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背根节神经嵴干细胞的分离培养和分化的研究

摘要第1-8页
Abstract第8-15页
前言第15-19页
第一部分 背根节神经干细胞的培养,鉴定及定向诱导其沿施旺氏细胞方向分化第19-36页
   ·主要材料、试剂和仪器设备第20-23页
     ·实验动物第20页
     ·试剂第20-23页
     ·实验仪器及耗材第23页
   ·方法第23-29页
     ·背根神经节干细胞原代培养第23-24页
     ·细胞传代培养第24页
     ·单细胞克隆第24页
     ·培养细胞的鉴定第24-26页
     ·神经干细胞比例检测第26页
     ·生长因子诱导背根神经节干细胞分化第26-27页
     ·诱导背根神经节干细胞分化的短时程和长时程效应检测第27页
     ·BrdU 标记检测bFGF 作用24 小时内细胞的增殖第27页
     ·分化的施旺氏细胞样细胞的细胞学和功能学特性鉴定第27-29页
   ·结果第29-31页
     ·背根神经节干细胞的培养及亚克隆实验第29页
     ·背根神经节干细胞的鉴定第29-30页
     ·神经干细胞比例检测结果第30页
     ·bFGF 处理促进背根节神经干细胞向施旺氏细胞方向分化第30页
     ·bFGF 在24 小时内影响背根节神经干细胞分化第30-31页
     ·背根节神经干细胞体外分化24 小时内,bFGF 不影响分化细胞的增殖第31页
     ·分化细胞的功能检测第31页
   ·讨论第31-35页
   ·结论第35-36页
第二部分 bFGF 诱导神经干细胞沿施旺氏细胞方向分化的机制研究第36-55页
   ·主要材料、试剂和仪器设备第36-37页
     ·试剂第36-37页
     ·实验仪器及耗材第37页
   ·方法第37-40页
     ·bFGF 在背根节神经干细胞体外分化过程中绑定的受体检测第37-39页
     ·bFGF 在背根节神经干细胞体外分化过程中参与的信号转导通路第39页
     ·bFGF 激活的信号转导通路所起的生物学效应第39页
     ·bFGF 在背根节神经干细胞体外分化过程中介导的基因调控第39-40页
   ·结果第40-42页
     ·bFGF 通过与FGFR1 相结合激活下游信号通路第40页
     ·背根节神经干细胞分化24 小时内,bFGF 介导神经干细胞分化的信号通路检测第40-41页
     ·背根节神经干细胞分化7d 内,bFGF 通过Erk1/2通路和PI3K通路促进细胞增殖第41-42页
     ·bFGF 在背根节神经干细胞体外分化过程中介导的基因调控第42页
   ·讨论第42-46页
   ·结论第46-55页
实验结果图示第55-76页
综述第76-113页
 参考文献第95-113页
攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文第113-115页
附录第115-132页
 附录(一)实验中所用的引物设计序列第115-116页
 附录(二)双向电泳分析诱导分化获得的细胞与原代培养的施旺氏细胞的蛋白表达差异第116-119页
 附录(三)LCMS-IT-TOF 质谱分析bFGF 作用背根节神经干细胞24h 前后的蛋白表达变化第119-122页
 附录(四)FGFR1 干扰载体构建和测序结果图第122-128页
 附录(五)bFGF 在背根节神经干细胞中激活的信号转导通路第128-129页
 附录(六)文章所用缩略词表第129-132页
致谢第132-133页

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