| 致谢 | 第1-10页 |
| 缩写词 | 第10-13页 |
| 摘要 | 第13-15页 |
| Abstract | 第15-17页 |
| 前言 | 第17-19页 |
| 1 文献综述 | 第19-31页 |
| ·高等植物的成花途径 | 第19-21页 |
| ·促进成花转变的途径 | 第19-20页 |
| ·光周期途径 | 第19页 |
| ·激素的生物合成与信号转导途径 | 第19页 |
| ·光质途径 | 第19-20页 |
| ·环境温度途径 | 第20页 |
| ·激活成花转变的途径 | 第20页 |
| ·依赖春化作用的开花途径 | 第20页 |
| ·开花抑制途径 | 第20页 |
| ·自主开花途径 | 第20页 |
| ·复原途径 | 第20页 |
| ·三条途径间的关系 | 第20-21页 |
| ·春化作用的机理 | 第21-25页 |
| ·春化作用的中心因子FLC | 第21-22页 |
| ·FLC的发现 | 第21页 |
| ·FLC对春化作用的响应区域 | 第21-22页 |
| ·激活FLC的转录因子 | 第22-23页 |
| ·FRI | 第22页 |
| ·其他激活FLC的转录因子 | 第22-23页 |
| ·春化作用对FLC的抑制 | 第23-24页 |
| ·春化作用降低FLC的表达 | 第23页 |
| ·春化作用介导的FLC的后成表达沉默 | 第23页 |
| ·参与春化响应的基因 | 第23-24页 |
| ·其他途径对FLC的抑制 | 第24-25页 |
| ·自主开花途径基因对FLC的抑制 | 第24页 |
| ·FLD对FLC的抑制 | 第24-25页 |
| ·染色质修饰在成花时间控制中的作用 | 第25-28页 |
| ·FLC表达的激活 | 第25-26页 |
| ·FLC染色质H3-K4的超三甲基化与拟南芥冬性一年生植株开花的延迟有关 | 第25页 |
| ·H3-K4三甲基化与依赖ATP的核小体重构之间的联系 | 第25-26页 |
| ·FLC表达的抑制 | 第26-28页 |
| ·自主开花途径的某些基因通过组蛋白去乙酰化来抑制FLC的表 | 第26页 |
| ·由siRNA引起的FLC内含子1的H3-K9甲基化抑制FLC的表 | 第26页 |
| ·拟南芥对冬季的后成记忆是由FLC染色质的修饰引起的 | 第26-28页 |
| ·芸苔属作物FLC同源基因的研究 | 第28-31页 |
| ·Brassica rapa中FLC同源基因的研究 | 第28页 |
| ·Brassica napus中FLC同源基因的研究 | 第28-29页 |
| ·Brassica oleracea中FLC同源基因的研究 | 第29-31页 |
| 2 BcFLC基因的序列分析 | 第31-47页 |
| ·材料与方法 | 第31-35页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·BcFLC启动子引物设计 | 第31-32页 |
| ·TAIL-PCR反应程序 | 第32页 |
| ·TAIL-PCR扩增体系 | 第32-33页 |
| ·PCR产物的回收、纯化、连接、转化和测序 | 第33-35页 |
| ·试剂准备 | 第33页 |
| ·受体菌培养 | 第33页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·凝胶回收 | 第33-34页 |
| ·目的片段DNA与T载体的连接 | 第34页 |
| ·质粒的转化 | 第34页 |
| ·质粒抽提 | 第34-35页 |
| ·质粒的酶切检测 | 第35页 |
| ·核苷酸及氨基酸序列的分析 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-44页 |
| ·BcFLC编码序列的克隆与序列分析 | 第35-38页 |
| ·BcFLC内含子1片段的克隆与序列分析 | 第38-40页 |
| ·BcFLC启动子片段的克隆与序列分析 | 第40-44页 |
| ·BcFLC-1启动子片段的克隆 | 第40-41页 |
| ·BcFLC-2启动子片段的克隆 | 第41-42页 |
| ·BcFLC-1与BcFLC-2启动子片段的测序与序列分析 | 第42-44页 |
| ·讨论 | 第44-47页 |
| 3 BcFLC正义及反义表达载体的构建 | 第47-55页 |
| ·材料与方法 | 第47-50页 |
| ·菌株和质粒 | 第47页 |
| ·正义基因片段的获得 | 第47-48页 |
| ·反义基因片段的获得 | 第48-49页 |
| ·CaMV35S组成型启动子的正义表达载体构建 | 第49-50页 |
| ·双元载体pBI121制备 | 第49页 |
| ·BcFLC基因片段的制备 | 第49-50页 |
| ·表达质粒的构建过程 | 第50页 |
| ·pBI35S-BcFLC1和pBI35S-BcFLC2质粒直接转化农杆菌 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-53页 |
| ·正义BcFLC基因片段的获得 | 第50-51页 |
| ·反义BcFLC基因片段的获得 | 第51页 |
| ·CaMV35S组成型启动子的表达载体构建 | 第51-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 4 BcFLC正义及反义表达载体转化菜心和白菜 | 第55-61页 |
| ·材料与方法 | 第55-57页 |
| ·植物材料、菌株及抗生素 | 第55页 |
| ·培养基 | 第55-56页 |
| ·无菌苗的培养 | 第56页 |
| ·预培养 | 第56页 |
| ·共培养 | 第56页 |
| ·分化培养 | 第56页 |
| ·转基因苗生根与移栽 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-59页 |
| ·抗性转基因植株的获得 | 第57-58页 |
| ·组织培养过程中的畸形现象 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 5 转基因植株的分子检测与形态学观察 | 第61-71页 |
| ·材料与方法 | 第61-64页 |
| ·植物材料及试剂 | 第61页 |
| ·植物基因组DNA的提取 | 第61-62页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第62-63页 |
| ·Southern杂交检测 | 第63-64页 |
| ·转基因植株现蕾时间的记录 | 第64页 |
| ·结果与分析 | 第64-68页 |
| ·转基因植株基因组DNA的提取 | 第64页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第64-66页 |
| ·转化植株的Southern印迹杂交检测 | 第66页 |
| ·现蕾时间分析 | 第66-68页 |
| ·讨论 | 第68-71页 |
| 结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-77页 |
