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花色相关基因的克隆鉴定及兰花遗传转化研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 绪论第14-26页
   ·引言第14-24页
     ·研究背景第14-16页
     ·国内外研究现状第16-24页
   ·研究目标和主要研究内容第24-25页
     ·研究目标第24页
     ·主要研究内容第24-25页
   ·研究技术路线第25-26页
第二章 类黄酮合成途径中关键酶基因的克隆第26-40页
   ·材料与方法第26-27页
     ·植物材料第26页
     ·菌株与载体第26页
     ·主要试剂盒、试剂及引物第26-27页
     ·培养基配方第27页
     ·主要仪器设备第27页
   ·试验方法第27-34页
     ·植物基因组 DNA 的提取第27-28页
     ·矮牵牛花瓣 RAN 的提取第28-29页
     ·反转录体系及程序第29-30页
     ·PCR 引物设计第30-31页
     ·PCR 反应体系:第31-32页
     ·PCR 目的片段的回收与纯化第32页
     ·PCR 产物的克隆第32-33页
     ·重组质粒的菌落 PCR 筛选第33-34页
   ·结果与分析第34-38页
     ·非洲堇 F3’5’H 基因的克隆第34-36页
     ·矮牵牛的 CHI 基因的克隆第36-37页
     ·矮牵牛 DFR 基因的克隆第37-38页
   ·讨论第38-40页
第三章 植物表达载体的构建第40-51页
   ·材料第40-41页
     ·质粒及菌种第40页
     ·培养基配方第40页
     ·试剂配制第40-41页
   ·方法第41-45页
     ·引物设计第41-42页
     ·大肠杆菌中质粒的提取第42-43页
     ·酶切位点的引入第43-44页
     ·酶切与连接第44页
     ·农杆菌 LBA4404 感受态的制备第44-45页
     ·植物表达载体转化农杆菌 LBA4404第45页
   ·结果与分析第45-50页
     ·正义、反义 CHS 基因植物表达载体的构建第45-47页
     ·正义 F3’5’H 基因植物表达载体的构建第47-49页
     ·植物表达载体转化农杆菌第49-50页
   ·讨论第50-51页
第四章 CHS 基因及 F3’5’H 基因在烟草中的表达分析第51-63页
   ·材料第51-52页
     ·植物材料第51页
     ·培养基与激素第51页
     ·实验器材第51-52页
   ·方法第52-55页
     ·根癌农杆菌介导的烟草遗传转化第52页
     ·转基因烟草再生苗的 PCR 检测第52-54页
     ·转基因烟草中类黄酮含量的检测第54页
     ·转基因烟草花色的观察第54-55页
   ·结果与分析第55-61页
     ·转基因烟草再生苗的获得第55页
     ·转基因烟草再生苗的 PCR 检测第55-56页
     ·转基因烟草中类黄酮含量的检测第56-59页
     ·转基因烟草花色、花型的观察第59-61页
   ·讨论第61-63页
第五章 兰花转基因受体系统的优化及遗传转化第63-68页
   ·实验材料第63-64页
     ·植物受体材料第63页
     ·主要仪器第63页
     ·培养基第63-64页
   ·方法第64-65页
     ·潮霉素筛选浓度的确定第64页
     ·农杆菌介导法导入 CHS 基因和 F3’5’H 基因第64-65页
   ·结果与讨论第65-66页
     ·最佳抗生素筛选浓度第65页
     ·农杆菌介导法遗传转化第65-66页
   ·讨论第66-68页
第六章 结论与展望第68-70页
   ·结论第68-69页
   ·展望第69-70页
参考文献第70-75页
附录第75-76页
在读期间的学术研究第76-77页
摘要第77-80页
致谢第80页

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