| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 第一部分 重组质粒pSilencer2.1-PECAM-1的构建及细胞转染 | 第10-18页 |
| 1 实验材料和方法 | 第10-15页 |
| ·实验材料 | 第10页 |
| ·重组质粒的构建 | 第10-13页 |
| ·PECAM-1的siRNA序列的设计与合成 | 第10-11页 |
| ·PECAM-1的siRNA片段克隆至pSilencer2.1载体 | 第11-12页 |
| ·重组质粒pSilencer2.1-PECAM-1的大量提取及纯化 | 第12-13页 |
| ·细胞转染 | 第13-15页 |
| ·细胞的复苏与培养 | 第13页 |
| ·细胞转染 | 第13-14页 |
| ·G418筛选单克隆细胞 | 第14-15页 |
| 2 实验结果 | 第15-18页 |
| 第二部分 稳定干扰CNE1/R中PECAM-1后其表达的检测 | 第18-26页 |
| 1 实验材料与方法 | 第18-23页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·干扰PECAM-1后Real Time PCR检测其表达 | 第19-21页 |
| ·细胞RNA的提取与质量检测 | 第19-20页 |
| ·逆转录反应 | 第20页 |
| ·Real Time PCR反应 | 第20-21页 |
| ·干扰PECAM-1后Western blot检测其表达 | 第21-23页 |
| ·细胞总蛋白的提取和定量 | 第21-22页 |
| ·Western blot | 第22-23页 |
| 2 实验结果 | 第23-26页 |
| 第三部分 干扰CNE1/R中PECAM-1后检测MDR-1表达 | 第26-29页 |
| 1 实验材料和方法 | 第26-27页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·干扰PECAM-1后Real time PCR检测MDR-1表达 | 第26页 |
| ·细胞RNA的提取与质量检测 | 第26页 |
| ·逆转录反应 | 第26页 |
| ·Real Time PCR反应 | 第26页 |
| ·干扰PECAM-1后Western blot检测MDR-1表达 | 第26-27页 |
| ·细胞总蛋白的提取和定量 | 第26-27页 |
| ·Western blot | 第27页 |
| 2 实验结果 | 第27-29页 |
| 讨论 | 第29-31页 |
| 结论 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-34页 |
| 文献综述 | 第34-42页 |
| 参考文献 | 第39-42页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
