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乳腺癌细胞外泌体形态及转录组学的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 绪论第12-23页
   ·外泌体的组成研究第13-15页
     ·外泌体定义第13-14页
     ·外泌体内含物分析第14-15页
   ·外泌体的生物学功能研究进展第15-17页
   ·外泌体的应用价值研究第17-23页
     ·外泌体在诊断方面的应用第17-18页
     ·外泌体在治疗方面的应用第18-23页
第二章 外泌体提取方法的建立第23-28页
   ·实验材料第23-24页
     ·细胞株第23页
     ·主要试剂第23页
     ·主要仪器及耗材第23-24页
   ·实验方法第24-25页
     ·乳腺癌细胞系 MDA-MB-231 传代培养第24-25页
       ·配制并过滤 DMEM 培养基第24页
       ·灭活血清第24页
       ·配制抗青-链霉素第24页
       ·配制 PBS 磷酸缓冲液第24-25页
       ·培养 MDA-MB-231 细胞第25页
     ·外泌体的收集第25页
   ·实验结果第25-26页
   ·讨论第26-27页
   ·本章小结第27-28页
第三章 外泌体相关检测技术的研究第28-51页
   ·实验材料第28-30页
     ·主要试剂第28页
     ·主要仪器及耗材第28-29页
     ·引物序列第29-30页
   ·实验方法第30-39页
     ·原子力显微镜观察第30页
     ·动态光散射研究第30页
     ·Zeta 电位检测第30页
     ·Western blot 检测第30-34页
     ·特异核酸分析第34-39页
   ·实验结果第39-49页
     ·外泌体的原子力显微镜观察第39-41页
     ·外泌体的动态光散射研究第41-42页
     ·外泌体的 Zeta 电位检测第42页
     ·Flotillin-1 蛋白的分子表型鉴定第42-45页
     ·特异核酸 Mir21 的分析第45-49页
   ·讨论第49-50页
   ·本章小结第50-51页
第四章 外泌体克隆文库建立及高通量测序分析第51-68页
   ·实验材料第51页
     ·主要试剂第51页
     ·主要仪器第51页
     ·引物与接头序列第51页
   ·实验方法第51-56页
   ·实验结果第56-65页
     ·克隆质检结果及其分析第56-57页
     ·高通量测序结果及其分析第57-65页
       ·外泌体总 RNA 的测序结果第57页
       ·外泌体中基因表达丰度及在染色体上的分布第57-60页
       ·外泌体中基因的功能富集分析第60-65页
   ·讨论第65-67页
   ·本章小结第67-68页
第五章 总结与展望第68-70页
   ·主要工作与创新点第68页
   ·后续研究工作第68-70页
参考文献第70-75页
致谢第75-77页
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文第77页

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