| 致谢 | 第135页 |
