摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-16页 |
主要縮略词简表 | 第16-23页 |
第二章 材料与方法 | 第23-51页 |
1. 材料 | 第23-32页 |
·组织和细胞系样本 | 第23-24页 |
·实验动物 | 第24页 |
·菌株和质粒载体 | 第24页 |
·Human MicroRNA芯片 | 第24页 |
·试剂 | 第24-27页 |
·引物 | 第27-30页 |
·主要仪器 | 第30-32页 |
2 方法 | 第32-51页 |
·鼻咽癌标本及对照标本采集 | 第32页 |
·显微切割纯化鼻咽癌组织标本 | 第32页 |
·RNA的提取 | 第32-34页 |
·miRNA芯片 | 第34页 |
·miRNA芯片数据分析 | 第34-36页 |
·实时定量PCR(Real-time PCR)验证 | 第36-38页 |
·miRNA瞬时转染目的细胞 | 第38-39页 |
·质粒构建及细菌克隆 | 第39-43页 |
·细胞生物学实验 | 第43-44页 |
·免疫组化、免疫荧光检测和原位杂交检测 | 第44-47页 |
·Luciferrase检测miRNA靶基因 | 第47页 |
·Western Blot | 第47-49页 |
·裸鼠动物试验 | 第49-50页 |
·统计学分析 | 第50-51页 |
第三章 结果 | 第51-121页 |
第一部分:鼻咽癌不同临床阶段MIRNA组学动态表达规律 | 第51-75页 |
·鼻咽癌组织标本和对照上皮组织的收集 | 第51-53页 |
·鼻咽癌组织标本显微切割 | 第53-54页 |
·鼻咽癌不同临床分期及转移淋巴癌的miRNA芯片筛选 | 第54-61页 |
·鼻咽癌差异miRNA演进的动态表达模式 | 第61-63页 |
·差异miRNA的靶基因筛选 | 第63-66页 |
·差异miRNA的靶基因的GO及pathway分析 | 第66-69页 |
·差异表达miRNAs与靶基因的miRNAs-Genes调控网络 | 第69-71页 |
·差异miRNA的表达调控因素分析 | 第71-75页 |
第二部分:MIR-18A生物学功能研究 | 第75-99页 |
·鼻咽癌miRNA芯片中大部分miRNA下调趋势 | 第75-79页 |
·miR-18a在不同阶段的鼻咽癌中的表达以及与临床预后的相关性 | 第79-83页 |
·miR-18a促进鼻咽细胞的增殖、侵袭以及转移能力 | 第83-88页 |
·miR-18a过表达和knockdown的稳定细胞株构建 | 第88-94页 |
·miR-18a促进动物体内鼻咽癌的细胞的增殖和转移 | 第94-99页 |
第三部分:MIR-18A通过DICER1介导的鼻咽癌的致病机制 | 第99-121页 |
·miR-18a靶向调节Dicer1的表达 | 第99-102页 |
·miR-18a通过Dicer1调节miRNA的表达合成 | 第102-104页 |
·miR-18a通过Dicer1影响其生物学效应 | 第104-118页 |
·miR-18a与Dicer1表达的相关性分析 | 第118-121页 |
第四章 讨论 | 第121-133页 |
结论 | 第133-134页 |
参考文献 | 第134-147页 |
综述 | 第147-160页 |
参考文献 | 第156-160页 |
致谢 | 第160-161页 |
研究成果 | 第161-162页 |