摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-15页 |
前言 | 第15-19页 |
第一部分 背根节神经干细胞的培养,鉴定及定向诱导其沿施旺氏细胞方向分化 | 第19-36页 |
·主要材料、试剂和仪器设备 | 第20-23页 |
·实验动物 | 第20页 |
·试剂 | 第20-23页 |
·实验仪器及耗材 | 第23页 |
·方法 | 第23-29页 |
·背根神经节干细胞原代培养 | 第23-24页 |
·细胞传代培养 | 第24页 |
·单细胞克隆 | 第24页 |
·培养细胞的鉴定 | 第24-26页 |
·神经干细胞比例检测 | 第26页 |
·生长因子诱导背根神经节干细胞分化 | 第26-27页 |
·诱导背根神经节干细胞分化的短时程和长时程效应检测 | 第27页 |
·BrdU 标记检测bFGF 作用24 小时内细胞的增殖 | 第27页 |
·分化的施旺氏细胞样细胞的细胞学和功能学特性鉴定 | 第27-29页 |
·结果 | 第29-31页 |
·背根神经节干细胞的培养及亚克隆实验 | 第29页 |
·背根神经节干细胞的鉴定 | 第29-30页 |
·神经干细胞比例检测结果 | 第30页 |
·bFGF 处理促进背根节神经干细胞向施旺氏细胞方向分化 | 第30页 |
·bFGF 在24 小时内影响背根节神经干细胞分化 | 第30-31页 |
·背根节神经干细胞体外分化24 小时内,bFGF 不影响分化细胞的增殖 | 第31页 |
·分化细胞的功能检测 | 第31页 |
·讨论 | 第31-35页 |
·结论 | 第35-36页 |
第二部分 bFGF 诱导神经干细胞沿施旺氏细胞方向分化的机制研究 | 第36-55页 |
·主要材料、试剂和仪器设备 | 第36-37页 |
·试剂 | 第36-37页 |
·实验仪器及耗材 | 第37页 |
·方法 | 第37-40页 |
·bFGF 在背根节神经干细胞体外分化过程中绑定的受体检测 | 第37-39页 |
·bFGF 在背根节神经干细胞体外分化过程中参与的信号转导通路 | 第39页 |
·bFGF 激活的信号转导通路所起的生物学效应 | 第39页 |
·bFGF 在背根节神经干细胞体外分化过程中介导的基因调控 | 第39-40页 |
·结果 | 第40-42页 |
·bFGF 通过与FGFR1 相结合激活下游信号通路 | 第40页 |
·背根节神经干细胞分化24 小时内,bFGF 介导神经干细胞分化的信号通路检测 | 第40-41页 |
·背根节神经干细胞分化7d 内,bFGF 通过Erk1/2通路和PI3K通路促进细胞增殖 | 第41-42页 |
·bFGF 在背根节神经干细胞体外分化过程中介导的基因调控 | 第42页 |
·讨论 | 第42-46页 |
·结论 | 第46-55页 |
实验结果图示 | 第55-76页 |
综述 | 第76-113页 |
参考文献 | 第95-113页 |
攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文 | 第113-115页 |
附录 | 第115-132页 |
附录(一)实验中所用的引物设计序列 | 第115-116页 |
附录(二)双向电泳分析诱导分化获得的细胞与原代培养的施旺氏细胞的蛋白表达差异 | 第116-119页 |
附录(三)LCMS-IT-TOF 质谱分析bFGF 作用背根节神经干细胞24h 前后的蛋白表达变化 | 第119-122页 |
附录(四)FGFR1 干扰载体构建和测序结果图 | 第122-128页 |
附录(五)bFGF 在背根节神经干细胞中激活的信号转导通路 | 第128-129页 |
附录(六)文章所用缩略词表 | 第129-132页 |
致谢 | 第132-133页 |