| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 缩略语表（Abbreviation) | 第11-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-26页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征 | 第13页 |
| ·PRRSV病原特性 | 第13-15页 |
| ·PRRSV的分类及形态 | 第13页 |
| ·PRRSV的抗原性 | 第13-14页 |
| ·PRRSV的体外生长特性 | 第14-15页 |
| ·PRRSV分子生物学研究进展 | 第15-19页 |
| ·基因组结构及功能 | 第15页 |
| ·PRRSV的蛋白质 | 第15-19页 |
| ·PRRSV的免疫学反应 | 第19-23页 |
| ·体液免疫 | 第19-20页 |
| ·细胞免疫 | 第20-21页 |
| ·天然免疫 | 第21页 |
| ·PRRSV免疫逃避 | 第21-23页 |
| ·PRRS疫苗研究进展 | 第23-24页 |
| ·PRRS传统常规疫苗 | 第23页 |
| ·PRRS新型疫苗 | 第23-24页 |
| ·杆状病毒表达系统 | 第24-25页 |
| ·病毒样颗粒的特性 | 第25页 |
| ·杆状病毒作为病毒样颗粒表达载体的研究 | 第25-26页 |
| 第2章 研究目的和意义 | 第26-27页 |
| 第3章 材料与方法 | 第27-42页 |
| ·试验材料 | 第27-31页 |
| ·毒株、细胞与菌株 | 第27页 |
| ·载体与质粒 | 第27页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第27-28页 |
| ·培养基、抗生素的配制 | 第28页 |
| ·免疫反应试验所用抗原及血清 | 第28页 |
| ·主要缓冲液及相关试剂的配制 | 第28-30页 |
| ·试验动物 | 第30-31页 |
| ·试验方法 | 第31-42页 |
| ·限制性酶切反应 | 第31页 |
| ·PCR产物或酶切产物的电泳检测 | 第31页 |
| ·线性质粒DNA末端去磷酸化 | 第31页 |
| ·PCR产物或酶切产物回收与纯化 | 第31-32页 |
| ·外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第32页 |
| ·连接产物的转化 | 第32-33页 |
| ·质粒的制备与鉴定 | 第33-34页 |
| ·质粒转染(脂质体介导转染法) | 第34-35页 |
| ·包涵体提取 | 第35页 |
| ·ELISA检测方法的建立 | 第35页 |
| ·表达产物的Western blot检测 | 第35-37页 |
| ·半数细胞培养物感染量(TCID_(50))的测定 | 第37页 |
| ·微量中和试验(固定病毒-稀释血清法) | 第37页 |
| ·样品总RNA的提取 | 第37-38页 |
| ·细胞免疫的检测 | 第38-39页 |
| ·动物试验 | 第39页 |
| ·统计学方法 | 第39-40页 |
| ·重组Bacmid DNA的提取 | 第40页 |
| ·重组杆状病毒获得 | 第40-41页 |
| ·病毒样颗粒的表达及超速离心纯化 | 第41页 |
| ·病毒样颗粒的电镜观察 | 第41-42页 |
| 第4章 结果与分析 | 第42-52页 |
| ·PRRSV核酸疫苗的研究 | 第42-49页 |
| ·真核表达质粒的构建 | 第42-43页 |
| ·Western blot检测目的蛋白在真核细胞中的表达 | 第43-44页 |
| ·PRRSV GP5-ELISA检测方法的建立 | 第44页 |
| ·动物试验结果 | 第44-49页 |
| ·PRRSV病毒样颗粒组装的研究 | 第49-52页 |
| ·重组穿梭质粒的构建 | 第49-50页 |
| ·重组杆状病毒BV-ORF5/6、BV-ORF5/6/7和BV-ORF2/5/6/7的获得 | 第50页 |
| ·Western blot检测目的蛋白在昆虫细胞中的表达 | 第50-51页 |
| ·病毒样颗粒(VLPs)的纯化及电镜观察结果 | 第51-52页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第52-56页 |
| ·讨论 | 第52-55页 |
| ·重组真核表达质粒的构建 | 第52-53页 |
| ·GP5蛋白的原核表达与纯化 | 第53页 |
| ·共表达GP5,M和N蛋白在体内诱导的体液免疫应答 | 第53-54页 |
| ·共表达GP5,M和N蛋白在体内诱导的细胞免疫应答 | 第54页 |
| ·病毒样颗粒的组装 | 第54页 |
| ·病毒样颗粒疫苗的应用前景 | 第54-55页 |
| ·结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 在读期间发表的主要文章 | 第67页 |
