| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 英文缩略词表 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一章 人脐带间充质干细胞的分离、培养及LPA受体检测 | 第15-34页 |
| 一、引言 | 第15-16页 |
| 二、实验材料 | 第16-18页 |
| ·主要试剂及实验材料 | 第16页 |
| ·主要实验器材 | 第16-17页 |
| ·常用溶液的配制 | 第17-18页 |
| ·肪带及细胞来源 | 第18页 |
| 三、实验方法 | 第18-26页 |
| ·人脐带间充质干细胞分离和培养 | 第18-21页 |
| ·人脐带问充质干细胞的分离 | 第18-19页 |
| ·脐带间充质干细胞传代 | 第19-20页 |
| ·脐带间充质干细胞冻存 | 第20页 |
| ·脐带间充质干细胞复苏 | 第20-21页 |
| ·脐带间充质干细胞生物学特性鉴定 | 第21-22页 |
| ·脐带间充质干细胞形态学观察 | 第21页 |
| ·脐带间充质干细胞标准曲线的制作 | 第21页 |
| ·MTT法细胞生长曲线的制作 | 第21-22页 |
| ·流式细胞术检测脐带间充质干细胞表面标记物 | 第22页 |
| ·Real Time PCR检测LPA受体基因的表达 | 第22-26页 |
| ·培养细胞 | 第22-23页 |
| ·总RNA提取 | 第23页 |
| ·去除总RNA中的基因组DNA | 第23-24页 |
| ·细胞cDNA的获得 | 第24页 |
| ·Real Time PCR检测LPA受体基因的表达 | 第24-26页 |
| 四、实验结果 | 第26-32页 |
| ·原代培养的脐带间充质干细胞形态学观察 | 第26-28页 |
| ·脐带间充质干细胞标准曲线 | 第28-29页 |
| ·脐带间充质干细胞生长曲线 | 第29页 |
| ·脐带间充质干细胞表面标记检测 | 第29-30页 |
| ·脐带间充质干细胞LPA受体基因的表达 | 第30-32页 |
| 五、小结 | 第32页 |
| 六、讨论 | 第32-34页 |
| 第二章 溶血磷脂酸抑制人脐带间充质干细胞凋亡及其分子机理研究 | 第34-58页 |
| 一、引言 | 第34-36页 |
| 二、实验材料 | 第36-38页 |
| ·主要试剂及实验材料 | 第36-37页 |
| ·主要实验器材 | 第37页 |
| ·常用溶液的配制 | 第37-38页 |
| 三、实验方法 | 第38-46页 |
| ·MTT法检测LPA对人脐带间充质干细胞的增殖作用 | 第38-39页 |
| ·Apo-ONE(?)Homogeneous Caspase-3/7试剂盒检测脂多糖(LPS)诱导的人脐带间充质干细胞Caspase酶活性 | 第39页 |
| ·Apo-ONE(?)Homogeneous Caspase-3/7试剂盒检测不同浓度LPA对脂多糖(LPS)诱导的人脐带间充质干细胞Caspase酶活性的影响 | 第39-40页 |
| ·Hoetchst33343染色法检测LPA对LPS诱导的人脐带间充质干细胞的影响 | 第40-41页 |
| ·检测Ki16425对LPA诱导人脐带间充质干细胞抗凋亡作用的影响 | 第41-42页 |
| ·检测PTX对LPA诱导人脐带间充质干细胞抗凋亡作用的影响 | 第42-44页 |
| ·检测LPA对LPS诱导的人脐带间充质干细胞Caspase8/9活性的影响 | 第44-45页 |
| ·统计学处理 | 第45-46页 |
| 四、实验结果 | 第46-53页 |
| ·LPA对人脐带间充质干细胞增殖的影响 | 第46-47页 |
| ·脂多糖(LPS)诱导人脐带间充质干细胞凋亡并提高Caspase3/7酶活性 | 第47-48页 |
| ·不同浓度LPA对脂多糖(LPS)诱导的人脐带间充质干细胞凋亡有减缓作用并将其Caspase3/7酶活性降低 | 第48-49页 |
| ·荧光染色结果显示LPA对LPS诱导的人脐带间充质干细胞的抗凋亡作用在形态及统计上都有显著效果 | 第49-51页 |
| ·Ki16425显著抑制LPA对人脐带间充质干细胞的抗凋亡作用 | 第51-52页 |
| ·PTX对LPA诱导人脐带间充质干细胞抗凋亡作用没有显著影响 | 第52-53页 |
| ·LPS诱导凋亡通过Caspase9途径,LPA对人脐带间充质干细胞Caspase9的活性没有影响 | 第53页 |
| 五、小结 | 第53-54页 |
| 六、讨论 | 第54-58页 |
| 全文总结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 文献综述 | 第63-74页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及参与的科研项目 | 第75页 |
