摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 绪论 | 第14-26页 |
·引言 | 第14-24页 |
·研究背景 | 第14-16页 |
·国内外研究现状 | 第16-24页 |
·研究目标和主要研究内容 | 第24-25页 |
·研究目标 | 第24页 |
·主要研究内容 | 第24-25页 |
·研究技术路线 | 第25-26页 |
第二章 类黄酮合成途径中关键酶基因的克隆 | 第26-40页 |
·材料与方法 | 第26-27页 |
·植物材料 | 第26页 |
·菌株与载体 | 第26页 |
·主要试剂盒、试剂及引物 | 第26-27页 |
·培养基配方 | 第27页 |
·主要仪器设备 | 第27页 |
·试验方法 | 第27-34页 |
·植物基因组 DNA 的提取 | 第27-28页 |
·矮牵牛花瓣 RAN 的提取 | 第28-29页 |
·反转录体系及程序 | 第29-30页 |
·PCR 引物设计 | 第30-31页 |
·PCR 反应体系: | 第31-32页 |
·PCR 目的片段的回收与纯化 | 第32页 |
·PCR 产物的克隆 | 第32-33页 |
·重组质粒的菌落 PCR 筛选 | 第33-34页 |
·结果与分析 | 第34-38页 |
·非洲堇 F3’5’H 基因的克隆 | 第34-36页 |
·矮牵牛的 CHI 基因的克隆 | 第36-37页 |
·矮牵牛 DFR 基因的克隆 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
第三章 植物表达载体的构建 | 第40-51页 |
·材料 | 第40-41页 |
·质粒及菌种 | 第40页 |
·培养基配方 | 第40页 |
·试剂配制 | 第40-41页 |
·方法 | 第41-45页 |
·引物设计 | 第41-42页 |
·大肠杆菌中质粒的提取 | 第42-43页 |
·酶切位点的引入 | 第43-44页 |
·酶切与连接 | 第44页 |
·农杆菌 LBA4404 感受态的制备 | 第44-45页 |
·植物表达载体转化农杆菌 LBA4404 | 第45页 |
·结果与分析 | 第45-50页 |
·正义、反义 CHS 基因植物表达载体的构建 | 第45-47页 |
·正义 F3’5’H 基因植物表达载体的构建 | 第47-49页 |
·植物表达载体转化农杆菌 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
第四章 CHS 基因及 F3’5’H 基因在烟草中的表达分析 | 第51-63页 |
·材料 | 第51-52页 |
·植物材料 | 第51页 |
·培养基与激素 | 第51页 |
·实验器材 | 第51-52页 |
·方法 | 第52-55页 |
·根癌农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第52页 |
·转基因烟草再生苗的 PCR 检测 | 第52-54页 |
·转基因烟草中类黄酮含量的检测 | 第54页 |
·转基因烟草花色的观察 | 第54-55页 |
·结果与分析 | 第55-61页 |
·转基因烟草再生苗的获得 | 第55页 |
·转基因烟草再生苗的 PCR 检测 | 第55-56页 |
·转基因烟草中类黄酮含量的检测 | 第56-59页 |
·转基因烟草花色、花型的观察 | 第59-61页 |
·讨论 | 第61-63页 |
第五章 兰花转基因受体系统的优化及遗传转化 | 第63-68页 |
·实验材料 | 第63-64页 |
·植物受体材料 | 第63页 |
·主要仪器 | 第63页 |
·培养基 | 第63-64页 |
·方法 | 第64-65页 |
·潮霉素筛选浓度的确定 | 第64页 |
·农杆菌介导法导入 CHS 基因和 F3’5’H 基因 | 第64-65页 |
·结果与讨论 | 第65-66页 |
·最佳抗生素筛选浓度 | 第65页 |
·农杆菌介导法遗传转化 | 第65-66页 |
·讨论 | 第66-68页 |
第六章 结论与展望 | 第68-70页 |
·结论 | 第68-69页 |
·展望 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-75页 |
附录 | 第75-76页 |
在读期间的学术研究 | 第76-77页 |
摘要 | 第77-80页 |
致谢 | 第80页 |