摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第1章 前言 | 第8-14页 |
·研究背景 | 第8-14页 |
·MHC 的种类和功能 | 第8页 |
·MHC Ⅰ 和 MHC Ⅱ 的分子结构 | 第8-10页 |
·MHC Ⅱ 抗原呈递过程 | 第10-11页 |
·MHC 基因的染色体定位 | 第11页 |
·MHC 的进化 | 第11-12页 |
·鱼类 MHC Ⅱ 的研究现状 | 第12-13页 |
·研究目的和意义 | 第13-14页 |
第2章 实验材料 | 第14-16页 |
·主要实验试剂 | 第14-15页 |
·主要实验仪器 | 第15页 |
·实验动物 | 第15-16页 |
第3章 实验方法 | 第16-29页 |
·紫红笛鲷 MHC ⅡΑ和 MHC ⅡΒ全长 CDNA 的克隆 | 第16-19页 |
·紫红笛鲷 RNA 的提取 | 第16页 |
·紫红笛鲷 cDNA 的合成 | 第16-17页 |
·PCR 扩增 MHC Ⅱα和 MHC Ⅱβ全长 cDNA | 第17-18页 |
·DNA 片段和 pMD 18-T 载体的连接 | 第18页 |
·感受态细胞的制备 | 第18-19页 |
·连接产物转化感受态细胞 | 第19页 |
·MHC ⅡΑ和 MHC ⅡΒ表达载体的构建 | 第19-21页 |
·PCR 扩增 MHC Ⅱα和 MHC Ⅱβ部分开放阅读框 | 第19-20页 |
·PQE-30 质粒的提取和酶切 | 第20-21页 |
·MHC Ⅱα、MHC Ⅱβ酶切片段与 PQE-30 的连接 | 第21页 |
·重组蛋白表达和多克隆抗体的制备 | 第21-25页 |
·重组蛋白诱导表达时间的确定 | 第21-22页 |
·SDS-PAGE 蛋白电泳 | 第22-23页 |
·重组蛋白的大量表达 | 第23页 |
·包涵体纯化 | 第23页 |
·变性条件下纯化重组蛋白 | 第23-24页 |
·MHC Ⅱα和 MHC Ⅱβ多克隆抗体的制备 | 第24-25页 |
·多克隆抗体效价的检测 | 第25页 |
·MHC Ⅱ 在组织和细胞中的表达 | 第25-28页 |
·头肾巨噬细胞和脾脏淋巴细胞的分离 | 第25-27页 |
·外周血淋巴细胞(PBL)的分离 | 第27页 |
·蛋白样品的制备 | 第27页 |
·Western blot 检测 | 第27-28页 |
·生物信息类软件和方法 | 第28-29页 |
第4章 MHC ⅡΑ和 MHC ⅡΒ的克隆和进化分析 | 第29-39页 |
·MHC ⅡΑ和 MHC ⅡΒ全长 CDNA 序列 | 第29-31页 |
·BLAST 分析 MHC ⅡΑ和 MHC ⅡΒ序列相似性 | 第31-33页 |
·MHC ⅡΑ和 MHC ⅡΒ的聚类分析 | 第33-35页 |
·MHC Ⅱ 进化分析 | 第35-39页 |
·MHC Ⅱα和 MHC Ⅱβ和进化树构建 | 第35-36页 |
·MHC Ⅱ 和 MHC I 的进化树构建 | 第36-39页 |
第5章 MHC Ⅱ 重组蛋白表达和多克隆抗体的制备 | 第39-43页 |
·MHC ⅡΑ和 MHC ⅡΒ重组蛋白的表达与纯化 | 第39-40页 |
·紫红笛鲷 MHC ⅡΑ和 MHC ⅡΒ多克隆抗体效价检测 | 第40-41页 |
·MHC ⅡΑ和 MHC ⅡΒ多克隆抗体的免疫印迹检测 | 第41-43页 |
第6章 MHC ⅡΒ在紫红笛鲷组织和细胞中的表达分析 | 第43-46页 |
·MHC ⅡΒ在紫红笛鲷组织中的表达 | 第43-45页 |
·MHC Ⅱ 在紫红笛鲷头肾巨噬细胞和脾脏淋巴细胞中的表达 | 第45-46页 |
第7章 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
致谢 | 第51-53页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第53页 |