| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 英文缩写中英文对照表 | 第7-10页 |
| 文献综述 | 第10-18页 |
| 1. 病原 | 第10-14页 |
| ·鲁氏耶尔森氏菌的分类学地位 | 第10页 |
| ·鲁氏耶尔森氏菌的特征 | 第10-11页 |
| ·鲁氏耶尔森氏菌菌株分型 | 第11页 |
| ·致病机理 | 第11-13页 |
| ·主要毒力因子 | 第13-14页 |
| 2 临床症状及病理变化 | 第14-15页 |
| 3 诊断 | 第15页 |
| 4 免疫预防 | 第15-17页 |
| ·免疫机制 | 第15-16页 |
| ·疫苗 | 第16-17页 |
| 5 药物治疗 | 第17-18页 |
| 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第一节 Yrp1基因的克隆、鉴定及生物信息学分析 | 第19-35页 |
| 1 实验材料 | 第19-20页 |
| ·菌株及载体 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要溶液及培养基的配置 | 第19-20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20页 |
| ·主要生物信息学分析软件 | 第20页 |
| 2 实验方法 | 第20-23页 |
| ·引物设计 | 第20页 |
| ·鲁氏耶尔森氏菌基因组DNA的提取 | 第20页 |
| ·Yrp1基因克隆及测序 | 第20-22页 |
| ·Yrp1基因的分子特性分析 | 第22-23页 |
| ·Yrp1蛋白质序列分子特性分析 | 第23页 |
| 3. 结果 | 第23-33页 |
| ·Yrp1基因的PCR扩增和T-克隆鉴定 | 第23-24页 |
| ·重组质粒测序、比对及ORF分析 | 第24-25页 |
| ·Yrp1蛋白的分子特性分析 | 第25-33页 |
| 4. 讨论 | 第33-35页 |
| ·Yrp1基因的引物设计和T-克隆 | 第33页 |
| ·蛋白质序列的生物信息学分析 | 第33-34页 |
| ·密码子偏爱性对基因表达的影响 | 第34-35页 |
| 第二节 PET-32a(+)-yrp1表达载体的构建及表达条件的优化 | 第35-46页 |
| 1. 试验材料 | 第35-37页 |
| ·菌株及载体 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35-36页 |
| ·主要溶液及培养基的配置 | 第36-37页 |
| ·主要仪器设备 | 第37页 |
| 2. 试验方法 | 第37-39页 |
| ·Yrp1基因亚克隆 | 第37-38页 |
| ·重组质粒诱导表达 | 第38-39页 |
| ·诱导条件的优化 | 第39页 |
| 3. 结果 | 第39-43页 |
| ·重组质粒pET-32a(+)-yrp1的酶切鉴定 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白在宿主菌中的分布 | 第40-41页 |
| ·IPTG浓度优化 | 第41-42页 |
| ·诱导时间优化 | 第42-43页 |
| ·诱导温度优化 | 第43页 |
| 4. 讨论 | 第43-46页 |
| ·融合表达的意义 | 第43-44页 |
| ·影响表达的因素 | 第44页 |
| ·诱导条件的优化 | 第44-45页 |
| ·包涵体的形成及优点 | 第45-46页 |
| 结论与创新 | 第46-47页 |
| 1. 结论 | 第46页 |
| 2. 创新 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第55页 |